| 英文缩写 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| 英文摘要 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 材料和方法 | 第15-32页 |
| 一、 主要材料和试剂 | 第15-17页 |
| 二、 方法 | 第17-32页 |
| （一） 抗恶性疟原虫HRP-Ⅱ噬菌体单链抗体库的构建 | 第17-25页 |
| 1． 动物免疫 | 第17-18页 |
| 2． 脾细胞的获取 | 第18页 |
| 3． 总RNA的提取 | 第18页 |
| 4． mRNA的纯化 | 第18-19页 |
| 5． RT-PCR法扩增V_H及V_L片段 | 第19-20页 |
| 6． ScFv基因的组装及扩增 | 第20-21页 |
| 7． ScFv基因的连接转化 | 第21-24页 |
| 8． 噬菌体单链抗体库的构建 | 第24页 |
| 9． 噬菌体单链抗体库滴度的测定 | 第24页 |
| 10． 菌落筛选 | 第24-25页 |
| 11． 重组噬菌粒的PCR鉴定 | 第25页 |
| （二） 特异性抗HRP-Ⅱ阳性克隆的筛选与鉴定 | 第25-30页 |
| 1． 抗HRP-Ⅱ噬菌体单链抗体库的富集与淘选 | 第25-26页 |
| 2． 抗HRP-Ⅱ阳性克隆的筛选 | 第26-27页 |
| 3． 可溶性单链抗体的制备 | 第27-28页 |
| 4． 可溶性单链抗体的鉴定 | 第28-29页 |
| 5． 单链抗体基因的序列分析 | 第29-30页 |
| （三） 抗HRP-Ⅱ可溶性单链抗体表达条件的优化 | 第30页 |
| 1． 诱导温度的优化 | 第30页 |
| 2． 诱导时相的优化 | 第30页 |
| 3． 诱导时间的优化 | 第30页 |
| 4． 诱导剂浓度的优化 | 第30页 |
| （四） 可溶性单链抗体的大量制备和纯化 | 第30-32页 |
| 1． 可溶性单链抗体的大量制备 | 第30-31页 |
| 2． 饱和硫酸铵沉淀法初步纯化抗体 | 第31页 |
| 3． 阴离子交换柱纯化抗体 | 第31-32页 |
| 结果 | 第32-48页 |
| 一、 抗恶性疟原虫HRP-Ⅱ噬菌体单链抗体库的构建 | 第32-35页 |
| （一） RNA的提取及mRNA的纯化 | 第32页 |
| （二） V_H和V_L基因片段的扩增及鉴定 | 第32页 |
| （三） ScFv基因的组装及扩增 | 第32-33页 |
| （四） ScFv基因的克隆转化 | 第33页 |
| （五） 噬菌体抗体库滴度的测定 | 第33页 |
| （六） 菌落筛选 | 第33-34页 |
| （七） 重组噬菌粒的PCR鉴定 | 第34-35页 |
| 二、 特异性抗HRP-Ⅱ阳性克隆的筛选与鉴定 | 第35-42页 |
| （一） 抗HRP-Ⅱ噬菌体单链抗体库的富集与淘选 | 第35页 |
| （二） 抗HRP-Ⅱ阳性克隆的筛选 | 第35-42页 |
| 1． 重组噬菌粒的双酶切鉴定 | 第35-36页 |
| 2． 抗HRP-Ⅱ噬菌体单链抗体的免疫活性鉴定 | 第36页 |
| 3． 抗HRP-Ⅱ可溶性单链抗体的鉴定 | 第36-38页 |
| 4． 阳性克隆核酸序列分析结果 | 第38-42页 |
| 三、 抗HRP-Ⅱ可溶性单链抗体表达条件的优化 | 第42-44页 |
| （一） 诱导温度的优化 | 第42页 |
| （二） 诱导时相的优化 | 第42-43页 |
| （三） 诱导时间的优化 | 第43-44页 |
| （四） 诱导剂浓度的优化 | 第44页 |
| 四、 可溶性抗HRP-Ⅱ单链抗体的大量制备与纯化 | 第44-48页 |
| 讨论 | 第48-55页 |
| 小结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 综述一 | 第64-68页 |
| 综述二 | 第68-75页 |
| 附录 | 第75页 |