| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一部分 抗肿瘤侵袭与转移单链抗体scFv-M97基因构建克隆及可溶性表达 | 第14-61页 |
| 前言 | 第14-22页 |
| 1．单链抗体scFv基因构建 | 第22-25页 |
| (1) 小鼠杂交瘤M-97的培养与鉴定 | 第22-23页 |
| (2) 总RNA的提取与mRNA的纯化 | 第23页 |
| (3) RT-PCR扩增V_H、V_L基因 | 第23-24页 |
| (4) scFv基因的组装与二次PCR | 第24-25页 |
| 2．scFv基因克隆与重组噬菌体的富集与筛选 | 第25-27页 |
| (1) 重组噬菌粒表达载体的构建 | 第25-26页 |
| (2) 重组pCANTAB5E转化大肠杆菌TG1 | 第26页 |
| (3) 重组噬菌体抗体库的建立与抗原固相化富集筛选 | 第26-27页 |
| (4) ELISA鉴定抗原结合阳性重组噬菌体 | 第27页 |
| 3．抗Ⅳ型胶原酶单链抗体scFv-M97基因序列分析 | 第27-28页 |
| (1) 重组质粒的提取纯化与鉴定 | 第27-28页 |
| (2) 双脱氧末端终止法测序 | 第28页 |
| 4．scFv-M97的可溶性表达 | 第28-31页 |
| (1) 阳性重组噬菌体转染HB2151细胞 | 第28页 |
| (2) 免疫印迹鉴定表达产物 | 第28-30页 |
| (3) 表达产物的免疫活性及特异性分析 | 第30-31页 |
| 5．亲和层析纯化单链抗体scFv-M97 | 第31-32页 |
| (1) 亲和柱制备与亲和层析 | 第31页 |
| (2) SDS-PAGE鉴定纯化产物 | 第31-32页 |
| 结果与讨论 | 第32-58页 |
| 小结 | 第58-61页 |
| 第二部分 单抗M-97对肿瘤细胞生物学影响的研究 | 第61-79页 |
| 前言 | 第61-63页 |
| 1．Zymography测定单抗M-97对Lewis肺癌、HT1080细胞酶谱影响 | 第63-64页 |
| 2．MTT法测定单抗M-97对HT1080细胞粘附能力的影响 | 第64-65页 |
| 结果 | 第65-74页 |
| 讨论 | 第74-77页 |
| 小结 | 第77-79页 |
| 第三部分 烯二炔抗肿瘤抗生素单克隆抗体的建立与初步应用 | 第79-109页 |
| 前言 | 第79页 |
| 材料 | 第79-83页 |
| 方法 | 第83-88页 |
| 结果 | 第88-104页 |
| 讨论 | 第104-106页 |
| 小结 | 第106-109页 |
| 论文综述(一) 第三代抗体工程技术研究与应用的新进展 | 第109-125页 |
| 1．噬菌体抗体库技术 | 第109-114页 |
| 2．体外亲和力成熟技术 | 第114-115页 |
| 3．转基因抗体 | 第115-120页 |
| 4．胞内抗体技术及医学应用 | 第120-125页 |
| 论文综述(二) 基质金属蛋白酶及抑制剂在肿瘤侵袭转移中的研究 | 第125-138页 |
| 1．MMPs家族 | 第125-129页 |
| 2．Ⅳ型胶原酶 | 第129-131页 |
| 3．TIMP与肿瘤 | 第131-132页 |
| 4．以MMPs为靶点的抗肿瘤药物 | 第132-138页 |
| 致谢 | 第138页 |
