中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-10页 |
第一章 前言 | 第10-20页 |
·花背蟾蜍简介 | 第10页 |
·Pax基因家族进化 | 第10-11页 |
·Pax基因在中枢神经系统(CNS)发育中的综述 | 第11-14页 |
·Pax基因家族在神经发育过程与在神经再生中潜在的角色 | 第11-12页 |
·Pax基因能够加强中枢神经细胞的修复 | 第12页 |
·Pax基因参与中枢神经系统的分化 | 第12-13页 |
·Pax基因对干细胞的功能维护和自我更新 | 第13页 |
·Pax基因对细胞迁移的影响 | 第13-14页 |
·Pax基因与细胞命运决定的关系 | 第14页 |
·Pax基因家族与胚胎发育的关系 | 第14-15页 |
·Pax基因简介 | 第15-18页 |
·Pax1基因 | 第15-16页 |
·Pax2基因 | 第16页 |
·Pax3基因 | 第16页 |
·Pax4基因 | 第16-17页 |
·Pax5基因 | 第17页 |
·Pax6基因 | 第17页 |
·Pax7基因 | 第17页 |
·Pax8基因 | 第17-18页 |
·Pax9基因 | 第18页 |
·Pax6基因突变体及选择性剪切 | 第18-19页 |
·Pax基因家族之间关系介绍 | 第19页 |
·花背蟾蜍Pax6基因简介 | 第19页 |
·花背蟾蜍Pax6 variant基因简介 | 第19-20页 |
第二章 材料 | 第20-29页 |
·动物材料 | 第20页 |
·主要实验仪器 | 第20页 |
·实验药品 | 第20-21页 |
·生物学相关数据库与软件 | 第21-22页 |
·Genbank数据库 | 第21页 |
·BLAST数据库 | 第21页 |
·DNAClub数据库 | 第21页 |
·DNAMAN软件 | 第21-22页 |
·实验所需质粒与载体 | 第22-26页 |
·pMD-18T载体 | 第22-23页 |
·pET-28a质粒 | 第23-24页 |
·pGBKT7质粒 | 第24-25页 |
·pGADT7质粒 | 第25-26页 |
·实验试剂 | 第26-29页 |
·基因扩增与蛋白表达相关试剂 | 第26-27页 |
·酵母双杂交相关试剂 | 第27-28页 |
·免疫共沉淀实验相关试剂 | 第28-29页 |
第三章 方法 | 第29-36页 |
·花背蟾蜍Pax6和Pax6 variant基因的克隆与重组质粒构建 | 第29-32页 |
·胚胎组织总RNA的提取 | 第29页 |
·cDNA反转录 | 第29页 |
·目的基因扩增 | 第29-30页 |
·PCR扩增产物回收 | 第30页 |
·回收PCR产物构建如下载体 | 第30-31页 |
·大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第31页 |
·质粒提取 | 第31-32页 |
·花背蟾蜍蛋白表达、抗体制备与纯化 | 第32-33页 |
·质粒转化与筛选 | 第32页 |
·预诱导表达 | 第32页 |
·Pax6和Pax6 varian蛋白大量表达及纯化 | 第32页 |
·多克隆兔抗的制备 | 第32页 |
·抗体纯化 | 第32-33页 |
·酵母双杂交实验 | 第33-34页 |
·酵母双杂交质粒构建 | 第33-34页 |
·酵母双杂交实验 | 第34页 |
·免疫共沉淀Co-immunoprecipitation(Co-IP) | 第34-36页 |
·样品的制备 | 第34-35页 |
·Western blotting分析 | 第35-36页 |
第四章 结果 | 第36-44页 |
·Pax6 Variant的ORF与Pax6的ORF全序列的克隆 | 第36-38页 |
·胚胎组织总RNA提取电泳检测 | 第36页 |
·Pax6融合基因的扩增以及Pax6-pet28载体的构建 | 第36-37页 |
·Pax6 variant ORF全序列与Gfp-Pax6-variant融合扩增结果 | 第37-38页 |
·同源性分析 | 第38页 |
·蛋白诱导纯化与抗体制备 | 第38-39页 |
·酵母双杂交结果 | 第39-42页 |
·酵母双杂交重组质粒构建结果 | 第39-41页 |
·酵母双杂交实验结果 | 第41-42页 |
·免疫共沉淀结果 | 第42-44页 |
第五章 讨论 | 第44-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-56页 |
在学期间的研究成果 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附录 | 第58页 |