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Pax6和Pax6 variant在花背蟾蜍眼睛发育过程中的相互作用

中文摘要第1-4页
Abstract第4-6页
目录第6-10页
第一章 前言第10-20页
   ·花背蟾蜍简介第10页
   ·Pax基因家族进化第10-11页
   ·Pax基因在中枢神经系统(CNS)发育中的综述第11-14页
     ·Pax基因家族在神经发育过程与在神经再生中潜在的角色第11-12页
     ·Pax基因能够加强中枢神经细胞的修复第12页
     ·Pax基因参与中枢神经系统的分化第12-13页
     ·Pax基因对干细胞的功能维护和自我更新第13页
     ·Pax基因对细胞迁移的影响第13-14页
     ·Pax基因与细胞命运决定的关系第14页
   ·Pax基因家族与胚胎发育的关系第14-15页
   ·Pax基因简介第15-18页
     ·Pax1基因第15-16页
     ·Pax2基因第16页
     ·Pax3基因第16页
     ·Pax4基因第16-17页
     ·Pax5基因第17页
     ·Pax6基因第17页
     ·Pax7基因第17页
     ·Pax8基因第17-18页
     ·Pax9基因第18页
   ·Pax6基因突变体及选择性剪切第18-19页
   ·Pax基因家族之间关系介绍第19页
   ·花背蟾蜍Pax6基因简介第19页
   ·花背蟾蜍Pax6 variant基因简介第19-20页
第二章 材料第20-29页
   ·动物材料第20页
   ·主要实验仪器第20页
   ·实验药品第20-21页
   ·生物学相关数据库与软件第21-22页
     ·Genbank数据库第21页
     ·BLAST数据库第21页
     ·DNAClub数据库第21页
     ·DNAMAN软件第21-22页
   ·实验所需质粒与载体第22-26页
     ·pMD-18T载体第22-23页
     ·pET-28a质粒第23-24页
     ·pGBKT7质粒第24-25页
     ·pGADT7质粒第25-26页
   ·实验试剂第26-29页
     ·基因扩增与蛋白表达相关试剂第26-27页
     ·酵母双杂交相关试剂第27-28页
     ·免疫共沉淀实验相关试剂第28-29页
第三章 方法第29-36页
   ·花背蟾蜍Pax6和Pax6 variant基因的克隆与重组质粒构建第29-32页
     ·胚胎组织总RNA的提取第29页
     ·cDNA反转录第29页
     ·目的基因扩增第29-30页
     ·PCR扩增产物回收第30页
     ·回收PCR产物构建如下载体第30-31页
     ·大肠杆菌感受态的制备与转化第31页
     ·质粒提取第31-32页
   ·花背蟾蜍蛋白表达、抗体制备与纯化第32-33页
     ·质粒转化与筛选第32页
     ·预诱导表达第32页
     ·Pax6和Pax6 varian蛋白大量表达及纯化第32页
     ·多克隆兔抗的制备第32页
     ·抗体纯化第32-33页
   ·酵母双杂交实验第33-34页
     ·酵母双杂交质粒构建第33-34页
     ·酵母双杂交实验第34页
   ·免疫共沉淀Co-immunoprecipitation(Co-IP)第34-36页
     ·样品的制备第34-35页
     ·Western blotting分析第35-36页
第四章 结果第36-44页
   ·Pax6 Variant的ORF与Pax6的ORF全序列的克隆第36-38页
     ·胚胎组织总RNA提取电泳检测第36页
     ·Pax6融合基因的扩增以及Pax6-pet28载体的构建第36-37页
     ·Pax6 variant ORF全序列与Gfp-Pax6-variant融合扩增结果第37-38页
   ·同源性分析第38页
   ·蛋白诱导纯化与抗体制备第38-39页
   ·酵母双杂交结果第39-42页
     ·酵母双杂交重组质粒构建结果第39-41页
     ·酵母双杂交实验结果第41-42页
   ·免疫共沉淀结果第42-44页
第五章 讨论第44-46页
结论第46-47页
参考文献第47-56页
在学期间的研究成果第56-57页
致谢第57-58页
附录第58页

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