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结核亚单位疫苗Mtb8.4-HspX和HspX-Mtb8.4表达纯化及免疫保护效果研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
前言第9-11页
材料与方法第11-27页
   ·主要材料第11页
   ·主要设备第11页
   ·实验动物第11页
   ·受试人群第11-12页
   ·实验技术路线第12页
   ·融合蛋白8.4H和H8.4的表达及条件的优化第12-13页
   ·融合蛋白的纯化及保存条件第13-14页
   ·蛋白浓度测定第14-15页
   ·蛋白SDS-PAGE电泳相关试剂配制及方法第15-17页
   ·纯化后杂质的检测第17-18页
   ·ELISPOT方法检测融合蛋白8.4H和H8.4在人群中诱导的免疫应答第18-19页
   ·疫苗制备第19-20页
   ·亚单位疫苗免疫小鼠及感染、检测流程第20-21页
   ·小鼠血清及脾脏淋巴细胞的收集第21-22页
   ·脾脏淋巴细胞的孵育和细胞培养上清液收集及分装保存第22页
   ·ELISA方法测定结核抗原特异性IFN-γ、IL-2、TNF-α(试剂盒)第22-23页
   ·间接ELISA法检测小鼠血清抗体滴度第23-24页
   ·ELISPOT试剂盒检测8.4H-DPG与H8.4-DPG组小鼠IFN-γ水平第24页
   ·H37Rv毒株攻击小鼠及免疫保护效果评价第24-26页
   ·统计学分析第26-27页
实验结果第27-36页
   ·融合蛋白8.4H和H8.4的表达与纯化第27-28页
   ·蛋白8.4H和H8.4能够刺激人PBMC产生强烈的免疫应答第28页
   ·亚单位疫苗8.4H-DPG和H8.4-DPG刺激小鼠脾淋巴细胞分泌高水平的IFN-γ第28-29页
   ·亚单位疫苗8.4H-DPG和H8.4-DPG保护效果差异及组织病理学评价第29-30页
   ·亚单位疫苗8.4H-DDA和H8.4-DDA细胞免疫和体液免疫差异第30-31页
   ·亚单位疫苗8.4H-DDA接种剂量和免疫效应的关系第31-36页
讨论第36-39页
结论第39-40页
展望第40-41页
参考文献第41-44页
文献综述第44-51页
 参考文献第48-51页
攻读硕士学位期间发表的论文和成果第51-52页
致谢第52页

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