中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
引言 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-29页 |
1 定量 PCR 技术的发展简史 | 第13-14页 |
2 实时荧光定量 PCR | 第14-18页 |
·技术原理 | 第14-16页 |
·定量方法 | 第16-17页 |
·优越性及应用 | 第17-18页 |
3 内参基因的应用 | 第18-25页 |
·理想的内参基因 | 第19-22页 |
·内参基因标准化方法 | 第22-23页 |
·实时荧光定量 PCR 发文最低准则 | 第23-25页 |
4 体外转录与双跟踪荧光定量 PCR | 第25-29页 |
·昆虫转座子 piggyBac 和体外转录 | 第25-26页 |
·双跟踪荧光定量 PCR | 第26页 |
·双跟踪荧光定量原理及优点 | 第26-29页 |
第二章 实时荧光定量 PCR 内参基因标准化分析 | 第29-44页 |
1 材料与方法 | 第30-35页 |
·家蚕处理及解剖 | 第30页 |
·试剂与仪器: | 第30-31页 |
·核酸的提取 | 第31页 |
·cDNA 第一条链的合成: | 第31页 |
·引物设计 | 第31-33页 |
·Real-time PCR 反应 | 第33-34页 |
·标准曲线制作 | 第34页 |
·数据统计与分析 | 第34-35页 |
2.结果 | 第35-41页 |
·正常条件下内参基因的稳定性 | 第35-37页 |
·刺激条件下内参基因的稳定性 | 第37-41页 |
3. 讨论 | 第41-44页 |
·内参基因的选择及不稳定因素 | 第41-42页 |
·家蚕常用内参基因的分析 | 第42-44页 |
第三章 应用双跟踪标定技术检测内参基因的表达水平 | 第44-57页 |
1.材料与方法 | 第46-47页 |
·实验材料 | 第46页 |
·外源 RNA 与 DNA 参照物的制备 | 第46页 |
·核酸的提取 | 第46-47页 |
·引物设计 | 第47页 |
·Real-time PCR 反应 | 第47页 |
·标准曲线制作 | 第47页 |
·数据统计与分析 | 第47页 |
2 结果 | 第47-56页 |
·正常情况下,检测内参基因在不同发育时间点的表达变 | 第47-49页 |
·刺激条件下,检测内参基因的表达变化 | 第49-56页 |
3. 讨论 | 第56-57页 |
第四章 目的基因的检测 | 第57-66页 |
第一节 检测 GSTS1 基因在脂肪体中的表达水平 | 第57-61页 |
1 材料与方法 | 第57-58页 |
2 结果 | 第58-59页 |
3.讨论 | 第59-61页 |
第二节 GST 酶活性分析 | 第61-66页 |
1 材料与方法 | 第61-63页 |
2 结果与分析 | 第63-65页 |
3 讨论 | 第65-66页 |
结论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
在研期间发表论文 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |