| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 1 定量 PCR 技术的发展简史 | 第13-14页 |
| 2 实时荧光定量 PCR | 第14-18页 |
| ·技术原理 | 第14-16页 |
| ·定量方法 | 第16-17页 |
| ·优越性及应用 | 第17-18页 |
| 3 内参基因的应用 | 第18-25页 |
| ·理想的内参基因 | 第19-22页 |
| ·内参基因标准化方法 | 第22-23页 |
| ·实时荧光定量 PCR 发文最低准则 | 第23-25页 |
| 4 体外转录与双跟踪荧光定量 PCR | 第25-29页 |
| ·昆虫转座子 piggyBac 和体外转录 | 第25-26页 |
| ·双跟踪荧光定量 PCR | 第26页 |
| ·双跟踪荧光定量原理及优点 | 第26-29页 |
| 第二章 实时荧光定量 PCR 内参基因标准化分析 | 第29-44页 |
| 1 材料与方法 | 第30-35页 |
| ·家蚕处理及解剖 | 第30页 |
| ·试剂与仪器: | 第30-31页 |
| ·核酸的提取 | 第31页 |
| ·cDNA 第一条链的合成: | 第31页 |
| ·引物设计 | 第31-33页 |
| ·Real-time PCR 反应 | 第33-34页 |
| ·标准曲线制作 | 第34页 |
| ·数据统计与分析 | 第34-35页 |
| 2.结果 | 第35-41页 |
| ·正常条件下内参基因的稳定性 | 第35-37页 |
| ·刺激条件下内参基因的稳定性 | 第37-41页 |
| 3. 讨论 | 第41-44页 |
| ·内参基因的选择及不稳定因素 | 第41-42页 |
| ·家蚕常用内参基因的分析 | 第42-44页 |
| 第三章 应用双跟踪标定技术检测内参基因的表达水平 | 第44-57页 |
| 1.材料与方法 | 第46-47页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·外源 RNA 与 DNA 参照物的制备 | 第46页 |
| ·核酸的提取 | 第46-47页 |
| ·引物设计 | 第47页 |
| ·Real-time PCR 反应 | 第47页 |
| ·标准曲线制作 | 第47页 |
| ·数据统计与分析 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-56页 |
| ·正常情况下,检测内参基因在不同发育时间点的表达变 | 第47-49页 |
| ·刺激条件下,检测内参基因的表达变化 | 第49-56页 |
| 3. 讨论 | 第56-57页 |
| 第四章 目的基因的检测 | 第57-66页 |
| 第一节 检测 GSTS1 基因在脂肪体中的表达水平 | 第57-61页 |
| 1 材料与方法 | 第57-58页 |
| 2 结果 | 第58-59页 |
| 3.讨论 | 第59-61页 |
| 第二节 GST 酶活性分析 | 第61-66页 |
| 1 材料与方法 | 第61-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 在研期间发表论文 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |