| 缩略语表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-14页 |
| 英文摘要 | 第14-20页 |
| 前言 | 第20-22页 |
| 文献回顾 | 第22-40页 |
| 1. B19 病毒基因组结构及其变异 | 第23-27页 |
| 2. B19 病毒基因变异的生物学意义 | 第27-31页 |
| 3. 研究病毒基因及蛋白结构变异的表达系统的选择 | 第31-37页 |
| 4. B19病毒重组蛋白的应用展望 | 第37-40页 |
| 正文 人细小病毒B19-XA_2 株VP1 蛋白BAC-TO-BAC系统表达及免疫学特性分析 | 第40-104页 |
| 实验一人细小病毒B19-XA_2 株VP1 基因原核表达载体的构建、重组蛋白表达及初步鉴定 | 第40-64页 |
| 1 材料 | 第40-46页 |
| ·主要仪器 | 第40-41页 |
| ·主要材料与试剂 | 第41-43页 |
| ·主要工作液的配制 | 第43-46页 |
| 2 方法 | 第46-52页 |
| ·人细小病毒B19-XA_2株VP1 基因原核表达载体的构建与鉴定 | 第46-51页 |
| ·人细小病毒B19-XA_2株VP1 蛋白原核表达及初步鉴定 | 第51-52页 |
| 3 结果 | 第52-59页 |
| ·巢式及常规PCR扩增结果 | 第52页 |
| ·构建原核表达载体VP1-PET28(a) | 第52页 |
| ·重组转化子鉴定 | 第52-53页 |
| ·重组体阳性克隆序列测定结果 | 第53-58页 |
| ·表达产物鉴定 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-64页 |
| ·B19 病毒VP1 蛋白的研究意义 | 第59-60页 |
| ·表达系统的选择 | 第60-64页 |
| 实验二 人细小病毒B19-XA_2株VP1 蛋白在BAC-TO-BAC系统中的表达 | 第64-77页 |
| 1 材料 | 第64-68页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| ·主要材料与试剂 | 第64-65页 |
| ·主要工作液的配制 | 第65-68页 |
| 2 方法 | 第68-71页 |
| ·VP1-pFastBac1 供体质粒的构建与鉴定 | 第68-69页 |
| ·VP1-Bacmid穿梭载体的构建与鉴定 | 第69页 |
| ·细胞复苏与培养 | 第69-70页 |
| ·冻存细胞 | 第70页 |
| ·VP1-Bacmid转染Sf9 细胞 | 第70-71页 |
| ·杆状病毒的扩增 | 第71页 |
| ·细胞的裂解及蛋白表达的分析 | 第71页 |
| 3 结果 | 第71-74页 |
| ·重组质粒VP1-pFastBac1 的构建及鉴定 | 第71-73页 |
| ·重组穿梭载体VP1-Bacmid的构建及鉴定 | 第73页 |
| ·重组VP1-Bacmid转染Sf9 细胞 | 第73-74页 |
| ·重组杆状病毒的扩增及重组蛋白表达分析 | 第74页 |
| 4 讨论 | 第74-77页 |
| ·选用BEVS的优点 | 第74-75页 |
| ·本实验的改进 | 第75-77页 |
| 实验三 两种表达系统表达的B19-XA_2株VP1 重组蛋白免疫原性及反应原性分析 | 第77-85页 |
| 1 材料 | 第77-79页 |
| ·主要仪器 | 第77页 |
| ·主要材料与试剂 | 第77-78页 |
| ·主要工作液的配制 | 第78-79页 |
| 2 方法 | 第79-81页 |
| ·兔抗多克隆抗体的制备 | 第79页 |
| ·抗血清效价的测定 | 第79-80页 |
| ·德国ELISA试剂盒测定临床标本 | 第80-81页 |
| ·不同系统表达产物VP1 蛋白的反应原性 | 第81页 |
| 3 结果 | 第81-83页 |
| ·抗血清效价检测 | 第81页 |
| ·不同系统表达产物VP1 蛋白的反应原性分析 | 第81-83页 |
| 4 讨论 | 第83-85页 |
| 小结 | 第85-88页 |
| 参考文献 | 第88-104页 |
| 个人简历和研究成果 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105页 |
