| 缩略语表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| 英文摘要 | 第12-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 文献回顾 | 第18-28页 |
| 一、Notch 信号在中枢神经系统肿瘤的研究概况 | 第18-25页 |
| 二、免疫组织化学染色与抗原热修复 | 第25-28页 |
| 正文 | 第28-74页 |
| 实验一 Notch 1 在人脑胶质瘤中的表达及意义 | 第28-42页 |
| 1 材料 | 第29-31页 |
| ·细胞株 | 第29页 |
| ·组织标本 | 第29页 |
| ·主要工作液 | 第29-30页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第30-31页 |
| 2 方法 | 第31-37页 |
| ·细胞培养 | 第31-32页 |
| ·引物设计及合成 | 第32页 |
| ·细胞总RNA 提取 | 第32-34页 |
| ·反转录合成cDNA 第一链 | 第34页 |
| ·PCR 检测Notch 1 mRNA 在人脑胶质瘤细胞系的表达 | 第34-35页 |
| ·免疫组化染色方法 | 第35-36页 |
| ·免疫组化结果判读 | 第36页 |
| ·统计学分析 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-39页 |
| ·Notch 1 mRNA 在人脑胶质瘤细胞系中的表达 | 第37页 |
| ·Notch 1 蛋白在人正常脑组织和人脑胶质瘤组织中的表达与定位 | 第37-38页 |
| ·Notch 1 蛋白表达与临床病理学分级的关系 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 实验二 人源性Notch 1 胞内段真核表达载体的构建 | 第42-62页 |
| 1 材料 | 第42-46页 |
| ·细胞株和菌种 | 第42-43页 |
| ·质粒 | 第43-44页 |
| ·主要工作液 | 第44-45页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第45-46页 |
| 2 方法 | 第46-55页 |
| ·引物设计及合成 | 第46-47页 |
| ·细胞培养 | 第47页 |
| ·细胞总RNA 提取 | 第47页 |
| ·反转录合成cDNA 第一链 | 第47页 |
| ·PCR 扩增Notch 1 胞内段cDNA | 第47页 |
| ·DNA 凝胶回收 | 第47-48页 |
| ·目的DNA 片段与克隆载体的连接 | 第48-49页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第49页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第49-50页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第50-51页 |
| ·质粒提取 | 第51-52页 |
| ·目的基因与真核表达载体的连接 | 第52-53页 |
| ·细胞转染 | 第53-54页 |
| ·蛋白样品制备 | 第54页 |
| ·蛋白免疫印迹 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-60页 |
| ·细胞总RNA 质量的鉴定 | 第55-56页 |
| ·人源性Notch 1 胞内段cDNA 的克隆及鉴定 | 第56-58页 |
| ·真核表达载体pIRE52-EGFP-NICD 的构建及鉴定 | 第58-59页 |
| ·真核表达载体pIRE52-EGFP-NICD 在细胞中的表达 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 小结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 附图 | 第74-79页 |
| 个人简历 | 第79页 |
| 发表论文 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
