| Abstract | 第1-6页 |
| 主要英文缩略表 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| ·多花黑麦草简介 | 第9页 |
| ·多花黑麦草育种历史和现状 | 第9-11页 |
| ·牧草育种方法 | 第9-10页 |
| ·黑麦草愈伤组织的培养 | 第10-11页 |
| ·原生质体培养 | 第11页 |
| ·悬浮细胞培养 | 第11页 |
| ·花药培养 | 第11页 |
| ·茎尖分生组织培养 | 第11页 |
| ·遗传转化方法 | 第11-14页 |
| ·原生质体DNA直接吸入法 | 第12页 |
| ·微粒子轰击法 | 第12-13页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第13-14页 |
| ·AVP1基因与植物抗逆性研究 | 第14-16页 |
| ·AVP1基因介绍 | 第14页 |
| ·AVP1编码的H~+-PPase结构 | 第14-15页 |
| ·H~+-PPase的生理功能 | 第15-16页 |
| ·液泡膜H~+-PPase在植物耐盐抗旱中的作用 | 第16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 多花黑麦草高频再生体系的建立 | 第17-25页 |
| ·材料与方法 | 第17-19页 |
| ·试验材料 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-19页 |
| ·结果与分析 | 第19-22页 |
| ·不同灭菌方式对愈伤诱导的影响 | 第19页 |
| ·不同外植体处理对愈伤诱导的影响 | 第19-20页 |
| ·不同2,4-D、6-BA、CH多花黑麦草愈伤组织诱导的影响 | 第20-21页 |
| ·不同状态愈伤组织的再生试验结果分析 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22-25页 |
| ·外植体灭菌方法研究 | 第22-23页 |
| ·外植体的处理方式对愈伤诱导的影响 | 第23页 |
| ·基本培养基的选择 | 第23页 |
| ·植物激素及有机物添加剂CH对愈伤诱导的影响 | 第23-25页 |
| 第三章 AVP1基因转化多花黑麦草及转基因植株的鉴定 | 第25-39页 |
| ·试验材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·农杆菌菌株和质粒 | 第25页 |
| ·主要化学试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·培养基和缓冲液的配置 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-31页 |
| ·农杆菌的活化和保存 | 第27页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第27-28页 |
| ·受体材料的准备 | 第28页 |
| ·转化体系的建立 | 第28-29页 |
| ·多花黑麦草遗传转化和转基因植株的获得 | 第29页 |
| ·再生植株PCR鉴定 | 第29-30页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-36页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第31页 |
| ·G418对愈伤组织诱导率的影响 | 第31-32页 |
| ·农杆菌培养中抗菌素浓度的确定 | 第32页 |
| ·菌液浓度对转化效率的影响 | 第32-33页 |
| ·侵染时间对转化的影响 | 第33-34页 |
| ·共培养时间对转化效率的影响 | 第34页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)的浓度对转化效论的影响 | 第34-35页 |
| ·转基因植株PCR鉴定 | 第35页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-39页 |
| ·筛选剂的作用 | 第36页 |
| ·抗生素对愈伤组织诱导影响 | 第36-37页 |
| ·其他因素对多花黑麦草转化的影响 | 第37页 |
| ·AS对多花黑麦草转化的影响 | 第37页 |
| ·转基因植株PCR鉴定和RT-PCR鉴定 | 第37-39页 |
| 第四章 结论与展望 | 第39-40页 |
| ·结论 | 第39页 |
| ·多花黑麦草高频再生体系的建立 | 第39页 |
| ·多花黑麦草遗传转化体系的建立 | 第39页 |
| ·转基因多花黑麦草获得以及初步鉴定 | 第39页 |
| ·展望 | 第39-40页 |
| 附录 | 第40-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简历 | 第53页 |