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卤虫休眠胚胎发育过程中p90RSK途径调控细胞周期的分子机制

致谢第1-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-11页
插图和附表清单第11-13页
缩略词和术语表第13-15页
目次第15-18页
第1章 绪论第18-29页
   ·研究背景第18-28页
     ·卤虫概况第18-19页
     ·卤虫休眠胚胎的发育过程第19页
     ·p90核糖体S6蛋白激酶研究概况第19-20页
     ·p90核糖体S6蛋白激酶的分子结构及生化特征第20-21页
     ·p90核糖体S6蛋白激酶活化的分子机制第21-23页
     ·p90核糖体S6蛋白激酶的作用底物及主要功能第23-27页
     ·无脊椎动物中p90核糖体S6蛋白激酶的研究进展第27-28页
     ·展望第28页
   ·研究目的、方法和意义第28-29页
第2章 卤虫p90核糖体S6蛋白激酶的表达及活性分析第29-56页
   ·引言第29-30页
   ·材料第30-31页
     ·实验材料第30-31页
     ·主要试剂第31页
     ·主要仪器第31页
   ·方法第31-43页
     ·总RNA提取及cDNA合成第31-33页
     ·卤虫p90核糖体S6蛋白激酶基因的分子克隆第33-38页
     ·半定量RT-PCR第38-39页
     ·Western Blotting第39-41页
     ·免疫组织化学第41-42页
     ·DNA含量与细胞周期分析第42-43页
   ·结果第43-53页
     ·卤虫RSK基因的分子克隆与特征分析第43-46页
     ·RSK基因在卤虫生殖发育过程中的表达状况第46-47页
     ·RSK蛋白在卤虫休眠胚胎及幼虫发育过程中的活性分析第47-49页
     ·RSK激酶活性与细胞周期停滞的关系第49-53页
   ·小结与讨论第53-56页
     ·RSK分子典型C末端的缺失第53-54页
     ·卤虫RSK分子的表达与活化第54页
     ·卤虫休眠胚胎细胞周期停滞的时期第54-56页
第3章 p90核糖体S6蛋白激酶途径在卤虫胚胎及幼虫发育过程中的功能研究第56-90页
   ·引言第56-57页
   ·材料第57-59页
     ·实验材料第57页
     ·主要试剂第57-58页
     ·主要仪器第58-59页
   ·方法第59-76页
     ·双链RNA的制备第59-63页
     ·卤虫胚胎显微注射第63页
     ·定量PCR第63-65页
     ·免疫组织化学第65页
     ·BrdU的标记与检测第65-66页
     ·有丝分裂观察第66页
     ·RSK分子突变体的构建第66-68页
     ·细胞培养第68-69页
     ·细胞转染第69-70页
     ·免疫共沉淀第70页
     ·卤虫p26基因的分子克隆及相关表达载体的构建第70-73页
     ·Pull down检测第73-75页
     ·银染第75页
     ·Western blotting第75-76页
   ·结果第76-87页
     ·RSK活性对卤虫胚胎和幼虫发育过程中细胞有丝分裂的影响第76-80页
     ·卤虫RSK分子结构与突变体活性第80-82页
     ·卤虫RSK途径的上下游分子第82-87页
   ·小结与讨论第87-90页
     ·卤虫休眠胚胎及幼虫发育过程中的RSK活性与有丝分裂发生第87-89页
     ·参与卤虫休眠胚胎发育过程中细胞周期调控的RSK途径第89-90页
第4章 卤虫p90核糖体S6蛋白激酶在爪蟾系统中的功能研究第90-101页
   ·引言第90-91页
   ·材料第91-92页
     ·实验材料第91页
     ·主要试剂第91-92页
     ·主要仪器第92页
   ·方法第92-97页
     ·体外转录第92-94页
     ·爪蟾胚胎的显微注射第94-95页
     ·爪蟾卵母细胞的显微注射第95-96页
     ·Western blotting第96-97页
   ·结果第97-99页
     ·卤虫RSK分子在爪蟾胚胎中的表达活性第97-98页
     ·卤虫RSK分子对爪蟾卵母细胞成熟的影响第98-99页
   ·小结与讨论第99-101页
     ·卤虫RSK在爪蟾胚胎发育早期的表达活性第99-100页
     ·卵母细胞成熟过程中卤虫RSK与爪蟾RSK的功能比较第100-101页
结论与展望第101-103页
参考文献第103-113页
本研究的创新点第113-114页
附录 常用试剂配制一览表第114-121页
作者简历第121-122页

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