致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
插图和附表清单 | 第11-13页 |
缩略词和术语表 | 第13-15页 |
目次 | 第15-18页 |
第1章 绪论 | 第18-29页 |
·研究背景 | 第18-28页 |
·卤虫概况 | 第18-19页 |
·卤虫休眠胚胎的发育过程 | 第19页 |
·p90核糖体S6蛋白激酶研究概况 | 第19-20页 |
·p90核糖体S6蛋白激酶的分子结构及生化特征 | 第20-21页 |
·p90核糖体S6蛋白激酶活化的分子机制 | 第21-23页 |
·p90核糖体S6蛋白激酶的作用底物及主要功能 | 第23-27页 |
·无脊椎动物中p90核糖体S6蛋白激酶的研究进展 | 第27-28页 |
·展望 | 第28页 |
·研究目的、方法和意义 | 第28-29页 |
第2章 卤虫p90核糖体S6蛋白激酶的表达及活性分析 | 第29-56页 |
·引言 | 第29-30页 |
·材料 | 第30-31页 |
·实验材料 | 第30-31页 |
·主要试剂 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·方法 | 第31-43页 |
·总RNA提取及cDNA合成 | 第31-33页 |
·卤虫p90核糖体S6蛋白激酶基因的分子克隆 | 第33-38页 |
·半定量RT-PCR | 第38-39页 |
·Western Blotting | 第39-41页 |
·免疫组织化学 | 第41-42页 |
·DNA含量与细胞周期分析 | 第42-43页 |
·结果 | 第43-53页 |
·卤虫RSK基因的分子克隆与特征分析 | 第43-46页 |
·RSK基因在卤虫生殖发育过程中的表达状况 | 第46-47页 |
·RSK蛋白在卤虫休眠胚胎及幼虫发育过程中的活性分析 | 第47-49页 |
·RSK激酶活性与细胞周期停滞的关系 | 第49-53页 |
·小结与讨论 | 第53-56页 |
·RSK分子典型C末端的缺失 | 第53-54页 |
·卤虫RSK分子的表达与活化 | 第54页 |
·卤虫休眠胚胎细胞周期停滞的时期 | 第54-56页 |
第3章 p90核糖体S6蛋白激酶途径在卤虫胚胎及幼虫发育过程中的功能研究 | 第56-90页 |
·引言 | 第56-57页 |
·材料 | 第57-59页 |
·实验材料 | 第57页 |
·主要试剂 | 第57-58页 |
·主要仪器 | 第58-59页 |
·方法 | 第59-76页 |
·双链RNA的制备 | 第59-63页 |
·卤虫胚胎显微注射 | 第63页 |
·定量PCR | 第63-65页 |
·免疫组织化学 | 第65页 |
·BrdU的标记与检测 | 第65-66页 |
·有丝分裂观察 | 第66页 |
·RSK分子突变体的构建 | 第66-68页 |
·细胞培养 | 第68-69页 |
·细胞转染 | 第69-70页 |
·免疫共沉淀 | 第70页 |
·卤虫p26基因的分子克隆及相关表达载体的构建 | 第70-73页 |
·Pull down检测 | 第73-75页 |
·银染 | 第75页 |
·Western blotting | 第75-76页 |
·结果 | 第76-87页 |
·RSK活性对卤虫胚胎和幼虫发育过程中细胞有丝分裂的影响 | 第76-80页 |
·卤虫RSK分子结构与突变体活性 | 第80-82页 |
·卤虫RSK途径的上下游分子 | 第82-87页 |
·小结与讨论 | 第87-90页 |
·卤虫休眠胚胎及幼虫发育过程中的RSK活性与有丝分裂发生 | 第87-89页 |
·参与卤虫休眠胚胎发育过程中细胞周期调控的RSK途径 | 第89-90页 |
第4章 卤虫p90核糖体S6蛋白激酶在爪蟾系统中的功能研究 | 第90-101页 |
·引言 | 第90-91页 |
·材料 | 第91-92页 |
·实验材料 | 第91页 |
·主要试剂 | 第91-92页 |
·主要仪器 | 第92页 |
·方法 | 第92-97页 |
·体外转录 | 第92-94页 |
·爪蟾胚胎的显微注射 | 第94-95页 |
·爪蟾卵母细胞的显微注射 | 第95-96页 |
·Western blotting | 第96-97页 |
·结果 | 第97-99页 |
·卤虫RSK分子在爪蟾胚胎中的表达活性 | 第97-98页 |
·卤虫RSK分子对爪蟾卵母细胞成熟的影响 | 第98-99页 |
·小结与讨论 | 第99-101页 |
·卤虫RSK在爪蟾胚胎发育早期的表达活性 | 第99-100页 |
·卵母细胞成熟过程中卤虫RSK与爪蟾RSK的功能比较 | 第100-101页 |
结论与展望 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-113页 |
本研究的创新点 | 第113-114页 |
附录 常用试剂配制一览表 | 第114-121页 |
作者简历 | 第121-122页 |