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力学刺激调节神经嵴干细胞分化的实验研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
1 绪论第11-26页
   ·问题的提出与研究的意义第11-13页
     ·问题的提出第11-13页
     ·研究的意义第13页
   ·国内外研究的现状第13-23页
     ·血管壁结构与功能第13-15页
     ·组织工程化血管第15-18页
     ·神经嵴干细胞(NCSCs)的生物学特点第18-20页
     ·力学刺激在血管中的研究第20-23页
   ·本文的研究目的和研究内容第23-26页
     ·研究目的第23页
     ·研究内容第23页
     ·创新点第23-26页
2 神经嵴干细胞的分离与鉴定第26-45页
   ·引言第26-27页
   ·实验材料第27-29页
     ·实验细胞第27页
     ·主要实验仪器及耗材第27页
     ·主要实验试剂第27-29页
     ·主要试剂的配制第29页
   ·实验方法第29-35页
     ·NCSCs 的分离和纯化第29-31页
     ·细胞培养第31页
     ·NCSCs 特性分析第31页
     ·NCSCs 分化能力的检测第31-32页
     ·RNA 提取与qPCR第32-35页
     ·免疫荧光染色第35页
     ·激光共聚焦显微镜观察第35页
     ·数据分析第35页
   ·实验结果第35-41页
     ·NCSCs 形态观察第35-36页
     ·NCSCs 特性第36-38页
     ·NCSCs 多向分化潜能第38-41页
   ·分析讨论第41-43页
   ·本章小结第43-45页
3 软光刻技术和机械拉伸装置第45-57页
   ·引言第45-46页
   ·实验材料第46-47页
     ·实验细胞第46页
     ·主要实验仪器及耗材第46页
     ·主要实验试剂第46页
     ·主要试剂的配制第46-47页
   ·实验方法第47-52页
     ·软光刻技术第47-49页
     ·机械拉伸装置第49-50页
     ·力学加载实验第50-51页
     ·细胞微丝的免疫荧光染色第51页
     ·力学加载试验分组说明第51-52页
   ·实验结果第52-54页
     ·硅胶膜表面构型第52-53页
     ·机械拉伸对细胞形态的影响第53-54页
   ·分析讨论第54-55页
   ·本章小结第55-57页
4 神经嵴干细胞对机械拉伸的各向异性响应第57-78页
   ·引言第57-58页
   ·实验材料第58-60页
     ·实验细胞第58页
     ·主要实验仪器及耗材第58-59页
     ·主要实验试剂第59页
     ·主要试剂的配制第59-60页
   ·实验方法第60-65页
     ·蛋白表达的测定——Western Blot第60-62页
     ·细胞增殖的测定第62-63页
     ·细胞与细胞核形态的测定第63页
     ·组蛋白去乙酰化酶(HDAC) 活性的测定第63-64页
     ·RNA 提取与qPCR第64-65页
     ·免疫荧光染色第65页
     ·数据分析第65页
   ·实验结果第65-74页
     ·机械拉伸过程中的细胞分布第65-67页
     ·机械拉伸对细胞/细胞核形态指数的影响第67-69页
     ·机械拉伸对细胞增殖与组蛋白去乙酰化酶(HDAC) 活性的影响第69-71页
     ·机械拉伸对分化标记表达的影响第71-74页
   ·分析讨论第74-75页
   ·本章小结第75-78页
5 平行于微沟方向的机械拉伸对神经嵴干细胞分化的调节第78-95页
   ·引言第78页
   ·实验材料第78-80页
     ·实验细胞第78-79页
     ·主要实验仪器及耗材第79页
     ·主要实验试剂第79-80页
     ·主要试剂的配制第80页
   ·实验方法第80页
     ·免疫荧光染色第80页
     ·细胞与细胞核形态的测定第80页
     ·细胞增殖的测定第80页
     ·RNA 提取与qPCR第80页
     ·蛋白表达的测定——Western Blot第80页
     ·数据分析第80页
   ·实验结果第80-91页
     ·平行于微沟方向的机械拉伸对NCSCs 形态和增殖的影响第80-82页
     ·平行于微沟方向的机械拉伸对NCSCs 分化的影响第82-88页
     ·平行于微沟方向的机械拉伸与化学因子的共同作用对NCSCs 分化的影响第88-89页
     ·TGF-β1 和机械拉伸的前后处理对NCSCs 分化的影响第89-91页
   ·分析讨论第91-92页
   ·本章小结第92-95页
6 结论与展望第95-99页
   ·主要结论第95-96页
   ·后续研究工作的展望第96-99页
致谢第99-101页
参考文献第101-115页
附录第115-116页
 A. 作者攻读博士学位期间发表的论文目录第115-116页
 B. 作者攻读博士学位期间取得的科研成果目录第116页
 C. 作者攻读博士学位期间发表的会议论文目录第116页
 D. 作者攻读博士学位期间参加的科研项目第116页

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