| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 1 引言 | 第14-25页 |
| ·植物启动子的基本结构 | 第14-16页 |
| ·转录起始位点 | 第14-15页 |
| ·TATA 框 | 第15页 |
| ·一般上游启动子元件 | 第15-16页 |
| ·启动子的类型 | 第16-21页 |
| ·组成型启动子 | 第16-17页 |
| ·诱导型启动子 | 第17-19页 |
| ·组织特异性启动子 | 第19-21页 |
| ·启动子的克隆方法 | 第21-22页 |
| ·启动子的研究方法 | 第22-23页 |
| ·生物信息学分析与预测 | 第22页 |
| ·实验方法功能分析 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| ·材料及试剂 | 第25-28页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·质粒载体及菌种 | 第25页 |
| ·酶及化学试剂 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-27页 |
| ·PCR 引物 | 第27-28页 |
| ·提取的DNA（RNA）的浓度检测 | 第28页 |
| ·启动子顺式作用元件在线分析网站 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-39页 |
| ·SDS 碱裂解法小量提取金帅苹果基因组DNA | 第28-29页 |
| ·Tail-PCR 反应体系及程序 | 第29-30页 |
| ·凝胶回收DNA 片段 | 第30页 |
| ·PCR 反应产物连接反应 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·大肠杆菌DH5α热激转化 | 第31页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第31-32页 |
| ·序列测定 | 第32页 |
| ·植物表达载体构建 | 第32-34页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第34-35页 |
| ·农杆菌介导法转化烟草 | 第35页 |
| ·转基因烟草的PCR 筛选 | 第35-36页 |
| ·GUS 基因表达的定量分析 | 第36-37页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-56页 |
| ·MdAAT2 启动子序列的克隆 | 第39-41页 |
| ·第一次tail-PCR | 第39页 |
| ·第二次tail-PCR | 第39-40页 |
| ·两次tail-PCR 所得序列的拼接 | 第40-41页 |
| ·MdAAT2 启动子克隆片断的序列比对 | 第41-45页 |
| ·两次tail-PCR 片段比对 | 第41-43页 |
| ·拼接序列比对 | 第43-45页 |
| ·MdAAT2 启动子转录起始位点的确定 | 第45页 |
| ·MdAAT2 启动子与GUS 基因融合 | 第45-47页 |
| ·pBI121 表达载体的改造 | 第45-46页 |
| ·MdAAT2 启动子表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·表达载体的酶切鉴定 | 第47页 |
| ·含有MdAAT2 启动子转基因烟草的获得 | 第47-48页 |
| ·转化烟草 | 第47-48页 |
| ·转基因烟草的PCR 检测 | 第48页 |
| ·MdAAT2 启动子的GUS 基因表达的定量分析 | 第48-49页 |
| ·MdAAT2 启动子的GUS 组织化学分析 | 第49-52页 |
| ·未处理烟草不同组织的GUS 染色 | 第49-50页 |
| ·MeJA 处理烟草后不同组织的GUS 染色 | 第50-51页 |
| ·SA 处理烟草后不同组织的GUS 染色 | 第51页 |
| ·ETH 处理烟草后不同组织的GUS 染色 | 第51-52页 |
| ·MdAAT2 启动子的调控分析 | 第52-56页 |
| ·1201bp MdAAT2 启动子的结构分析 | 第52-53页 |
| ·MdAAT2 启动子缺失 5′端缺失突变体的获得 | 第53-54页 |
| ·MdAAT2 启动子缺失 3′端缺失突变体的获得 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读硕士学位期间完成的论文 | 第71页 |
