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头颈部鳞状细胞癌中表皮生长因子受体的表达、单核苷酸多态性及基因表达调控的初步研究

中文摘要第1-17页
英文摘要第17-25页
符号说明第25-26页
前言第26-32页
第一部分 头颈部鳞状细胞癌中EGFR表达与临床病理指标及预后的关系第32-46页
 材料与方法第32-35页
  实验对象第32页
  实验仪器及试剂第32-33页
  实验方法第33-35页
   组织RNA的制备第33页
   反转录制备cDNA第33-34页
   PCR扩增第34-35页
   统计分析第35页
 结果第35-37页
  SCCHN中EGFR表达变化第35页
  EGFR表达与年龄第35页
  EGFR表达与性别第35-36页
  EGFR表达与肿瘤原发部位第36页
  EGFR表达与原发肿瘤分化程度第36页
  EGFR表达与SCCHN TNM分期第36-37页
  EGFR表达与吸烟及饮酒第37页
  EGFR表达与SCCHN预后第37页
 讨论第37-40页
 小结第40-46页
第二部分 头颈部鳞状细胞癌中EGFR基因18~21号外显子单核苷酸多态性的研究第46-58页
 材料与方法第46-49页
  实验对象第46页
  实验仪器及试剂第46-47页
  实验方法第47-49页
   组织DNA的提取第47页
   PCR扩增第47-48页
   PCR产物的琼脂糖凝胶电泳及片段回收纯化第48-49页
   PCR回收纯化产物的测序第49页
   统计分析第49页
 结果第49-51页
  EGFR基因18~20号外显子测序结果第49页
  EGFR基因20号外显子sSNP与SCCHN原发部位第49页
  EGFR基因20号外显子sSNP与SCCHN肿瘤分化程度第49-50页
  EGFR基因20号外显子sSNP与SCCHN TNM分期第50页
  EGFR基因20号外显子sSNP与EGFR表达第50页
  EGFR基因20号外显子sSNP与SCCHN预后第50-51页
 讨论第51-53页
 小结第53-58页
第三部分 头颈部鳞状细胞癌中EGFR基因表达调控的初步研究第58-90页
 材料与方法第58-77页
  实验仪器及试剂第58-59页
  实验方法第59-77页
   人基因组DNA的提取第59-60页
   EGFR基因5′上游调控区2875bp片段-T载体重组质粒的构建第60-64页
   荧光素酶报道基因载体pGL3-EGFR-2875质粒的构建第64-68页
   细胞培养第68页
   细胞转染实验第68页
   荧光素酶活性测定第68-69页
   反转录聚合酶链反应(RT-PCR)第69-71页
   蛋白免疫印迹分析(Western blot)第71-74页
   pGL3-EGFR-2875缺失突变体-荧光素酶报道基因质粒的构建第74-77页
 结果第77-85页
  pGL3-EGFR-2875重组质粒的鉴定及测序第77-78页
  pGL3-EGFR-2875转染Hep2细胞及双荧光素酶活性测定第78页
  蛋白因子对Hep2细胞中pGL3-EGFR-2875活性的影响第78-81页
  不同浓度C/EBPα表达载体对pGL3-EGFR-2875活性的影响第81-82页
  RT-PCR检测C/EBPα过表达在mRNA水平对EGFR表达的影响第82页
  Western blot检测C/EBPα过表达在蛋白水平对EGFR表达的影响第82-83页
  pGL3-EGFR-2875系列缺失突变体的酶切鉴定第83-84页
  C/EBPα过表达对pGL3-EGFR-2875及其缺失突变体活性的影响第84-85页
 讨论第85-88页
 小结第88-90页
附图第90-101页
参考文献第101-115页
致谢第115-116页
博士在读期间发表的论文目录第116-117页
学位论文评阅及答辩情况表第117-118页
外文论文第118-143页

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