中文摘要 | 第1-17页 |
英文摘要 | 第17-25页 |
符号说明 | 第25-26页 |
前言 | 第26-32页 |
第一部分 头颈部鳞状细胞癌中EGFR表达与临床病理指标及预后的关系 | 第32-46页 |
材料与方法 | 第32-35页 |
实验对象 | 第32页 |
实验仪器及试剂 | 第32-33页 |
实验方法 | 第33-35页 |
组织RNA的制备 | 第33页 |
反转录制备cDNA | 第33-34页 |
PCR扩增 | 第34-35页 |
统计分析 | 第35页 |
结果 | 第35-37页 |
SCCHN中EGFR表达变化 | 第35页 |
EGFR表达与年龄 | 第35页 |
EGFR表达与性别 | 第35-36页 |
EGFR表达与肿瘤原发部位 | 第36页 |
EGFR表达与原发肿瘤分化程度 | 第36页 |
EGFR表达与SCCHN TNM分期 | 第36-37页 |
EGFR表达与吸烟及饮酒 | 第37页 |
EGFR表达与SCCHN预后 | 第37页 |
讨论 | 第37-40页 |
小结 | 第40-46页 |
第二部分 头颈部鳞状细胞癌中EGFR基因18~21号外显子单核苷酸多态性的研究 | 第46-58页 |
材料与方法 | 第46-49页 |
实验对象 | 第46页 |
实验仪器及试剂 | 第46-47页 |
实验方法 | 第47-49页 |
组织DNA的提取 | 第47页 |
PCR扩增 | 第47-48页 |
PCR产物的琼脂糖凝胶电泳及片段回收纯化 | 第48-49页 |
PCR回收纯化产物的测序 | 第49页 |
统计分析 | 第49页 |
结果 | 第49-51页 |
EGFR基因18~20号外显子测序结果 | 第49页 |
EGFR基因20号外显子sSNP与SCCHN原发部位 | 第49页 |
EGFR基因20号外显子sSNP与SCCHN肿瘤分化程度 | 第49-50页 |
EGFR基因20号外显子sSNP与SCCHN TNM分期 | 第50页 |
EGFR基因20号外显子sSNP与EGFR表达 | 第50页 |
EGFR基因20号外显子sSNP与SCCHN预后 | 第50-51页 |
讨论 | 第51-53页 |
小结 | 第53-58页 |
第三部分 头颈部鳞状细胞癌中EGFR基因表达调控的初步研究 | 第58-90页 |
材料与方法 | 第58-77页 |
实验仪器及试剂 | 第58-59页 |
实验方法 | 第59-77页 |
人基因组DNA的提取 | 第59-60页 |
EGFR基因5′上游调控区2875bp片段-T载体重组质粒的构建 | 第60-64页 |
荧光素酶报道基因载体pGL3-EGFR-2875质粒的构建 | 第64-68页 |
细胞培养 | 第68页 |
细胞转染实验 | 第68页 |
荧光素酶活性测定 | 第68-69页 |
反转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第69-71页 |
蛋白免疫印迹分析(Western blot) | 第71-74页 |
pGL3-EGFR-2875缺失突变体-荧光素酶报道基因质粒的构建 | 第74-77页 |
结果 | 第77-85页 |
pGL3-EGFR-2875重组质粒的鉴定及测序 | 第77-78页 |
pGL3-EGFR-2875转染Hep2细胞及双荧光素酶活性测定 | 第78页 |
蛋白因子对Hep2细胞中pGL3-EGFR-2875活性的影响 | 第78-81页 |
不同浓度C/EBPα表达载体对pGL3-EGFR-2875活性的影响 | 第81-82页 |
RT-PCR检测C/EBPα过表达在mRNA水平对EGFR表达的影响 | 第82页 |
Western blot检测C/EBPα过表达在蛋白水平对EGFR表达的影响 | 第82-83页 |
pGL3-EGFR-2875系列缺失突变体的酶切鉴定 | 第83-84页 |
C/EBPα过表达对pGL3-EGFR-2875及其缺失突变体活性的影响 | 第84-85页 |
讨论 | 第85-88页 |
小结 | 第88-90页 |
附图 | 第90-101页 |
参考文献 | 第101-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
博士在读期间发表的论文目录 | 第116-117页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第117-118页 |
外文论文 | 第118-143页 |