| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| 1 脾虚证 | 第12-14页 |
| ·脾气虚证 | 第12页 |
| ·脾阳虚证 | 第12-13页 |
| ·脾气虚与脾阳虚关系 | 第13页 |
| ·脾虚证与肠道菌群的关系 | 第13-14页 |
| 2 肠道菌群及其研究方法 | 第14-17页 |
| ·肠道菌群的作用 | 第14-15页 |
| ·肠道菌群的研究方法 | 第15-17页 |
| ·传统方法 | 第15-16页 |
| ·分子生物学方法 | 第16-17页 |
| 3 变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术 | 第17-19页 |
| 4 课题意义 | 第19-21页 |
| 第二章 人肠道菌群16S rDNA DGGE分析方法的建立 | 第21-34页 |
| 1 实验材料及仪器 | 第21-22页 |
| ·实验样品 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要实验仪器 | 第21-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-26页 |
| ·肠道菌群总DNA提取 | 第22页 |
| 1) 传统酚/氯仿法 | 第22页 |
| 2) 试剂盒法 | 第22页 |
| ·DNA质量检测 | 第22页 |
| ·PCR扩增程序 | 第22页 |
| ·PCR扩增体系 | 第22-23页 |
| ·16S rDNA产物检测 | 第23页 |
| ·DGGE分析 | 第23-26页 |
| 1) 制胶 | 第23页 |
| 2) 电泳时间 | 第23-24页 |
| 3) 变性剂梯度范围 | 第24页 |
| 4) 银染方法 | 第24-26页 |
| 3 结果 | 第26-31页 |
| ·总DNA提取方法考察 | 第26页 |
| ·16S rDNA-PCR DGGE扩增程序和扩增体系组成 | 第26-30页 |
| ·电泳时间的确定 | 第30页 |
| ·变性剂梯度范围考察 | 第30-31页 |
| ·银染方法考察 | 第31页 |
| 4 结论与讨论 | 第31-34页 |
| 第三章 健康人粪便肠道菌群16S rDNA DGGE分析 | 第34-42页 |
| 1 实验材料及仪器 | 第34页 |
| ·实验样品 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要实验仪器 | 第34页 |
| 2 方法 | 第34-36页 |
| ·总DNA提取 | 第34页 |
| ·DNA质量检测 | 第34页 |
| ·16S rDNA V3区扩增反应 | 第34-35页 |
| ·16S rDNA PCR产物的检测 | 第35页 |
| ·DGGE分析 | 第35页 |
| ·数据处理 | 第35-36页 |
| ·UPGMA聚类分析 | 第35页 |
| ·多维尺度分析(MDS) | 第35页 |
| ·主成分分析(PCA) | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-40页 |
| ·健康人群粪便肠道菌群16S rDNA V3区DGGE图谱分析 | 第36-37页 |
| ·健康人群粪便肠道菌群16S rDNA V3区UPGMA聚类分析 | 第37-38页 |
| ·健康人群粪便肠道菌群16S rDNA V3区多维尺度分析(MDS) | 第38-39页 |
| ·健康人群粪便肠道菌群16S rDNA V3区主成分分析(PCA) | 第39-40页 |
| 4 结论与讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 老年男性脾虚患者肠道菌群16S rDNADGGE分析 | 第42-54页 |
| 1 实验材料及仪器 | 第42页 |
| ·实验样品 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要实验仪器 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-43页 |
| ·总DNA提取 | 第42页 |
| ·DNA质量检测 | 第42页 |
| ·16S rDNA V3区扩增反应 | 第42-43页 |
| ·16S rDNA PCR产物的检测 | 第43页 |
| ·DGGE分析 | 第43页 |
| ·数据处理 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-52页 |
| ·脾虚患者粪便肠道菌群16S rDNA V3区DGGE图谱分析 | 第43-47页 |
| ·脾虚患者粪便肠道菌群16S rDNA V3区UPGMA聚类分析 | 第47-50页 |
| ·脾虚患者粪便肠道菌群16S rDNA V3区多维尺度分析(MDS) | 第50-51页 |
| ·脾虚患者粪便肠道菌群16S rDNA V3区主成分分析(PCA) | 第51-52页 |
| 4 结论与讨论 | 第52-54页 |
| 结论与展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 缩略语表 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 个人简历 | 第63页 |
