| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-26页 |
| 1 糖生物学 | 第9-10页 |
| 2 糖链的生物学意义 | 第10页 |
| 3 糖链与肿瘤 | 第10-12页 |
| ·N-聚糖分支的变更 | 第10-11页 |
| ·唾液酸数量、连键以及乙酰化的改变 | 第11页 |
| ·N-羟乙酰神经氨酸在人肿瘤中的表达 | 第11页 |
| ·糖胺聚糖表达的变更 | 第11-12页 |
| ·糖基化的改变的粘蛋白的病理作用 | 第12页 |
| ·癌细胞表面唾液酸化的Lewis结构和选凝素配体 | 第12页 |
| ·半乳凝素和多聚乳糖胺的表达 | 第12页 |
| 4 糖酶的结构和功能 | 第12-21页 |
| ·糖基转移酶 | 第12-15页 |
| ·糖基转移酶结构与功能 | 第12-13页 |
| ·糖基转移酶反应的一般性质 | 第13页 |
| ·糖基转移酶的程序性作用 | 第13-14页 |
| ·糖基转移酶与肝病 | 第14-15页 |
| ·糖苷酶 | 第15-20页 |
| ·糖苷酶的结构与功能 | 第15页 |
| ·a-甘露糖苷酶的分类 | 第15-16页 |
| ·甘露糖苷酶在糖基化过程中的作用 | 第16-18页 |
| ·a-甘露糖苷酶相关疾病 | 第18-20页 |
| ·磺基转移酶 | 第20-21页 |
| 5 肝癌标记物研究现状 | 第21-23页 |
| ·原发性肝癌的发病原因 | 第21页 |
| ·肝癌标记物种类 | 第21-23页 |
| ·甲胎蛋白 | 第21-22页 |
| ·γ-谷氨酰转肽酶及同工酶 | 第22页 |
| ·白细胞介素-8 | 第22页 |
| ·异常凝血酶原 | 第22页 |
| ·高尔基蛋白73 | 第22页 |
| ·肝细胞生长因子 | 第22页 |
| ·人端粒酶反转录酶mRNA | 第22-23页 |
| ·铁蛋白及酸性同工铁蛋白 | 第23页 |
| 6 基因芯片技术及其应用 | 第23-26页 |
| ·基因芯片技术概述 | 第23-24页 |
| ·基因芯片的应用 | 第24-26页 |
| 第二章 糖类相关基因芯片的设计与制作 | 第26-29页 |
| 1 糖酶基因芯片设计思路 | 第26-27页 |
| ·基因选择 | 第26页 |
| ·检测手段选择 | 第26-27页 |
| ·基因芯片类型的选择 | 第27页 |
| 2 糖类相关基因芯片设计方法 | 第27-29页 |
| ·糖类相关基因的选取 | 第27页 |
| ·探针设计 | 第27页 |
| ·芯片阵列设计 | 第27-29页 |
| 第三章 基因芯片和实时定量PCR技术检测肝癌中差异表达的糖基转移酶基因 | 第29-46页 |
| 1 材料与仪器 | 第29-33页 |
| ·细胞系及血液 | 第29页 |
| ·试剂和耗材 | 第29-32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32-33页 |
| 2 实验方法 | 第33-46页 |
| ·细胞培养 | 第33-35页 |
| ·氨基化片基的制作 | 第33-34页 |
| ·探针准备 | 第34页 |
| ·点样 | 第34页 |
| ·点样后处理 | 第34-35页 |
| ·基因芯片实验和分析方法 | 第35-42页 |
| ·总RNA抽提(Trizol法) | 第35-36页 |
| ·mRNA线性扩增及纯化 | 第36-38页 |
| ·荧光标记及纯化 | 第38-39页 |
| ·芯片杂交 | 第39-40页 |
| ·芯片洗涤 | 第40页 |
| ·扫描 | 第40页 |
| ·数据处理 | 第40-42页 |
| ·荧光定量PCR | 第42-46页 |
| ·RNA质量验证 | 第42页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第42-43页 |
| ·荧光定量PCR条件优化 | 第43-44页 |
| ·查看结果,初步分析 | 第44-46页 |
| 第四章 实验结果 | 第46-58页 |
| 1 总RNA质量的检测 | 第46-47页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第46页 |
| ·总RNA紫外定量结果 | 第46-47页 |
| 2 RNA反转扩增 | 第47-48页 |
| 3 荧光标记 | 第48-49页 |
| 4 芯片制备 | 第49页 |
| ·片基质量验证 | 第49页 |
| ·片基质量验证结果 | 第49页 |
| 5 芯片点样和封闭 | 第49页 |
| 6 芯片杂交结果 | 第49-50页 |
| 7 芯片结果初步分析 | 第50-51页 |
| 8 荧光定量PCR的验证结果 | 第51-55页 |
| ·Alg10荧光定量分析结果 | 第52页 |
| ·荧光定量曲线结果 | 第52页 |
| ·熔点曲线结果 | 第52页 |
| ·Galnt11荧光定量分析结果 | 第52-53页 |
| ·荧光定量曲线结果 | 第52-53页 |
| ·熔点曲线结果 | 第53页 |
| ·Galnt12荧光定量分析结果 | 第53-54页 |
| ·荧光定量曲线结果 | 第53-54页 |
| ·熔点曲线结果 | 第54页 |
| ·HMCS荧光定量分析结果 | 第54-55页 |
| ·荧光定量曲线结果 | 第54-55页 |
| ·熔点曲线结果 | 第55页 |
| 9 荧光定量PCR结果和基因芯片结果的对比 | 第55-56页 |
| 10 荧光定量PCR结果分析 | 第56-58页 |
| 讨论 | 第58-61页 |
| 1 实验小结 | 第58-59页 |
| 2 本实验的不足之处 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-71页 |
| 致谢 | 第71页 |