摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-20页 |
1 内分泌干扰物的定义、危害及分类 | 第14-15页 |
2 多环芳烃对海洋生物生殖毒性的研究进展 | 第15-19页 |
·多环芳烃的来源、分布及危害 | 第15-16页 |
·多环芳烃的内分泌干扰机制 | 第16-18页 |
·多环芳烃对海洋生物生殖毒性的研究进展 | 第18-19页 |
3 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 苯并[α]芘对栉孔扇贝性腺中睾酮和雌二醇含量的影响 | 第20-28页 |
1 材料与方法 | 第21-24页 |
·实验材料 | 第21页 |
·实验梯度的设置 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-24页 |
·样品制备 | 第21-22页 |
·放射性试剂盒测定样品中T和E_2的含量 | 第22-24页 |
·T 半量法测定方法 | 第22-23页 |
·E_2半量法测定方法 | 第23-24页 |
·结果计算 | 第24页 |
·数据处理 | 第24页 |
2 实验结果 | 第24-25页 |
·B[α]P 对栉孔扇贝精巢中睾酮和雌二醇含量的影响 | 第24-25页 |
·B[α]P 对栉孔扇贝卵巢中睾酮和雌二醇含量的影响 | 第25页 |
3 讨论 | 第25-28页 |
第三章 苯并[α]芘对栉孔扇贝性腺中雌激素受体(ER)和卵黄蛋白原(VTG)基因表达的影响 | 第28-64页 |
第一节 栉孔扇贝雌激素受体(ER)基因的克隆与序列分析 | 第28-46页 |
1 材料与方法 | 第29-36页 |
·实验材料 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-36页 |
·ER mRNA 部分片段的克隆 | 第29-33页 |
·提取总RNA | 第29页 |
·组织样品总RNA 中DNA 的消除 | 第29-30页 |
·反转录反应(cDNA 第一链的合成) | 第30-31页 |
·PCR 扩增反应 | 第31页 |
·目的基因的回收纯化 | 第31-32页 |
·目的基因的克隆与测序 | 第32-33页 |
·RACE-PCR 扩增ER 全长基因与序列分析 | 第33-36页 |
·SMART cDNA 的合成 | 第34页 |
·RACE-PCR | 第34-36页 |
·栉孔扇贝ER的组织特异性 | 第36页 |
2 结果和讨论 | 第36-46页 |
·兼并引物的设计与PCR 结果 | 第36-39页 |
·ER RACE-PCR 特异性引物的设计与RACE 结果 | 第39-40页 |
·ER cDNA 序列分析及组织特异性 | 第40-44页 |
·ER 氨基酸序列的进化树分析 | 第44-46页 |
第二节 栉孔扇贝卵黄蛋白原(VTG)基因的克隆与序列分析 | 第46-54页 |
1 材料与方法 | 第47页 |
2 结果和讨论 | 第47-54页 |
·兼并引物的设计与PCR 结果 | 第47-48页 |
·VTG RACE-PCR 特异性引物的设计与RACE结果 | 第48-49页 |
·VTG cDNA 序列分析及组织特异性 | 第49-50页 |
·VTG 氨基酸序列的进化树分析 | 第50-54页 |
第三节 苯并[α]芘对栉孔扇贝性腺中 ER 和 VTG 基因表达的影响 | 第54-64页 |
1 材料与方法 | 第55-58页 |
·实验材料 | 第55页 |
·实验梯度的设置 | 第55-56页 |
·实验方法 | 第56-58页 |
·总RNA 的提取 | 第56页 |
·总RNA 中DNA 污染的消除 | 第56页 |
·cDNA 第一条链的合成 | 第56-57页 |
·PCR 反应循环数摸索 | 第57页 |
·PCR 扩增测定ER 和VTG mRNA 的表达量 | 第57-58页 |
·数据处理与分析 | 第58页 |
2 实验结果 | 第58-61页 |
·β–actin,ER 和VTG 半定量PCR 循环次数的确定 | 第58-60页 |
·B[α]P 对栉孔扇贝性腺中ER 和VTG 基因表达的影响 | 第60-61页 |
3 讨论 | 第61-64页 |
第四章 苯并[α]芘对栉孔扇贝性腺显微结构的影响 | 第64-69页 |
1 材料与方法 | 第64-65页 |
·实验材料 | 第64页 |
·实验梯度的设置 | 第64-65页 |
·光镜样品的制备 | 第65页 |
2 实验结果 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
发表的学术论文 | 第81-82页 |
张琳个人简介 | 第82页 |