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紫花苜蓿锌指蛋白MsZFN作用机制研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
目录第5-9页
1 绪论第9-25页
   ·锌指蛋白研究进展第9-11页
     ·锌指蛋白的特点和分类第9-10页
     ·锌指蛋白功能研究第10-11页
   ·CCCH 锌指蛋白研究进展第11-16页
     ·CCCH 锌指基序的定义第11页
     ·CCCH 锌指蛋白结构研究第11-12页
     ·CCCH 锌指蛋白表达模式第12-14页
     ·CCCH 锌指蛋白作用方式研究第14-15页
     ·CCCH 锌指蛋白功能研究第15-16页
   ·蛋白互作第16-24页
     ·酵母双杂交第17-20页
     ·双分子荧光互补技术(BiFC)第20-24页
   ·本研究的背景、目的、内容和意义第24-25页
2 用酵母双杂交筛选与 MsZFN 相互作用的蛋白第25-42页
   ·材料第25-27页
     ·植物材料第25页
     ·菌株与质粒第25-26页
     ·培养基及配制第26页
     ·试剂盒第26页
     ·主要化学试剂第26-27页
     ·引物第27页
   ·方法第27-35页
     ·构建诱饵载体第27-29页
     ·诱饵载体自激活检测第29-30页
     ·诱饵蛋白毒性的验证第30页
     ·紫花苜蓿酵母双杂交CDNA 文库的构建第30-33页
     ·大规模共转筛菌第33-34页
     ·酵母克隆的初步鉴定第34-35页
   ·结果与分析第35-40页
     ·诱饵质粒的构建第35-36页
     ·酵母中的自激活鉴定第36-37页
     ·诱饵蛋白对酵母细胞的生长没有影响第37页
     ·紫花苜蓿cDNA 文库构建第37-38页
     ·酵母双杂交cDNA 文库的筛选第38-40页
   ·小结与讨论第40-42页
3 双分子荧光互补技术研究与 MsZFN 互作的靶蛋白第42-51页
   ·材料第42页
     ·植物材料第42页
     ·菌株和质粒第42页
     ·生化试剂第42页
   ·实验方法第42-45页
     ·构建载体第42-44页
     ·转农杆菌GV3101第44-45页
     ·共转化烟草第45页
     ·观看实验结果第45页
   ·实验结果第45-51页
     ·载体构建第45-48页
     ·农杆菌转化结果第48-49页
     ·烟草转化结果第49-50页
     ·讨论第50-51页
4 酵母双杂交鉴定 MsZFN 与 MZ69C 相互作用结构域第51-58页
   ·实验材料第51-52页
   ·实验方法第52-55页
     ·MsZFN 各区段载体构建第52-54页
     ·将各区段与AD-MZ69C 共转化酵母菌株AH109第54-55页
   ·实验结果第55-58页
     ·载体构建结果第55-56页
     ·酵母双杂交结果第56-57页
     ·小结与讨论第57-58页
5 结论与展望第58-59页
   ·结论第58页
   ·创新点第58页
   ·后续研究工作展望第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-65页
附录第65页

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