摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
目录 | 第5-9页 |
1 绪论 | 第9-25页 |
·锌指蛋白研究进展 | 第9-11页 |
·锌指蛋白的特点和分类 | 第9-10页 |
·锌指蛋白功能研究 | 第10-11页 |
·CCCH 锌指蛋白研究进展 | 第11-16页 |
·CCCH 锌指基序的定义 | 第11页 |
·CCCH 锌指蛋白结构研究 | 第11-12页 |
·CCCH 锌指蛋白表达模式 | 第12-14页 |
·CCCH 锌指蛋白作用方式研究 | 第14-15页 |
·CCCH 锌指蛋白功能研究 | 第15-16页 |
·蛋白互作 | 第16-24页 |
·酵母双杂交 | 第17-20页 |
·双分子荧光互补技术(BiFC) | 第20-24页 |
·本研究的背景、目的、内容和意义 | 第24-25页 |
2 用酵母双杂交筛选与 MsZFN 相互作用的蛋白 | 第25-42页 |
·材料 | 第25-27页 |
·植物材料 | 第25页 |
·菌株与质粒 | 第25-26页 |
·培养基及配制 | 第26页 |
·试剂盒 | 第26页 |
·主要化学试剂 | 第26-27页 |
·引物 | 第27页 |
·方法 | 第27-35页 |
·构建诱饵载体 | 第27-29页 |
·诱饵载体自激活检测 | 第29-30页 |
·诱饵蛋白毒性的验证 | 第30页 |
·紫花苜蓿酵母双杂交CDNA 文库的构建 | 第30-33页 |
·大规模共转筛菌 | 第33-34页 |
·酵母克隆的初步鉴定 | 第34-35页 |
·结果与分析 | 第35-40页 |
·诱饵质粒的构建 | 第35-36页 |
·酵母中的自激活鉴定 | 第36-37页 |
·诱饵蛋白对酵母细胞的生长没有影响 | 第37页 |
·紫花苜蓿cDNA 文库构建 | 第37-38页 |
·酵母双杂交cDNA 文库的筛选 | 第38-40页 |
·小结与讨论 | 第40-42页 |
3 双分子荧光互补技术研究与 MsZFN 互作的靶蛋白 | 第42-51页 |
·材料 | 第42页 |
·植物材料 | 第42页 |
·菌株和质粒 | 第42页 |
·生化试剂 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-45页 |
·构建载体 | 第42-44页 |
·转农杆菌GV3101 | 第44-45页 |
·共转化烟草 | 第45页 |
·观看实验结果 | 第45页 |
·实验结果 | 第45-51页 |
·载体构建 | 第45-48页 |
·农杆菌转化结果 | 第48-49页 |
·烟草转化结果 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
4 酵母双杂交鉴定 MsZFN 与 MZ69C 相互作用结构域 | 第51-58页 |
·实验材料 | 第51-52页 |
·实验方法 | 第52-55页 |
·MsZFN 各区段载体构建 | 第52-54页 |
·将各区段与AD-MZ69C 共转化酵母菌株AH109 | 第54-55页 |
·实验结果 | 第55-58页 |
·载体构建结果 | 第55-56页 |
·酵母双杂交结果 | 第56-57页 |
·小结与讨论 | 第57-58页 |
5 结论与展望 | 第58-59页 |
·结论 | 第58页 |
·创新点 | 第58页 |
·后续研究工作展望 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
附录 | 第65页 |