一株新型白腐菌产漆酶规律及其酶学性质的研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-37页 |
| ·引言 | 第14-16页 |
| ·白腐真菌生物学 | 第16-20页 |
| ·白腐菌生物学概念 | 第16页 |
| ·白腐菌木质素降解酶系 | 第16-20页 |
| ·白腐菌漆酶的结构和催化机理 | 第20-25页 |
| ·白腐菌漆酶催化活性中心结构 | 第20-22页 |
| ·白腐菌漆酶的三维结构 | 第22-23页 |
| ·白腐菌漆酶的催化氧化反应机理 | 第23-24页 |
| ·白腐菌漆酶/介体系统 | 第24-25页 |
| ·白腐菌漆酶的生产 | 第25-32页 |
| ·白腐菌漆酶发酵条件的研究 | 第26-29页 |
| ·白腐菌漆酶的初步扩大化生产 | 第29-32页 |
| ·白腐菌漆酶的分离纯化及其酶学性质 | 第32-35页 |
| ·白腐菌漆酶蛋白的分离纯化 | 第32-34页 |
| ·白腐菌漆酶的理化性质 | 第34-35页 |
| ·本研究的意义、目的和主要内容 | 第35-37页 |
| 第二章 白腐菌漆酶高产菌株的诱变选育 | 第37-49页 |
| ·引言 | 第37-38页 |
| ·实验材料和器材 | 第38页 |
| ·菌种 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·主要设备和仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·菌丝悬浮液的制备 | 第38-39页 |
| ·紫外线照射 | 第39页 |
| ·有益突变株的初筛 | 第39页 |
| ·有益突变株的复筛 | 第39页 |
| ·液体发酵 | 第39页 |
| ·分析方法 | 第39-41页 |
| ·酶活测定 | 第39-40页 |
| ·葡萄糖测定 | 第40页 |
| ·总氮测定 | 第40页 |
| ·生物量测定 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-47页 |
| ·紫外诱变 | 第41-43页 |
| ·有益突变菌株的筛选 | 第43-45页 |
| ·诱变菌株的液体发酵 | 第45-47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 第三章 白腐菌漆酶的初步扩大化生产 | 第49-63页 |
| ·引言 | 第49-50页 |
| ·实验材料和器材 | 第50-51页 |
| ·菌种 | 第50页 |
| ·培养基 | 第50页 |
| ·主要设备和仪器 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-53页 |
| ·种子液的制备 | 第51页 |
| ·摇瓶发酵 | 第51页 |
| ·发酵罐产酶 | 第51-52页 |
| ·粗酶液的制备 | 第52页 |
| ·温度对粗酶液中漆酶活力和稳定性的影响 | 第52页 |
| ·pH 对粗酶液中漆酶活力和稳定性的影响 | 第52-53页 |
| ·分析方法 | 第53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-62页 |
| ·白腐菌的发酵罐产酶 | 第53-56页 |
| ·诱导剂对白腐菌生产漆酶的影响 | 第56-58页 |
| ·粗酶液漆酶最适反应温度和热稳定性 | 第58-59页 |
| ·粗酶液漆酶最适反应pH 值和酸碱稳定性 | 第59-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第四章 白腐菌漆酶分离纯化及部分酶学性质的研究 | 第63-77页 |
| ·引言 | 第63-64页 |
| ·实验材料和器材 | 第64页 |
| ·菌种 | 第64页 |
| ·培养基 | 第64页 |
| ·主要设备和仪器 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-68页 |
| ·粗酶液的制备 | 第64-65页 |
| ·粗酶液的硫酸铵盐析 | 第65页 |
| ·酶液的超滤浓缩 | 第65-66页 |
| ·离子交换色谱 | 第66-67页 |
| ·pH 对纯化漆酶活力和稳定性的影响 | 第67页 |
| ·温度对纯化漆酶活力和稳定性的影响 | 第67页 |
| ·漆酶动力学常数的测定 | 第67页 |
| ·金属离子对漆酶活力的影响 | 第67-68页 |
| ·分析方法 | 第68页 |
| ·酶活测定 | 第68页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-75页 |
| ·漆酶的分离纯化 | 第69-70页 |
| ·漆酶最适反应pH 值和酸碱稳定性 | 第70-71页 |
| ·纯化漆酶最适反应温度和热稳定性 | 第71-73页 |
| ·漆酶的米氏常数Km | 第73-74页 |
| ·常见金属离子对漆酶活力的影响 | 第74-75页 |
| ·本章小结 | 第75-77页 |
| 第五章 白腐菌基因序列鉴定 | 第77-90页 |
| ·引言 | 第77-78页 |
| ·实验材料和器材 | 第78-79页 |
| ·菌种 | 第78页 |
| ·培养基 | 第78页 |
| ·主要试剂的配置 | 第78页 |
| ·主要设备和仪器 | 第78-79页 |
| ·实验方法 | 第79-80页 |
| ·白腐菌DNA 的提取 | 第79页 |
| ·DNA 纯度和浓度检测 | 第79页 |
| ·白腐菌18s rDNA 序列的测定 | 第79-80页 |
| ·序列数据对比 | 第80页 |
| ·结果与讨论 | 第80-88页 |
| ·CTAB 法提取总DNA | 第81-82页 |
| ·18s rDNA 的PCR 扩增 | 第82-88页 |
| ·本章小结 | 第88-90页 |
| 第六章 结论 | 第90-94页 |
| ·本论文的主要结论 | 第90-92页 |
| ·本论文的创新之处 | 第92页 |
| ·对未来工作的建议 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-104页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105页 |