中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-10页 |
英文缩略词表 | 第10-11页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 布鲁氏菌外膜蛋白及检测技术研究进展 | 第12-19页 |
1 布鲁氏菌外膜蛋白 | 第12-15页 |
·OMP10 | 第12-13页 |
·OMP17 | 第13页 |
·OMP19 | 第13页 |
·OMP25 | 第13-14页 |
·OMP28 | 第14页 |
·OMP31 | 第14-15页 |
2 布鲁氏菌检测技术的研究进展 | 第15-19页 |
·病原学检测 | 第15-17页 |
·血清学检测 | 第17-19页 |
第二章 实验研究 | 第19-57页 |
试验一 布鲁氏菌外膜蛋白BP26的原核表达及纯化 | 第19-29页 |
1 材料与方法 | 第19-25页 |
·材料 | 第19-20页 |
·方法 | 第20-25页 |
2 结果 | 第25-27页 |
·BP26基因的扩增与重组质粒鉴定 | 第25-26页 |
·BP26蛋白在大肠杆菌DE3中的表达 | 第26-27页 |
·BP26蛋白的纯化及Western Blot分析 | 第27页 |
3 讨论 | 第27-29页 |
试验二 检测布鲁氏菌抗体的胶体金免疫层析方法的建立 | 第29-44页 |
1 材料与方法 | 第29-36页 |
·菌种与实验血清 | 第29页 |
·主要试剂及耗材 | 第29-31页 |
·方法 | 第31-36页 |
2 结果 | 第36-41页 |
·胶体金及免疫金质量鉴定 | 第36-38页 |
·抗体与胶体金结合的最佳pH和最佳浓度 | 第38页 |
·试纸条结果判定 | 第38-39页 |
·特异性、敏感性、准确性、稳定性的检测结果 | 第39-41页 |
3 讨论 | 第41-44页 |
·BP26蛋白在布鲁氏菌病诊断中的应用 | 第41页 |
·胶体金的制备 | 第41-42页 |
·SPA在诊断中的应用 | 第42页 |
·SPA与胶体金结合的最佳pH的确定 | 第42页 |
·胶体金标记SPA最佳浓度的确定 | 第42-43页 |
·免疫胶体金的纯化 | 第43页 |
·层析材料选择及处理 | 第43-44页 |
试验三 布鲁氏菌的实时荧光定量检测方法的建立 | 第44-57页 |
1 材料与方法 | 第45-50页 |
·材料 | 第45页 |
·方法 | 第45-50页 |
2 结果 | 第50-55页 |
·质粒标准品的制备 | 第50-51页 |
·二重实时荧光定量PCR反应体系的建立及优化 | 第51-52页 |
·Tm值的确定 | 第52-53页 |
·特异性试验 | 第53页 |
·敏感性试验 | 第53-54页 |
·稳定性试验 | 第54-55页 |
·样品检测结果 | 第55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
第三章 结论 | 第66页 |
创新点 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68-69页 |
导师评阅表 | 第69页 |