| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 布鲁氏菌外膜蛋白及检测技术研究进展 | 第12-19页 |
| 1 布鲁氏菌外膜蛋白 | 第12-15页 |
| ·OMP10 | 第12-13页 |
| ·OMP17 | 第13页 |
| ·OMP19 | 第13页 |
| ·OMP25 | 第13-14页 |
| ·OMP28 | 第14页 |
| ·OMP31 | 第14-15页 |
| 2 布鲁氏菌检测技术的研究进展 | 第15-19页 |
| ·病原学检测 | 第15-17页 |
| ·血清学检测 | 第17-19页 |
| 第二章 实验研究 | 第19-57页 |
| 试验一 布鲁氏菌外膜蛋白BP26的原核表达及纯化 | 第19-29页 |
| 1 材料与方法 | 第19-25页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-25页 |
| 2 结果 | 第25-27页 |
| ·BP26基因的扩增与重组质粒鉴定 | 第25-26页 |
| ·BP26蛋白在大肠杆菌DE3中的表达 | 第26-27页 |
| ·BP26蛋白的纯化及Western Blot分析 | 第27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| 试验二 检测布鲁氏菌抗体的胶体金免疫层析方法的建立 | 第29-44页 |
| 1 材料与方法 | 第29-36页 |
| ·菌种与实验血清 | 第29页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第29-31页 |
| ·方法 | 第31-36页 |
| 2 结果 | 第36-41页 |
| ·胶体金及免疫金质量鉴定 | 第36-38页 |
| ·抗体与胶体金结合的最佳pH和最佳浓度 | 第38页 |
| ·试纸条结果判定 | 第38-39页 |
| ·特异性、敏感性、准确性、稳定性的检测结果 | 第39-41页 |
| 3 讨论 | 第41-44页 |
| ·BP26蛋白在布鲁氏菌病诊断中的应用 | 第41页 |
| ·胶体金的制备 | 第41-42页 |
| ·SPA在诊断中的应用 | 第42页 |
| ·SPA与胶体金结合的最佳pH的确定 | 第42页 |
| ·胶体金标记SPA最佳浓度的确定 | 第42-43页 |
| ·免疫胶体金的纯化 | 第43页 |
| ·层析材料选择及处理 | 第43-44页 |
| 试验三 布鲁氏菌的实时荧光定量检测方法的建立 | 第44-57页 |
| 1 材料与方法 | 第45-50页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-50页 |
| 2 结果 | 第50-55页 |
| ·质粒标准品的制备 | 第50-51页 |
| ·二重实时荧光定量PCR反应体系的建立及优化 | 第51-52页 |
| ·Tm值的确定 | 第52-53页 |
| ·特异性试验 | 第53页 |
| ·敏感性试验 | 第53-54页 |
| ·稳定性试验 | 第54-55页 |
| ·样品检测结果 | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 第三章 结论 | 第66页 |
| 创新点 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68-69页 |
| 导师评阅表 | 第69页 |