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布鲁氏菌实时荧光定量PCR检测方法与血清快速诊断试纸的初步研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-10页
英文缩略词表第10-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述 布鲁氏菌外膜蛋白及检测技术研究进展第12-19页
 1 布鲁氏菌外膜蛋白第12-15页
   ·OMP10第12-13页
   ·OMP17第13页
   ·OMP19第13页
   ·OMP25第13-14页
   ·OMP28第14页
   ·OMP31第14-15页
 2 布鲁氏菌检测技术的研究进展第15-19页
   ·病原学检测第15-17页
   ·血清学检测第17-19页
第二章 实验研究第19-57页
 试验一 布鲁氏菌外膜蛋白BP26的原核表达及纯化第19-29页
  1 材料与方法第19-25页
   ·材料第19-20页
   ·方法第20-25页
  2 结果第25-27页
   ·BP26基因的扩增与重组质粒鉴定第25-26页
   ·BP26蛋白在大肠杆菌DE3中的表达第26-27页
   ·BP26蛋白的纯化及Western Blot分析第27页
  3 讨论第27-29页
 试验二 检测布鲁氏菌抗体的胶体金免疫层析方法的建立第29-44页
  1 材料与方法第29-36页
   ·菌种与实验血清第29页
   ·主要试剂及耗材第29-31页
   ·方法第31-36页
  2 结果第36-41页
   ·胶体金及免疫金质量鉴定第36-38页
   ·抗体与胶体金结合的最佳pH和最佳浓度第38页
   ·试纸条结果判定第38-39页
   ·特异性、敏感性、准确性、稳定性的检测结果第39-41页
  3 讨论第41-44页
   ·BP26蛋白在布鲁氏菌病诊断中的应用第41页
   ·胶体金的制备第41-42页
   ·SPA在诊断中的应用第42页
   ·SPA与胶体金结合的最佳pH的确定第42页
   ·胶体金标记SPA最佳浓度的确定第42-43页
   ·免疫胶体金的纯化第43页
   ·层析材料选择及处理第43-44页
 试验三 布鲁氏菌的实时荧光定量检测方法的建立第44-57页
  1 材料与方法第45-50页
   ·材料第45页
   ·方法第45-50页
  2 结果第50-55页
   ·质粒标准品的制备第50-51页
   ·二重实时荧光定量PCR反应体系的建立及优化第51-52页
   ·Tm值的确定第52-53页
   ·特异性试验第53页
   ·敏感性试验第53-54页
   ·稳定性试验第54-55页
   ·样品检测结果第55页
  3 讨论第55-57页
参考文献第57-66页
第三章 结论第66页
创新点第66-67页
致谢第67-68页
作者简介第68-69页
导师评阅表第69页

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