摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-39页 |
1、植物中的β-1,3-葡聚糖苷酶 | 第13-22页 |
·植物中β-1,3-葡聚糖苷酶基因的结构特点 | 第13-15页 |
·植物中β-1,3-葡聚糖苷酶的结构特点 | 第15页 |
·植物中β-1,3-葡聚糖苷酶基因的分类 | 第15-18页 |
·植物中β-1,3-葡聚糖酶的功能 | 第18-22页 |
2、植物中的胼胝质 | 第22-24页 |
·配子体发育中的胼胝质 | 第22-23页 |
·筛管中的胼胝质 | 第23-24页 |
·传粉识别中的胼胝质 | 第24页 |
3、水稻雄性不育研究进展 | 第24-32页 |
·细胞质雄性不育(CMS) | 第25-26页 |
·细胞核雄性不育(GMS) | 第26-32页 |
4、RNAi抑制基因沉默研究进展 | 第32-38页 |
·RNAi的作用机制 | 第33-36页 |
·植物中RNAi的研究 | 第36-37页 |
·RNAi研究的生物学意义 | 第37-38页 |
5、本研究的目的和意义 | 第38-39页 |
第二章 OSG1基因的结构及表达分析 | 第39-71页 |
1、材料与方法 | 第39-53页 |
·材料 | 第39页 |
·基因结构分析 | 第39-40页 |
·Osg1的表达分析 | 第40-42页 |
·Osg1的组织化学定位 | 第42-47页 |
·原核表达 | 第47-51页 |
·纯化蛋白酶活检测 | 第51-52页 |
·多克隆抗体制备及效价测定 | 第52-53页 |
·Western blot分析 | 第53页 |
2、结果与分析 | 第53-69页 |
·水稻中β-1,3葡聚糖苷酶家族成员 | 第53-56页 |
·Osg1的基因及蛋白结构 | 第56-59页 |
·Osg1的表达模式 | 第59-64页 |
·Osg1的组织化学定位 | 第64-66页 |
·Osg1蛋白的表达 | 第66-69页 |
3、讨论 | 第69-71页 |
第三章 OSG1基因的RNAI抑制导致败育表型 | 第71-83页 |
1、材料与方法 | 第71-76页 |
·材料 | 第71页 |
·RNAi载体的构建 | 第71-73页 |
·农杆菌介导的对粳稻品种H1493的遗传转化 | 第73页 |
·转基因植株的Southern分析 | 第73-75页 |
·Northern blot分析 | 第75-76页 |
·Western blot分析 | 第76页 |
2、结果与分析 | 第76-81页 |
·RNAi载体的构建 | 第76-78页 |
·转基因植株的获得 | 第78页 |
·Osg1-RI植株的鉴定 | 第78-80页 |
·Osg1基因的沉默导致雄性不育表型 | 第80-81页 |
3、讨论 | 第81-83页 |
第四章 OSG1基因参与调节水稻花粉发育过程中的胼胝质的动态平衡 | 第83-91页 |
1、材料与方法 | 第83-84页 |
·材料 | 第83页 |
·石蜡切片 | 第83页 |
·苯胺蓝染色 | 第83页 |
·免疫组化 | 第83-84页 |
2、结果与分析 | 第84-89页 |
·石蜡切片 | 第84页 |
·胼胝质染色 | 第84-85页 |
·Osg1蛋白主要表达于小孢子细胞中 | 第85-89页 |
3、讨论 | 第89-91页 |
第五章 OSG1基因在水稻与褐飞虱互作中的作用 | 第91-99页 |
1、材料与方法 | 第91-93页 |
·材料 | 第91页 |
·水稻材料的处理 | 第91-92页 |
·荧光定量PCR | 第92页 |
·电子刺吸仪(Electronic penetration graph,EPG)记录褐飞虱的取食行为 | 第92页 |
·褐飞虱无选择取食的蜜露量测量 | 第92-93页 |
2、结果与分析 | 第93-97页 |
·褐飞虱取食后Osg1基因的表达 | 第93页 |
·EPG记录的褐飞虱在水稻植株上的取食行为 | 第93-96页 |
·褐飞虱无选择取食的蜜露量测量 | 第96-97页 |
3、讨论 | 第97-99页 |
第六章 总讨论 | 第99-104页 |
1、Osg1基因在水稻花粉发育小孢子发生过程中起到降解胼胝质壁的作用 | 第99-101页 |
2、Osg1在褐飞虱与水稻互作中的作用 | 第101-104页 |
参考文献 | 第104-118页 |
附录Ⅰ 实验室常用PROTOCOL及所用溶液配方 | 第118-120页 |
Protocol 1:Synthesis of First Strand cDNA Suitable for PCR Amplification | 第118-119页 |
Protocol 2:常用溶液配方 | 第119-120页 |
附录Ⅱ 博士在读期间发表的学术论文 | 第120-121页 |
致谢 | 第121页 |