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水稻β-1,3葡聚糖苷酶基因Osg1的功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 文献综述第13-39页
 1、植物中的β-1,3-葡聚糖苷酶第13-22页
     ·植物中β-1,3-葡聚糖苷酶基因的结构特点第13-15页
     ·植物中β-1,3-葡聚糖苷酶的结构特点第15页
     ·植物中β-1,3-葡聚糖苷酶基因的分类第15-18页
     ·植物中β-1,3-葡聚糖酶的功能第18-22页
 2、植物中的胼胝质第22-24页
     ·配子体发育中的胼胝质第22-23页
     ·筛管中的胼胝质第23-24页
     ·传粉识别中的胼胝质第24页
 3、水稻雄性不育研究进展第24-32页
     ·细胞质雄性不育(CMS)第25-26页
     ·细胞核雄性不育(GMS)第26-32页
 4、RNAi抑制基因沉默研究进展第32-38页
     ·RNAi的作用机制第33-36页
     ·植物中RNAi的研究第36-37页
     ·RNAi研究的生物学意义第37-38页
 5、本研究的目的和意义第38-39页
第二章 OSG1基因的结构及表达分析第39-71页
 1、材料与方法第39-53页
     ·材料第39页
     ·基因结构分析第39-40页
     ·Osg1的表达分析第40-42页
     ·Osg1的组织化学定位第42-47页
     ·原核表达第47-51页
   ·纯化蛋白酶活检测第51-52页
     ·多克隆抗体制备及效价测定第52-53页
     ·Western blot分析第53页
 2、结果与分析第53-69页
     ·水稻中β-1,3葡聚糖苷酶家族成员第53-56页
     ·Osg1的基因及蛋白结构第56-59页
     ·Osg1的表达模式第59-64页
     ·Osg1的组织化学定位第64-66页
     ·Osg1蛋白的表达第66-69页
 3、讨论第69-71页
第三章 OSG1基因的RNAI抑制导致败育表型第71-83页
 1、材料与方法第71-76页
     ·材料第71页
     ·RNAi载体的构建第71-73页
     ·农杆菌介导的对粳稻品种H1493的遗传转化第73页
     ·转基因植株的Southern分析第73-75页
     ·Northern blot分析第75-76页
     ·Western blot分析第76页
 2、结果与分析第76-81页
     ·RNAi载体的构建第76-78页
     ·转基因植株的获得第78页
     ·Osg1-RI植株的鉴定第78-80页
     ·Osg1基因的沉默导致雄性不育表型第80-81页
 3、讨论第81-83页
第四章 OSG1基因参与调节水稻花粉发育过程中的胼胝质的动态平衡第83-91页
 1、材料与方法第83-84页
     ·材料第83页
     ·石蜡切片第83页
     ·苯胺蓝染色第83页
     ·免疫组化第83-84页
 2、结果与分析第84-89页
     ·石蜡切片第84页
   ·胼胝质染色第84-85页
     ·Osg1蛋白主要表达于小孢子细胞中第85-89页
 3、讨论第89-91页
第五章 OSG1基因在水稻与褐飞虱互作中的作用第91-99页
 1、材料与方法第91-93页
     ·材料第91页
     ·水稻材料的处理第91-92页
     ·荧光定量PCR第92页
     ·电子刺吸仪(Electronic penetration graph,EPG)记录褐飞虱的取食行为第92页
     ·褐飞虱无选择取食的蜜露量测量第92-93页
 2、结果与分析第93-97页
     ·褐飞虱取食后Osg1基因的表达第93页
     ·EPG记录的褐飞虱在水稻植株上的取食行为第93-96页
     ·褐飞虱无选择取食的蜜露量测量第96-97页
 3、讨论第97-99页
第六章 总讨论第99-104页
 1、Osg1基因在水稻花粉发育小孢子发生过程中起到降解胼胝质壁的作用第99-101页
 2、Osg1在褐飞虱与水稻互作中的作用第101-104页
参考文献第104-118页
附录Ⅰ 实验室常用PROTOCOL及所用溶液配方第118-120页
 Protocol 1:Synthesis of First Strand cDNA Suitable for PCR Amplification第118-119页
 Protocol 2:常用溶液配方第119-120页
附录Ⅱ 博士在读期间发表的学术论文第120-121页
致谢第121页

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