| 中文摘要 | 第12-15页 |
| ABSTRACT | 第15-17页 |
| 第一章 引言 | 第18-22页 |
| 1.1 立题背景及意义 | 第18-19页 |
| 1.2 本课题的研究内容、技术路线及创新点 | 第19-22页 |
| 1.2.1 研究内容 | 第19-20页 |
| 1.2.2 技术路线图 | 第20页 |
| 1.2.3 创新点 | 第20-22页 |
| 第二章 文献综述 | 第22-34页 |
| 2.1 远志的药用沿革 | 第22-25页 |
| 2.1.1 远志的基原考证 | 第22-24页 |
| 2.1.2 远志的产地变迁 | 第24-25页 |
| 2.2 远志皂苷的药理活性 | 第25-27页 |
| 2.3 远志皂苷合成酶的研究现状 | 第27-30页 |
| 2.3.1 CYP450羟化酶 | 第27-28页 |
| 2.3.2 远志皂苷生物合成与酿酒酵母甲羟戊酸途径的比较 | 第28-30页 |
| 2.4 萜类物质在酿酒酵母中的异源合成 | 第30-31页 |
| 2.5 天然产物异源合成的关键技术 | 第31-34页 |
| 2.5.1 重叠延伸PCR(OE-PCR)组装基因元件 | 第31-32页 |
| 2.5.2 同源重组技术 | 第32-34页 |
| 第三章 构建高产β-香树脂醇的酿酒酵母工程菌 | 第34-50页 |
| 3.1 构建tHMGR过表达载体 | 第34-39页 |
| 3.1.1 材料与仪器 | 第34-35页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第35-38页 |
| 3.1.3 实验结果 | 第38-39页 |
| 3.2 构建ERG20过表达载体 | 第39-40页 |
| 3.2.1 材料与仪器 | 第39页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第39页 |
| 3.2.3 实验结果 | 第39-40页 |
| 3.3 构建GgbAS表达载体 | 第40-43页 |
| 3.3.1 材料与仪器 | 第40-41页 |
| 3.3.2 实验方法 | 第41-42页 |
| 3.3.3 实验结果 | 第42-43页 |
| 3.4 酵母摇瓶培养及代谢物检测 | 第43-48页 |
| 3.4.1 材料与仪器 | 第43-44页 |
| 3.4.2 实验方法 | 第44-45页 |
| 3.4.3 实验结果 | 第45-48页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 构建产齐墩果酸的酿酒酵母工程菌 | 第50-58页 |
| 4.1 构建MtOAS与CPR表达载体 | 第50-52页 |
| 4.1.1 材料与仪器 | 第50-51页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第51页 |
| 4.1.3 实验结果 | 第51-52页 |
| 4.2 构建产齐墩果酸的酿酒酵母工程菌 | 第52-56页 |
| 4.2.1 材料与仪器 | 第52页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 4.2.3 实验结果 | 第53-56页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 远志CYP716A249的时空表达 | 第58-68页 |
| 5.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 5.1.1 植物样本 | 第58页 |
| 5.1.2 实验仪器与试剂 | 第58-59页 |
| 5.2 实验方法 | 第59-61页 |
| 5.2.1 RNA提取 | 第59-60页 |
| 5.2.2 RNA反转录为cDNA | 第60页 |
| 5.2.3 引物设计与合成 | 第60-61页 |
| 5.2.4 RT-qPCR | 第61页 |
| 5.2.5 数据处理 | 第61页 |
| 5.3 实验结果 | 第61-65页 |
| 5.3.1 远志CYP716A249的生物信息学分析 | 第61-64页 |
| 5.3.2 RNA的提取结果 | 第64页 |
| 5.3.3 RT-qPCR结果 | 第64-65页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第65-68页 |
| 第六章 远志CYP716A249的功能鉴定 | 第68-74页 |
| 6.1 构建PtOAS与CPR表达载体 | 第68-70页 |
| 6.1.1 材料与仪器 | 第68-69页 |
| 6.1.2 实验方法 | 第69页 |
| 6.1.3 实验结果 | 第69-70页 |
| 6.2 CYP716A249的功能鉴定 | 第70-73页 |
| 6.2.1 材料与仪器 | 第70页 |
| 6.2.2 实验方法 | 第70页 |
| 6.2.3 实验结果 | 第70-73页 |
| 6.3 小结与讨论 | 第73-74页 |
| 第七章 总结与展望 | 第74-76页 |
| 7.1 研究工作总结 | 第74页 |
| 7.2 不足与展望 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 个人简况及联系方式 | 第85-86页 |
