| 摘要 | 第5-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第15-24页 |
| 1.1 胃癌 | 第15-17页 |
| 1.1.1 胃癌的发病机制 | 第15-16页 |
| 1.1.2 胃癌的早期诊断 | 第16页 |
| 1.1.3 胃癌的治疗与预后 | 第16-17页 |
| 1.2 自噬与肿瘤 | 第17-21页 |
| 1.2.1 自噬概念 | 第17-18页 |
| 1.2.2 自噬与肿瘤 | 第18-19页 |
| 1.2.3 自噬的检测 | 第19-21页 |
| 1.3 URI蛋白的功能 | 第21-22页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 建立URI过表达和URIsiRNA胃癌细胞株 | 第24-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-28页 |
| 2.1.1 主要实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.2 主要实验耗材 | 第25-26页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第26页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第26-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-37页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第28页 |
| 2.2.2 细胞传代与冻存 | 第28-29页 |
| 2.2.3 细胞瞬时转染 | 第29-31页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR(realtimefluorescencequantitativePCR)分析URImRNA表达水平 | 第31-34页 |
| 2.2.5 免疫印迹法检测URI蛋白表达水平 | 第34-37页 |
| 2.2.6 统计学分析 | 第37页 |
| 2.3 结果 | 第37-39页 |
| 2.3.1 pCMV-URI转染和URIsiRNA-A转染细胞的URImRNA表达 | 第37-38页 |
| 2.3.2 pCMV-URI转染和URIsiRNA-A转染细胞的URI蛋白表达 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 URI对胃癌细胞自噬的影响 | 第40-48页 |
| 3.1 主要实验材料和相关仪器 | 第40页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第40页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 3.2 方法 | 第40-42页 |
| 3.2.1 共聚焦显微镜检测GFP-LC3转染细胞中LC3的转化和位置 | 第40-41页 |
| 3.2.2 透射电子显微镜检测细胞自噬囊泡的形成 | 第41页 |
| 3.2.3 免疫印迹法检测细胞LC3-I、LC3-II | 第41-42页 |
| 3.2.4 统计学分析 | 第42页 |
| 3.3 实验结果 | 第42-46页 |
| 3.3.1 URIsiRNA-A转染诱导GFP-LC3转位至自噬体膜 | 第42-43页 |
| 3.3.2 URIsiRNA-A转染诱导自噬泡形成 | 第43-44页 |
| 3.3.3 URI敲低后增强细胞自噬流 | 第44-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 URI对胃癌细胞自噬的调控机制 | 第48-52页 |
| 4.1 主要实验材料和仪器 | 第48页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第48页 |
| 4.1.2 主要耗材 | 第48页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-49页 |
| 4.2.1 免疫印迹法检测mTOR、p70S6K磷酸化水平 | 第48页 |
| 4.2.2 统计学分析 | 第48-49页 |
| 4.3 实验结果 | 第49-50页 |
| 4.3.1 URI调节mTOR、P70S6K的磷酸化水平 | 第49-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-52页 |
| 结论与展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第64页 |
