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URI敲低诱导胃癌细胞自噬及其机制的研究

摘要第5-8页
abstract第8-10页
第一章 绪论第15-24页
    1.1 胃癌第15-17页
        1.1.1 胃癌的发病机制第15-16页
        1.1.2 胃癌的早期诊断第16页
        1.1.3 胃癌的治疗与预后第16-17页
    1.2 自噬与肿瘤第17-21页
        1.2.1 自噬概念第17-18页
        1.2.2 自噬与肿瘤第18-19页
        1.2.3 自噬的检测第19-21页
    1.3 URI蛋白的功能第21-22页
    1.4 本研究的目的及意义第22-24页
第二章 建立URI过表达和URIsiRNA胃癌细胞株第24-40页
    2.1 实验材料第24-28页
        2.1.1 主要实验试剂第24-25页
        2.1.2 主要实验耗材第25-26页
        2.1.3 实验仪器第26页
        2.1.4 试剂配制第26-28页
    2.2 实验方法第28-37页
        2.2.1 细胞复苏第28页
        2.2.2 细胞传代与冻存第28-29页
        2.2.3 细胞瞬时转染第29-31页
        2.2.4 荧光定量PCR(realtimefluorescencequantitativePCR)分析URImRNA表达水平第31-34页
        2.2.5 免疫印迹法检测URI蛋白表达水平第34-37页
        2.2.6 统计学分析第37页
    2.3 结果第37-39页
        2.3.1 pCMV-URI转染和URIsiRNA-A转染细胞的URImRNA表达第37-38页
        2.3.2 pCMV-URI转染和URIsiRNA-A转染细胞的URI蛋白表达第38-39页
    2.4 讨论第39-40页
第三章 URI对胃癌细胞自噬的影响第40-48页
    3.1 主要实验材料和相关仪器第40页
        3.1.1 主要仪器第40页
        3.1.2 主要试剂第40页
    3.2 方法第40-42页
        3.2.1 共聚焦显微镜检测GFP-LC3转染细胞中LC3的转化和位置第40-41页
        3.2.2 透射电子显微镜检测细胞自噬囊泡的形成第41页
        3.2.3 免疫印迹法检测细胞LC3-I、LC3-II第41-42页
        3.2.4 统计学分析第42页
    3.3 实验结果第42-46页
        3.3.1 URIsiRNA-A转染诱导GFP-LC3转位至自噬体膜第42-43页
        3.3.2 URIsiRNA-A转染诱导自噬泡形成第43-44页
        3.3.3 URI敲低后增强细胞自噬流第44-46页
    3.4 讨论第46-48页
第四章 URI对胃癌细胞自噬的调控机制第48-52页
    4.1 主要实验材料和仪器第48页
        4.1.1 实验试剂第48页
        4.1.2 主要耗材第48页
        4.1.3 实验仪器第48页
    4.2 实验方法第48-49页
        4.2.1 免疫印迹法检测mTOR、p70S6K磷酸化水平第48页
        4.2.2 统计学分析第48-49页
    4.3 实验结果第49-50页
        4.3.1 URI调节mTOR、P70S6K的磷酸化水平第49-50页
    4.4 讨论第50-52页
结论与展望第52-53页
参考文献第53-63页
致谢第63-64页
在学期间发表的学术论文第64页

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