| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-22页 |
| 1.1 植物果糖激酶(FRK)研究进展 | 第15-18页 |
| 1.1.1 植物FRK的结构及酶学特性 | 第15-16页 |
| 1.1.2 植物FRK的表达特性 | 第16-17页 |
| 1.1.3 植物FRK基因的主要生理功能 | 第17-18页 |
| 1.2 苹果中糖代谢研究进展 | 第18-21页 |
| 1.2.1 苹果糖代谢特点 | 第18-19页 |
| 1.2.2 山梨醇代谢 | 第19-20页 |
| 1.2.3 蔗糖代谢 | 第20页 |
| 1.2.4 己糖代谢 | 第20-21页 |
| 1.3 研究内容、目的及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 苹果果糖激酶基因MdFRK2 的克隆与表达分析 | 第22-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-30页 |
| 2.1.1 MdFRK2 基因克隆和生物信息学分析 | 第22-23页 |
| 2.1.2 MdFRK2 启动子克隆和生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.1.3 农杆菌介导的MdFRK2 启动子的遗传转化 | 第23-25页 |
| 2.1.4 GUS报告基因的检测 | 第25-26页 |
| 2.1.5 MdFRK2 的亚细胞定位 | 第26-27页 |
| 2.1.6 实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 2.1.7 外源糖饲喂苹果茎尖 | 第28页 |
| 2.1.8 MdFRK基因的原核表达 | 第28-30页 |
| 2.1.9 MdFRK蛋白活性检测 | 第30页 |
| 2.2 结果与分析 | 第30-43页 |
| 2.2.1 MdFRK2 基因的克隆和序列分析 | 第30-32页 |
| 2.2.2 MdFRK2 启动子的克隆和顺式作用元件分析 | 第32-33页 |
| 2.2.3 MdFRK2 的亚细胞定位 | 第33-34页 |
| 2.2.4 MdFRK2 的组织器官表达特性 | 第34-38页 |
| 2.2.5 外源糖饲喂对MdFRK2 表达的影响 | 第38-40页 |
| 2.2.6 MdFRK2 的酶学特性 | 第40-43页 |
| 2.3 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 MdFRK2 基因转化苹果及其对糖含量和代谢的影响 | 第45-63页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-49页 |
| 3.1.1 农杆菌介导的遗传转化方法 | 第45-46页 |
| 3.1.2 转基因苹果植株的检测 | 第46页 |
| 3.1.3 糖含量测定 | 第46-47页 |
| 3.1.4 糖代谢相关酶活的检测 | 第47-48页 |
| 3.1.5 糖代谢相关基因表达量的检测 | 第48页 |
| 3.1.6 光合测定 | 第48-49页 |
| 3.1.7 数据与结果分析 | 第49页 |
| 3.2 结果与分析 | 第49-60页 |
| 3.2.1 MdFRK2 过表达转基因苹果苗的获得 | 第49-51页 |
| 3.2.2 过表达MdFRK2 的苹果叶片中糖含量变化 | 第51-52页 |
| 3.2.3 过表达MdFRK2 的苹果叶片中山梨醇代谢相关酶活性变化 | 第52-54页 |
| 3.2.4 过表达MdFRK2 的苹果叶片中蔗糖代谢相关酶活性变化 | 第54-56页 |
| 3.2.5 过表达MdFRK2 的苹果叶片中己糖代谢相关酶活性变化 | 第56-58页 |
| 3.2.6 过表达MdFRK2 对苹果叶柄维管发育的影响 | 第58-59页 |
| 3.2.7 MdFRK2 过表达转基因番茄果实糖含量变化 | 第59-60页 |
| 3.3 讨论 | 第60-63页 |
| 第四章 MdFRK2 表达与褪黑素介导的糖积累之间的关系研究 | 第63-74页 |
| 4.1 材料与方法 | 第63-64页 |
| 4.1.1 材料处理 | 第63页 |
| 4.1.2 糖含量测定 | 第63页 |
| 4.1.3 实时荧光定量PCR | 第63页 |
| 4.1.4 酶活测定 | 第63-64页 |
| 4.1.5 农杆菌介导的启动子融合载体在烟草中的瞬时表达 | 第64页 |
| 4.1.6 GUS报告基因的检测 | 第64页 |
| 4.1.7 数据分析 | 第64页 |
| 4.2 结果与分析 | 第64-72页 |
| 4.2.1 外源褪黑素对野生型‘嘎啦’苗生长的影响 | 第64-65页 |
| 4.2.2 外源褪黑素对野生型‘嘎啦’苗叶片糖含量的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.3 外源褪黑素对糖代谢关键酶活性和基因表达的影响 | 第66-68页 |
| 4.2.4 外源褪黑素抑制MdFRK2 启动子的活性 | 第68页 |
| 4.2.5 过表达MdFRK2 基因缓解了褪黑素诱导的糖积累 | 第68-70页 |
| 4.2.6 过表达MdFRK2 基因缓解了褪黑素对苹果苗的生长抑制作用 | 第70-72页 |
| 4.3 讨论 | 第72-74页 |
| 4.3.1 苹果叶片中MdFRK2 基因参与褪黑素诱导的糖积累过程 | 第72-73页 |
| 4.3.2 苹果叶片中MdFRK2 基因参与褪黑素介导的生长抑制 | 第73-74页 |
| 第五章 MdFRK2 过表达转基因苹果叶片中糖含量恢复的机制分析 | 第74-108页 |
| 5.1 材料与方法 | 第74-75页 |
| 5.1.1 糖含量测定 | 第74页 |
| 5.1.2 糖代谢相关酶活的检测 | 第74页 |
| 5.1.3 糖代谢相关基因表达量的检测 | 第74页 |
| 5.1.4 蛋白的检测 | 第74页 |
| 5.1.5 转录组测序样品的准备 | 第74页 |
| 5.1.6 转录组数据分析 | 第74-75页 |
| 5.1.7 数据分析 | 第75页 |
| 5.2 结果与分析 | 第75-106页 |
| 5.2.1 过表达MdFRK2 的苹果苗中糖含量恢复 | 第75-77页 |
| 5.2.2 果糖含量恢复后FRK基因表达、酶活和蛋白变化 | 第77-79页 |
| 5.2.3 果糖含量恢复后转基因苹果中山梨醇代谢相关酶活性变化 | 第79-82页 |
| 5.2.4 果糖含量恢复后转基因苹果中蔗糖代谢相关酶活性变化 | 第82-86页 |
| 5.2.5 果糖含量恢复后转基因苹果中己糖代谢相关酶活性变化 | 第86-89页 |
| 5.2.6 果糖含量恢复后转基因苹果中编码糖转运蛋白的基因表达变化 | 第89-91页 |
| 5.2.7 测序数据及质量评估 | 第91-93页 |
| 5.2.8 差异基因筛选及富集分析 | 第93-96页 |
| 5.2.9 差异表达基因的注释功能分析 | 第96-106页 |
| 5.3 讨论 | 第106-108页 |
| 第六章 结论与创新点 | 第108-109页 |
| 6.1 结论 | 第108页 |
| 6.2 创新点 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-116页 |
| 附录 | 第116-119页 |
| 缩略词 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 作者简介 | 第121页 |
