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寨卡病毒衣壳蛋白组装病毒基因组结构研究

摘要第3-4页
abstract第4页
第1章 引言第8-20页
    1.1 黄病毒简介第8-12页
        1.1.1 黄病毒科简介第8-9页
        1.1.2 黄病毒属简介第9-11页
        1.1.3 黄病毒生活周期第11-12页
    1.2 寨卡病毒简介第12-16页
        1.2.1 寨卡病毒传播历史第12-13页
        1.2.2 寨卡病毒基因组第13-15页
        1.2.3 寨卡病毒临床症状第15-16页
    1.3 黄病毒衣壳蛋白简介第16-19页
        1.3.1 黄病毒衣壳蛋白功能研究第16-17页
        1.3.2 黄病毒衣壳蛋白结构研究第17-19页
    1.4 项目研究的意义及目的第19-20页
第2章 实验原理第20-38页
    2.1 分子克隆原理第20-24页
        2.1.1 PCR技术第20-21页
        2.1.2 Overlap-PCR第21-22页
        2.1.3 点突变技术第22-24页
        2.1.5 体外重组克隆筛选第24页
    2.2 凝胶电泳技术第24-25页
        2.2.1 琼脂糖凝胶电泳第24页
        2.2.2 SDS-PAGE第24-25页
        2.2.3 Native-PAGE第25页
    2.3 重组蛋白体外表达第25-28页
        2.3.1 重组蛋白体外表达系统第25-26页
        2.3.2 克隆载体及宿主选择第26-27页
        2.3.3 重组蛋白体外表达优化方法第27-28页
    2.4 蛋白纯化第28-32页
        2.4.1 亲和层析第29-31页
        2.4.2 离子交换层析第31-32页
        2.4.3 凝胶过滤层析第32页
    2.5 蛋白结晶学第32-35页
        2.5.1 结构生物学研究手段第33-34页
        2.5.2 蛋白晶体生长第34-35页
        2.5.3 晶体数据收集第35页
    2.6 蛋白-核酸相互作用研究第35-38页
第3章 实验材料与方法第38-50页
    3.1 实验材料第38-40页
        3.1.1 ZIKV C蛋白基因序列第38页
        3.1.2 ZIKV C蛋白表达载体及宿主菌第38页
        3.1.3 主要实验试剂第38-40页
    3.2 主要试剂配置方法第40-43页
    3.3 实验方法第43-46页
        3.3.1 ZIKV C蛋白基因序列分析第43页
        3.3.2 ZIKV C蛋白理化性质分析第43页
        3.3.3 ZIKV C蛋白克隆构建第43-44页
        3.3.4 ZIKV C蛋白表达第44页
        3.3.5 蛋白纯化第44-45页
        3.3.6 蛋白结晶第45-46页
        3.3.7 晶体优化第46页
    3.4 EMSA实验方法第46-48页
    3.5 实验主要仪器第48-50页
第4章 实验结果及结果分析第50-78页
    4.1 ZIKV C蛋白性质分析第50-52页
        4.1.1 大肠杆菌稀有密码子分析第50-51页
        4.1.2 ZIKV C蛋白二级结构预测第51-52页
        4.1.3 ZIKV C蛋白参数分析第52页
    4.2 ZIKV C蛋白克隆构建第52-54页
        4.2.1 ZIKV C蛋白PCR实验结果第52-53页
        4.2.2 ZIKV C蛋白重组质粒测序分析结果第53-54页
    4.3 ZIKV C蛋白表达纯化结果第54-58页
        4.3.1 ZIKV C蛋白试表达结果第54-56页
        4.3.2 ZIKV C蛋白扩大培养及初级纯化结果第56-57页
        4.3.3 ZIKV C蛋白分子筛结果第57-58页
    4.4 ZIKV C蛋白晶体生长与优化第58-61页
        4.4.1 ZIKV C蛋白晶体生长第58-61页
        4.4.2 ZIKV C蛋白晶体优化第61页
    4.5 ZIKV C蛋白晶体数据收集与数据处理第61-62页
    4.6 结构解析第62-72页
        4.6.1 ZIKV C蛋白晶体结构第63-66页
        4.6.2 ZIKV C蛋白结构分析第66-70页
        4.6.3 ZIKV C蛋白表面电荷分析第70-72页
    4.7 ZIKV C蛋白功能分析第72-78页
第5章 结论与展望第78-80页
参考文献第80-88页
附录第88-92页
发表论文第92-94页
致谢第94页

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