| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 序言 | 第11-13页 |
| 第一章 百日咳腺苷酸环化酶毒素基因的克隆 | 第13-38页 |
| 序言 | 第13-14页 |
| 材料与方法 | 第14-29页 |
| 1. 材料 | 第14-15页 |
| ·主要仪器设备 | 第14页 |
| ·菌株和质粒 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-15页 |
| ·主要试剂的配制 | 第15页 |
| 2. 方法 | 第15-29页 |
| ·百日咳杆菌 CS 菌株全基因组 DNA 的制备 | 第15-16页 |
| ·百日咳杆菌 CS 菌株cyaA 基因的克隆 | 第16-22页 |
| ·百日咳杆菌 CS 菌株cyaA 和cyaC 双基因克隆 | 第22-29页 |
| 结果 | 第29-36页 |
| 1. 百日咳杆菌CS 菌株cyaA 基因的克隆 | 第29-32页 |
| ·CS 菌株cyaA 基因的PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·CS 菌株cyaA 基因的克隆及鉴定 | 第30-31页 |
| ·cyaA 基因的测序和序列比对 | 第31-32页 |
| 2. 百日咳杆菌CS 菌株cyaC+cyaA 双基因的克隆 | 第32-36页 |
| ·百日咳杆菌 CS 菌株cyaC 基因的克隆 | 第32-35页 |
| ·百日咳杆菌 CS 菌株cyaC+cyaA 双基因的克隆 | 第35-36页 |
| 讨论 | 第36-38页 |
| 第二章 百日咳腺苷酸环化酶毒素基因的原核表达及初步纯化 | 第38-52页 |
| 序言 | 第38-39页 |
| 材料与方法 | 第39-45页 |
| 1. 材料 | 第39-41页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·菌株 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要试剂的配制 | 第39-41页 |
| 2. 方法 | 第41-45页 |
| ·百日咳cyaA 基因的原核表达 | 第41-43页 |
| ·重组蛋白 CyaA 的初步纯化 | 第43-45页 |
| 结果 | 第45-50页 |
| 1. 重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达及存在形式 | 第46页 |
| 2. 重组蛋白表达优化 | 第46页 |
| 3. 阴离子交换柱纯化重组蛋白CyaA | 第46-49页 |
| 4. 浓缩纯化重组蛋白CyaA 的浓度测定 | 第49-50页 |
| 讨论 | 第50-52页 |
| 第三章 重组腺苷酸环化酶毒素的初步鉴定 | 第52-62页 |
| 序言 | 第52-53页 |
| 材料与方法 | 第53-57页 |
| 1. 材料 | 第53-54页 |
| ·主要仪器设备 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·主要试剂的配制 | 第53-54页 |
| 2. 方法 | 第54-57页 |
| ·动物实验 | 第54页 |
| ·检测方案 | 第54-56页 |
| ·用全细胞百白破疫苗免疫前后人血清检测重组 CyaA 的抗原性 | 第56-57页 |
| 结果 | 第57-60页 |
| 1. 小鼠血清检测重组蛋白CyaA 抗原性 | 第57-58页 |
| 2. 人血清检测重组蛋白CyaA 抗原性 | 第58-60页 |
| 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 全文总结 | 第68-69页 |
| 附录一 基因序列 | 第69-77页 |
| 附录二 英文缩略词表 | 第77-78页 |
| 附录三 文献综述 | 第78-86页 |
| 附录四 攻读学位期间发表的论文 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
