| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一章 研究背景 | 第15-23页 |
| 1.1 结直肠癌流行病学 | 第15页 |
| 1.2 结直肠癌的发病机理 | 第15-16页 |
| 1.3 活性氧与肿瘤 | 第16-17页 |
| 1.4 自噬与肿瘤 | 第17-18页 |
| 1.5 P53与肿瘤 | 第18页 |
| 1.6 结直肠癌动物模型 | 第18-21页 |
| 1.7 研究目的及意义 | 第21-23页 |
| 第二章 汉黄芩素抑制结直肠癌细胞增殖、调节自噬与凋亡 | 第23-41页 |
| 引言 | 第23页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 人结肠腺癌细胞培养 | 第25页 |
| 2.2.2 细胞增殖活力研究 | 第25页 |
| 2.2.3 汉黄芩素对结直肠癌细胞克隆形成影响 | 第25-26页 |
| 2.2.4 汉黄芩素对结直肠癌细胞自噬和凋亡的影响 | 第26-30页 |
| 2.2.5 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第30-31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-40页 |
| 2.3.1 汉黄芩素抑制HCT116和HT29细胞增殖活力 | 第31-34页 |
| 2.3.2 汉黄芩素调节HCT116和HT29细胞自噬水平 | 第34-35页 |
| 2.3.3 汉黄芩素调节HCT116和HT29细胞凋亡水平 | 第35-40页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第40-41页 |
| 第三章 汉黄芩素对结直肠癌细胞活性氧的调节作用 | 第41-54页 |
| 引言 | 第41页 |
| 3.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.2.1 结肠癌细胞活性氧检测 | 第42-43页 |
| 3.2.2 使用Real-time PCR检测汉黄芩素对AKR1B1基因的影响 | 第43-45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-53页 |
| 3.3.1 汉黄芩素对两种细胞AKR1B1基因表达的作用 | 第45-46页 |
| 3.3.2 汉黄芩素促进HCT116细胞AKR1B1蛋白表达 | 第46-47页 |
| 3.3.3 汉黄芩素诱导HCT116细胞产生ROS | 第47-48页 |
| 3.3.4 汉黄芩素抑制HT29细胞产生ROS | 第48-49页 |
| 3.3.5 NAC抑制由汉黄芩素引起的ROS水平 | 第49-53页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第53-54页 |
| 第四章 汉黄芩素调节结直肠癌细胞内质网应激和DNA损伤 | 第54-67页 |
| 引言 | 第54页 |
| 4.1 实验材料 | 第54-56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-58页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第56页 |
| 4.2.2 细胞种板及给药 | 第56-57页 |
| 4.2.3 使用Real-time PCR检测汉黄芩素对DDIT3和XBP1基因的影响 | 第57页 |
| 4.2.4 Western blot检测内质网应激和DNA damage通路关键蛋白表达水平的影响 | 第57页 |
| 4.2.5 碱性彗星实验 | 第57-58页 |
| 4.3 实验结果 | 第58-65页 |
| 4.3.1 汉黄芩素对HCT116和HT29细胞内质网应激蛋白水平的调节作用 | 第58-60页 |
| 4.3.2 汉黄芩素对HCT116和HT29细胞内质网应激基因水平的调节作用 | 第60-61页 |
| 4.3.3 汉黄芩素对HCT116和HT29细胞DNA-Damage的调节作用 | 第61-63页 |
| 4.3.4 彗星拖尾检测DNA损伤程度 | 第63-65页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 汉黄芩素对结肠癌细胞P53核转位的影响 | 第67-76页 |
| 引言 | 第67页 |
| 5.1 实验材料 | 第67-68页 |
| 5.1.1 实验药品和细胞 | 第67页 |
| 5.1.2 实验试剂耗材 | 第67页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第67-68页 |
| 5.2 实验方法 | 第68-69页 |
| 5.2.1 用Western blot方法检测P53相关蛋白的表达 | 第68页 |
| 5.2.2 汉黄芩素对结肠癌细胞P53 (ser15)胞浆胞核定位的影响 | 第68-69页 |
| 5.3 实验结果 | 第69-75页 |
| 5.3.1 汉黄芩素对结肠癌细胞P53及其磷酸化蛋白表达水平的影响 | 第69-71页 |
| 5.3.2 汉黄芩素对结肠癌细胞P53及其磷酸化蛋白在胞浆胞核中表达水平的影响 | 第71-72页 |
| 5.3.3 汉黄芩素对结肠癌细胞P53(ser15)在胞浆胞核中表达水平的影响 | 第72-75页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第75-76页 |
| 第六章 汉黄芩素对C57BL/6小鼠结直肠癌化学预防作用 | 第76-87页 |
| 引言 | 第76页 |
| 6.1 实验材料 | 第76-77页 |
| 6.2 实验方法 | 第77-79页 |
| 6.2.1 炎症性结直肠癌小鼠模型的建立与给药 | 第77-78页 |
| 6.2.2 实验动物解剖与取材 | 第78-79页 |
| 6.3 实验结果 | 第79-85页 |
| 6.3.1 汉黄芩素在C57BL/6 AOM/DSS结直肠癌模型中的化学预防作用 | 第79-81页 |
| 6.3.2 汉黄芩素在C57BL/6 AOM/DSS结直肠癌模型中的作用机制 | 第81-85页 |
| 6.4 小结与讨论 | 第85-87页 |
| 结语 | 第87-90页 |
| 参考文献 | 第90-96页 |
| 附录 | 第96-97页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 统计学审核证明 | 第99页 |
