| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 肝癌 | 第10-13页 |
| 1.2 p21简介及其在肿瘤中的作用 | 第13-16页 |
| 1.3 miRNA简介及其在癌症中的作用 | 第16-18页 |
| 1.4 miR953p与癌症的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.5 本论文的研究意义 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-44页 |
| 2.1 人细胞中基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2 质粒构建 | 第22-28页 |
| 2.3 细胞和组织中总RNA的提取 | 第28-30页 |
| 2.4 逆转录（reverse transcription）合成cDNA第一链 | 第30-31页 |
| 2.5 实时荧光定量PCR分析 | 第31页 |
| 2.6 用茎环法（bulge-loop）对microRNA进行定量检测 | 第31-32页 |
| 2.7 细胞培养 | 第32-36页 |
| 2.8 生物信息学预测 | 第36页 |
| 2.9 双荧光素酶报告基因分析 | 第36-37页 |
| 2.10 Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测细胞增殖 | 第37页 |
| 2.11 细胞周期检测 | 第37-38页 |
| 2.12 细胞划痕实验 | 第38页 |
| 2.13 蛋白免疫印迹实验（Western blot assay） | 第38-40页 |
| 2.14 免疫组化检测p21在人肝癌组织和癌旁正常肝脏组织中的表达 | 第40-42页 |
| 2.15 免疫组化检测小鼠肝癌肿瘤组织中Ki-67，p21的表达 | 第42页 |
| 2.16 小鼠肝癌移植瘤模型的建立与小鼠体内肿瘤生长实验 | 第42-43页 |
| 2.17 统计学分析 | 第43-44页 |
| 3 实验结果 | 第44-68页 |
| 3.1 随着肝癌恶化程度不断加重，p21表达逐步降低 | 第44-45页 |
| 3.2 在p21基因的 3’-UTR区鉴定出一个调控p21表达的micro RNA | 第45-48页 |
| 3.3 miR953p通过p21的 3’-UTR靶向抑制p21的表达 | 第48-51页 |
| 3.4 miR953p主要在蛋白水平上下调p21的表达 | 第51-57页 |
| 3.5 miR953p促进了肝癌细胞的增殖和迁移 | 第57-62页 |
| 3.6 小鼠体内实验证实了miR953p可以促进肿瘤生长和增殖 | 第62-66页 |
| 3.7 在人肝癌组织中miR953p的表达高于癌旁正常肝脏组织 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-72页 |
| 5 全文总结与展望 | 第72-75页 |
| 5.1 本文的主要创新之处 | 第72页 |
| 5.2 展望 | 第72-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-89页 |
| 附录1 攻读博士期间发表的论文 | 第89-90页 |
| 附录2 本文所用到的主要英文缩略词对照表 | 第90页 |
