| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 主要英文缩写列表 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-35页 |
| 1.1 自然界中氟化物污染的基本概况 | 第16-19页 |
| 1.1.1 氟的基本性质和分布情况 | 第16-17页 |
| 1.1.2 氟化物的摄入和排泄 | 第17页 |
| 1.1.3 氟与其他离子结合的毒性 | 第17-19页 |
| 1.2 氟化物对生物体的危害概述 | 第19-24页 |
| 1.2.1 氟化物对植物的毒性 | 第19页 |
| 1.2.2 氟化物对昆虫的毒性 | 第19-22页 |
| 1.2.3 氟化物对人和驯养动物的毒性 | 第22-24页 |
| 1.3 氟化物毒性机制的研究进展 | 第24-27页 |
| 1.3.1 线粒体毒性 | 第24-25页 |
| 1.3.2 细胞凋亡与坏死 | 第25-26页 |
| 1.3.3 内质网应激 | 第26-27页 |
| 1.4 课题相关实验技术介绍 | 第27-33页 |
| 1.4.1 细胞活性和增殖的检测 | 第27-28页 |
| 1.4.2 细胞凋亡检测 | 第28-30页 |
| 1.4.3 细胞代谢水平检测 | 第30-31页 |
| 1.4.4 蛋白质分离和质谱技术 | 第31-32页 |
| 1.4.5 实时荧光定量PCR技术 | 第32-33页 |
| 1.5 本课题的研究目的和主要内容 | 第33-35页 |
| 1.5.1 课题研究目的 | 第33页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第33-34页 |
| 1.5.3 技术路线 | 第34-35页 |
| 第二章 氟化钠对Sf9细胞形态及细胞活性增殖的影响 | 第35-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第35页 |
| 2.1.2 主要试剂和来源 | 第35页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第35-36页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-37页 |
| 2.2.1 Sf9细胞培养 | 第36页 |
| 2.2.2 Sf9细胞染氟处理 | 第36-37页 |
| 2.2.3 Sf9细胞活性检测 | 第37页 |
| 2.2.4 Sf9细胞增殖情况检测 | 第37页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第37-40页 |
| 2.3.1 氟化钠对细胞形态的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.2 氟化钠对Sf9细胞活性的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.3 氟化钠对Sf9细胞增殖的影响 | 第39-40页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 氟化钠对Sf9细胞凋亡和细胞坏死的影响 | 第42-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第42页 |
| 3.1.2 实验试剂和试剂盒 | 第42页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第42-43页 |
| 3.1.4 主要试剂的配制 | 第43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.2.1 吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色检测Sf9细胞形态学凋亡 | 第43页 |
| 3.2.2 流式细胞仪检测细胞凋亡情况 | 第43-44页 |
| 3.2.3 DNAladder检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-48页 |
| 3.3.1 Sf9细胞形态学凋亡 | 第45页 |
| 3.3.2 Sf9细胞凋亡检测 | 第45-47页 |
| 3.3.3 氟化钠对Sf9细胞DNA的影响 | 第47-48页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 氟化钠对Sf9细胞蛋白质组学的影响 | 第50-78页 |
| 4.1 实验材料 | 第50-56页 |
| 4.1.1 细胞系 | 第50页 |
| 4.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第50-51页 |
| 4.1.3 实验仪器设备 | 第51页 |
| 4.1.4 二维电泳实验相关试剂配制 | 第51-54页 |
| 4.1.5 凝胶染色试剂及配制 | 第54-55页 |
| 4.1.6 质谱鉴定相关试剂及配制 | 第55页 |
| 4.1.7 RNA提取相关试剂配制 | 第55-56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-64页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第56页 |
| 4.2.2 细胞处理与收集 | 第56页 |
| 4.2.3 总蛋白质提取 | 第56-57页 |
| 4.2.4 蛋白浓度测定 | 第57页 |
| 4.2.5 二维电泳 | 第57-59页 |
| 4.2.6 凝胶染色与图像分析 | 第59-60页 |
| 4.2.7 质谱鉴定 | 第60-61页 |
| 4.2.8 差异蛋白点GO分析 | 第61页 |
| 4.2.9 Sf9细胞总RNA提取及反转录 | 第61-62页 |
| 4.2.10 实时荧光定量PCR引物设计 | 第62-63页 |
| 4.2.11 实时荧光定量PCR | 第63-64页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第64-73页 |
| 4.3.1 蛋白质提取 | 第64-65页 |
| 4.3.2 二维电泳结果 | 第65-67页 |
| 4.3.3 质谱鉴定结果 | 第67页 |
| 4.3.4 GO分析结果 | 第67-70页 |
| 4.3.5 Sf9细胞总RNA提取及内参基因的筛选 | 第70页 |
| 4.3.6 差异蛋白基因实时荧光定量PCR结果 | 第70-72页 |
| 4.3.7 差异蛋白基因实时荧光定量PCR产物胶图 | 第72-73页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第73-78页 |
| 第五章 氟化钠对Sf9细胞代谢水平影响的初步研究 | 第78-83页 |
| 5.1 实验材料 | 第78页 |
| 5.1.1 细胞系 | 第78页 |
| 5.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第78页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第78页 |
| 5.1.4 主要试剂配制 | 第78页 |
| 5.2 实验方法 | 第78-79页 |
| 5.2.1 细胞线粒体膜电位检测 | 第78-79页 |
| 5.2.2 细胞氧化水平检测 | 第79页 |
| 5.3 实验结果 | 第79-82页 |
| 5.3.1 氟化钠对Sf9细胞线粒体膜电位的影响 | 第79-81页 |
| 5.3.2 氟化钠对Sf9细胞ROS产生的影响 | 第81-82页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第82-83页 |
| 第六章 总结与展望 | 第83-85页 |
| 6.1 总结 | 第83-84页 |
| 6.2 展望 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 在校期间发表的论文 | 第100页 |
| 参加课题情况 | 第100页 |
