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喜旱莲子草萜类合成酶基因生物信息学分析及橙花叔醇合酶基因的克隆

摘要第7-8页
1 前言第8-18页
    1.1 昆虫和植物之间的依存关系第8页
    1.2 专食性昆虫与植物挥发物第8-9页
    1.3 入侵植物喜旱莲子草及其天敌莲草直胸跳甲第9-10页
    1.4 DMNT第10-11页
    1.5 DMNT的生物合成第11-16页
        1.5.1 萜类的生物合成第11-12页
        1.5.2 萜类合成酶第12-13页
        1.5.3 萜类合成酶的结构及其功能相关性第13-14页
        1.5.4 萜类合成酶的进化和分类第14页
        1.5.5 橙花叔醇合酶及其在DMNT合成过程的功能第14-16页
    1.6 转录组测序技术第16-18页
    1.7 立题依据第18页
2 试验材料与方法第18-28页
    2.1 试验材料第18-19页
        2.1.1 转录组测序材料第18页
        2.1.2 橙花叔醇合酶基因表达分析材料第18-19页
    2.2 试验试剂第19-20页
    2.3 主要仪器与设备第20页
    2.4 喜旱莲子草转录组测序第20页
    2.5 喜旱莲子草萜类合酶基因的筛选第20-21页
    2.6 虫食诱导和机械损伤条件下喜旱莲子草橙花叔醇合酶基因表达第21-23页
        2.6.1 RNA提取第21页
        2.6.2 cDNA的合成第21-22页
        2.6.3 qPCR引物的设计与合成第22-23页
        2.6.4 qPCR反应第23页
        2.6.5 数据处理第23页
    2.7 喜旱莲子草橙花叔醇合酶基因ApTPS19的克隆第23-27页
        2.7.1 喜旱莲子草RNA提取第23页
        2.7.2 cDNA的合成第23页
        2.7.3 引物设计及PCR第23-24页
        2.7.4 PCR扩增第24页
        2.7.5 构建过表达载体第24-27页
    2.8 农杆菌侵染拟南芥第27-28页
        2.8.1 转化第27-28页
        2.8.2 农杆菌菌液PCR鉴定第28页
        2.8.3 浸花法转化拟南芥第28页
3 结果与分析第28-49页
    3.1 喜旱莲子草转录组测序结果第28-33页
        3.1.1 转录组测序数据组装结果统计第29-30页
        3.1.2 Unigene功能注释统计结果第30-32页
        3.1.3 SSR分析结果统计第32-33页
    3.2 喜旱莲子草萜类合酶基因筛选及分析结果第33-42页
    3.3 虫食诱导和机械损伤条件下喜旱莲子草橙花叔醇合酶基因表达分析第42-44页
    3.4 喜旱莲子草橙花叔醇合酶ApTPS19基因的克隆与分析第44-49页
        3.4.1 叶片RNA提取结果第44页
        3.4.2 PCR扩增结果第44-45页
        3.4.3 双酶切结果第45-46页
        3.4.4 菌落PCR结果第46页
        3.4.5 测序结果分析第46-49页
4 讨论第49-51页
    4.1 喜旱莲子草萜烯合酶基因第49-50页
    4.2 喜旱莲子草橙花叔醇合酶基因的作用第50-51页
    4.3 方法与后续试验展望第51页
5 小结第51-53页
参考文献第53-59页
Abstract第59-60页
研究生期间发表论文第61-63页
致谢第63页

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