摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
1 前言 | 第10-17页 |
1.1 水产品的重要性和现状 | 第10页 |
1.2 重要的水产致病菌 | 第10-13页 |
1.2.1 气单胞菌属 | 第10-11页 |
1.2.2 弧菌属 | 第11-12页 |
1.2.3 变形杆菌属 | 第12页 |
1.2.4 邻单胞菌属 | 第12页 |
1.2.5 摩根菌属 | 第12-13页 |
1.3 噬菌体 | 第13-15页 |
1.3.1 噬菌体概述 | 第13-14页 |
1.3.2 噬菌体的受体 | 第14-15页 |
1.3.3 噬菌体的生态学意义 | 第15页 |
1.4 本文的研究意义及其内容 | 第15-17页 |
1.4.1 本文研究意义 | 第15-16页 |
1.4.2 本文研究内容 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-36页 |
2.1 样品来源 | 第17页 |
2.2 选择性培养基分离水产致病菌 | 第17-19页 |
2.2.1 选择性培养基的种类和成分 | 第17-18页 |
2.2.2 选择性培养基的分离原理 | 第18-19页 |
2.2.3 潜在水产致病菌的分离 | 第19页 |
2.3 乳酸菌的分离 | 第19页 |
2.4 芽孢杆菌的分离 | 第19页 |
2.5 噬菌体的分离 | 第19-20页 |
2.5.1 噬菌体的富集 | 第19-20页 |
2.5.2 双层平板法分离噬菌体 | 第20页 |
2.5.3 噬菌体的纯化 | 第20页 |
2.5.4 噬菌体的保存 | 第20页 |
2.6 致病菌的鉴定 | 第20-23页 |
2.6.1 基因组DNA的提取 | 第20-21页 |
2.6.2 致病菌16S rRNA基因的PCR扩增 | 第21页 |
2.6.3 宿主菌16S rRNA基因的克隆及测序 | 第21-23页 |
2.6.4 使用BLAST工具分析宿主菌16S rRNA基因 | 第23页 |
2.6.5 构建致病菌16S rRNA基因的系统进化树 | 第23页 |
2.7 气单胞菌属菌株的分型 | 第23-27页 |
2.7.1 气单胞菌的PFGE分型 | 第23-25页 |
2.7.2 气单胞菌属菌株的RAPD分型 | 第25-26页 |
2.7.3 气单胞菌属菌株的ERIC-PCR分型 | 第26-27页 |
2.7.4 分析电泳结果构建系统进化树 | 第27页 |
2.8 气单胞菌致病性分析 | 第27-31页 |
2.8.1 气单胞菌毒力基因的PCR扩增 | 第27-31页 |
2.8.2 溶血性分析 | 第31页 |
2.9 气单胞菌噬菌体的生物学特性分析 | 第31-32页 |
2.9.1 噬菌体滴度测定 | 第31页 |
2.9.2 噬菌体宿主范围的测定 | 第31页 |
2.9.3 噬菌体对宿主菌的生长抑制试验 | 第31-32页 |
2.9.4 pH对噬菌体稳定性的影响 | 第32页 |
2.10 气单胞菌噬菌体受体相关基因的遗传学分析 | 第32-36页 |
2.10.1 构建气单胞菌转座子文库 | 第32-33页 |
2.10.2 噬菌体抗性突变株对噬菌体的吸附分析 | 第33页 |
2.10.3 转座子Tn5G插入位点的确定 | 第33-34页 |
2.10.4 突变子泳动能力(swimming motility)的测定 | 第34-36页 |
3 结果与讨论 | 第36-65页 |
3.1 淡水鱼消化道内的微生物生态分析 | 第36-37页 |
3.1.1 潜在致病菌的分离 | 第36页 |
3.1.2 乳酸菌的分离 | 第36页 |
3.1.3 芽孢杆菌的分离 | 第36-37页 |
3.2 淡水鱼消化道内噬菌体的分离 | 第37-39页 |
3.3 噬菌体宿主菌的鉴定和同源性分析 | 第39-45页 |
3.3.1 宿主菌16S rRNA基因的鉴定 | 第39-43页 |
3.3.2 宿主菌16S rRNA基因的同源性分析 | 第43-45页 |
3.4 气单胞菌分型研究 | 第45-52页 |
3.4.1 气单胞菌的RAPD分型 | 第45-48页 |
3.4.2 气单胞菌的ERIC-PCR分型 | 第48-49页 |
3.4.3 气单胞菌的PFGE分型 | 第49-50页 |
3.4.4 气单胞菌的毒力基因扩增和溶血性分析 | 第50-52页 |
3.5 气单胞菌噬菌体宿主范围的测定 | 第52-54页 |
3.6 噬菌体的生物学特性研究 | 第54-59页 |
3.6.1 噬菌体对宿主菌的抑制效应 | 第54页 |
3.6.2 噬菌体与菌株的组合对生长抑制的影响 | 第54-58页 |
3.6.3 pH对噬菌体稳定性的影响 | 第58-59页 |
3.7 噬菌体受体相关基因的遗传分析 | 第59-65页 |
3.7.1 构建转座子文库筛选噬菌体耐受突变株 | 第59页 |
3.7.2 突变株的表型 | 第59-61页 |
3.7.3 鉴定突变子的插入位点 | 第61-65页 |
4 结论 | 第65-66页 |
5 展望 | 第66-67页 |
6 参考文献 | 第67-74页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第74-75页 |
8 致谢 | 第75页 |