| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1. 前言和综述 | 第9-15页 |
| 1.1 衰老 | 第9-10页 |
| 1.1.1 衰老机制的研究现状 | 第9-10页 |
| 1.2 干预衰老的方法的研究 | 第10-13页 |
| 1.2.1 研究寿命的常用模式生物 | 第10-12页 |
| 1.2.2 延缓寿命的方法研究 | 第12-13页 |
| 1.3 研究内容与意义 | 第13-14页 |
| 1.4 小结 | 第14-15页 |
| 2. PQQ延长寿命的分子机制研究 | 第15-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第15页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第15页 |
| 2.1.2 试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 细胞 | 第15页 |
| 2.1.4 实验器材 | 第15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-26页 |
| 2.2.1 果蝇培养方法 | 第15-16页 |
| 2.2.2 秀丽隐杆线虫培养方法 | 第16-18页 |
| 2.2.2.1 秀丽隐杆线虫培养用试剂配制方法 | 第16-17页 |
| 2.2.2.2 秀丽隐杆线虫的培养方法 | 第17-18页 |
| 2.2.3 质粒的构建 | 第18-19页 |
| 2.2.3.1 H-Keap1质粒的构建 | 第18页 |
| 2.2.3.2 SIRT6启动子质粒构建 | 第18-19页 |
| 2.2.3.3 SIRT6启动子区缺失突变和点突变质粒的构建 | 第19页 |
| 2.2.4 质粒提取 | 第19-20页 |
| 2.2.5 细胞培养 | 第20页 |
| 2.2.6 细胞转染 | 第20页 |
| 2.2.7 原代小鼠胚胎成纤维细胞的分离 | 第20-21页 |
| 2.2.8 小鼠基因型鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.9 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第22页 |
| 2.2.10 RNA提取以及Q-PCR分析 | 第22-23页 |
| 2.2.10.1 细胞RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.10.2 组织RNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.11 RNA的反转录 | 第23-24页 |
| 2.2.12 荧光实时定量PCR检测(Q-PCR)检测 | 第24-25页 |
| 2.2.13 蛋白提取 | 第25页 |
| 2.2.14 Western blot分析 | 第25-26页 |
| 2.2.15 统计分析 | 第26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-39页 |
| 2.3.1 PQQ对秀丽隐杆线虫、果蝇寿命的影响 | 第26-29页 |
| 2.3.1.1 PQQ对秀丽隐杆线虫寿命的影响 | 第26-27页 |
| 2.3.1.2 PQQ对果蝇寿命的影响 | 第27-29页 |
| 2.3.1.3 本节小结 | 第29页 |
| 2.3.2 细胞水平上PQQ对Nrf2及Sirt6表达的调控 | 第29-34页 |
| 2.3.2.1 本节小结 | 第33-34页 |
| 2.3.3 Nrf2对SIRT6的调控 | 第34-39页 |
| 2.3.3.1 Nrf2蛋白增加了SIRT6的启动子活性 | 第34-35页 |
| 2.3.3.2 细胞中过表达Nrf2可以增加SIRT6的蛋白水平 | 第35-36页 |
| 2.3.3.3 MEF及小鼠部分组织中Nrf2与SIRT6 mRNA表达水平检测 | 第36-39页 |
| 2.3.3.4 本节小结 | 第39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-41页 |
| 全文小结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 附录 | 第49-54页 |
| 主要试剂配方 | 第49-51页 |
| 实验室主要仪器设备 | 第51-52页 |
| 英文缩略词表 | 第52-53页 |
| 在读期间的研究成果 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
