摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-26页 |
1 玻璃扯旗鱼的研究概况 | 第11-13页 |
2 鱼类性腺发育及性别分化研究进展 | 第13-17页 |
2.1 鱼类性腺的结构特征 | 第13-14页 |
2.2 鱼类性腺发育与性别分化 | 第14-15页 |
2.3 鱼类性别决定与性别控制 | 第15-17页 |
3 鱼类Vasa基因的研究进展 | 第17-24页 |
3.1 Vasa基因的结构和序列特征 | 第17-20页 |
3.2 Vasa基因在胚胎发育中的表达和定位 | 第20-22页 |
3.3 Vasa基因的功能及其应用 | 第22-24页 |
4 本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
第二章 玻璃扯旗鱼性腺发育及性别分化的初探 | 第26-38页 |
1 前言 | 第26页 |
2 材料与方法 | 第26-28页 |
2.1 材料 | 第26-27页 |
2.1.1 实验动物 | 第26页 |
2.1.2 主要试剂和仪器设备 | 第26-27页 |
2.2 方法 | 第27-28页 |
2.2.1 实验动物的麻醉及解剖 | 第27页 |
2.2.2 显微镜观察 | 第27页 |
2.2.3 鱼体性状数据的收集及结果分析 | 第27页 |
2.2.4 石蜡切片制作及H.E.染色 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-36页 |
3.1 玻璃扯旗成鱼性别特征及性腺组织学观察 | 第28-30页 |
3.2 不同日龄银膜系玻璃扯旗成鱼的性别鉴定 | 第30-32页 |
3.3 玻璃扯旗鱼臀鳍性别差异的观察 | 第32-34页 |
3.4 玻璃扯旗幼鱼性腺发育的组织学特点 | 第34-36页 |
4 小结 | 第36-38页 |
第三章 玻璃扯旗鱼Vasa基因的克隆及表达分析 | 第38-69页 |
1 前言 | 第38页 |
2 材料与方法 | 第38-55页 |
2.1 材料 | 第38-41页 |
2.1.1 实验动物 | 第38页 |
2.1.2 主要试剂及配制 | 第38-40页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第40-41页 |
2.2 方法 | 第41-55页 |
2.2.1 材料的收集 | 第41-42页 |
2.2.2 玻璃扯旗鱼Vasa基因克隆 | 第42-51页 |
2.2.2.1 RNA提取 | 第42-43页 |
2.2.2.2 反转录合成第一链cDNA | 第43-44页 |
2.2.2.3 PCR反应 | 第44-45页 |
2.2.2.4 PCR产物的纯化回收 | 第45页 |
2.2.2.5 PCR产物的连接 | 第45-46页 |
2.2.2.6 连接产物的转化 | 第46页 |
2.2.2.7 重组子的鉴定及测序 | 第46页 |
2.2.2.8 RACE-PCR | 第46-50页 |
2.2.2.9 序列分析、进化树构建及三维蛋白结构预测 | 第50-51页 |
2.2.3 半定量RT-PCR研究VasamRNA在不同组织及不同发育时期的表达 | 第51页 |
2.2.4 原位杂交研究VasamRNA在成鱼性腺中的定位 | 第51-55页 |
2.2.4.1 VasaRNA探针的合成 | 第51-54页 |
2.2.4.2 玻璃扯旗鱼性腺组织切片的原位杂交 | 第54-55页 |
3 结果 | 第55-67页 |
3.1 玻璃扯旗鱼Vasa基因cDNA结构序列 | 第55-59页 |
3.1.1 Vasa基因部分中间片段的获得 | 第55-56页 |
3.1.2 Vasa基因cDNA3’端序列的获得 | 第56页 |
3.1.3 Vasa基因DNA5’端序列的获得 | 第56-57页 |
3.1.4 Vasa全长cDNA序列的获得 | 第57-59页 |
3.2 玻璃扯旗鱼Vasa氨基酸序列及其同源比对 | 第59-62页 |
3.3 玻璃扯旗鱼Vasa进化树构建及三维结构预测 | 第62-64页 |
3.4 玻璃扯旗鱼VasamRNA在不同组织及不同发育阶段的表达分析 | 第64-65页 |
3.4.1 VasamRNA在玻璃扯旗成鱼不同组织中的表达 | 第64页 |
3.4.2 VasamRNA在玻璃扯旗鱼不同发育阶段的表达 | 第64-65页 |
3.5 原位杂交研究Pm-Vasa在成熟性腺中的定位 | 第65-67页 |
3.5.1 VasaRNA探针的合成 | 第65-66页 |
3.5.2 Pm-VasamRNA在成熟性腺中的定位 | 第66-67页 |
4 小结 | 第67-69页 |
第四章 结论与展望 | 第69-71页 |
1 研究结论 | 第69页 |
2 进一步需开展的工作 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
作者简历 | 第83页 |