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玻璃扯旗鱼性腺发育及其相关基因Vasa的克隆与表达研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 文献综述第11-26页
    1 玻璃扯旗鱼的研究概况第11-13页
    2 鱼类性腺发育及性别分化研究进展第13-17页
        2.1 鱼类性腺的结构特征第13-14页
        2.2 鱼类性腺发育与性别分化第14-15页
        2.3 鱼类性别决定与性别控制第15-17页
    3 鱼类Vasa基因的研究进展第17-24页
        3.1 Vasa基因的结构和序列特征第17-20页
        3.2 Vasa基因在胚胎发育中的表达和定位第20-22页
        3.3 Vasa基因的功能及其应用第22-24页
    4 本研究的目的及意义第24-26页
第二章 玻璃扯旗鱼性腺发育及性别分化的初探第26-38页
    1 前言第26页
    2 材料与方法第26-28页
        2.1 材料第26-27页
            2.1.1 实验动物第26页
            2.1.2 主要试剂和仪器设备第26-27页
        2.2 方法第27-28页
            2.2.1 实验动物的麻醉及解剖第27页
            2.2.2 显微镜观察第27页
            2.2.3 鱼体性状数据的收集及结果分析第27页
            2.2.4 石蜡切片制作及H.E.染色第27-28页
    3 结果第28-36页
        3.1 玻璃扯旗成鱼性别特征及性腺组织学观察第28-30页
        3.2 不同日龄银膜系玻璃扯旗成鱼的性别鉴定第30-32页
        3.3 玻璃扯旗鱼臀鳍性别差异的观察第32-34页
        3.4 玻璃扯旗幼鱼性腺发育的组织学特点第34-36页
    4 小结第36-38页
第三章 玻璃扯旗鱼Vasa基因的克隆及表达分析第38-69页
    1 前言第38页
    2 材料与方法第38-55页
        2.1 材料第38-41页
            2.1.1 实验动物第38页
            2.1.2 主要试剂及配制第38-40页
            2.1.3 主要仪器设备第40-41页
        2.2 方法第41-55页
            2.2.1 材料的收集第41-42页
            2.2.2 玻璃扯旗鱼Vasa基因克隆第42-51页
                2.2.2.1 RNA提取第42-43页
                2.2.2.2 反转录合成第一链cDNA第43-44页
                2.2.2.3 PCR反应第44-45页
                2.2.2.4 PCR产物的纯化回收第45页
                2.2.2.5 PCR产物的连接第45-46页
                2.2.2.6 连接产物的转化第46页
                2.2.2.7 重组子的鉴定及测序第46页
                2.2.2.8 RACE-PCR第46-50页
                2.2.2.9 序列分析、进化树构建及三维蛋白结构预测第50-51页
            2.2.3 半定量RT-PCR研究VasamRNA在不同组织及不同发育时期的表达第51页
            2.2.4 原位杂交研究VasamRNA在成鱼性腺中的定位第51-55页
                2.2.4.1 VasaRNA探针的合成第51-54页
                2.2.4.2 玻璃扯旗鱼性腺组织切片的原位杂交第54-55页
    3 结果第55-67页
        3.1 玻璃扯旗鱼Vasa基因cDNA结构序列第55-59页
            3.1.1 Vasa基因部分中间片段的获得第55-56页
            3.1.2 Vasa基因cDNA3’端序列的获得第56页
            3.1.3 Vasa基因DNA5’端序列的获得第56-57页
            3.1.4 Vasa全长cDNA序列的获得第57-59页
        3.2 玻璃扯旗鱼Vasa氨基酸序列及其同源比对第59-62页
        3.3 玻璃扯旗鱼Vasa进化树构建及三维结构预测第62-64页
        3.4 玻璃扯旗鱼VasamRNA在不同组织及不同发育阶段的表达分析第64-65页
            3.4.1 VasamRNA在玻璃扯旗成鱼不同组织中的表达第64页
            3.4.2 VasamRNA在玻璃扯旗鱼不同发育阶段的表达第64-65页
        3.5 原位杂交研究Pm-Vasa在成熟性腺中的定位第65-67页
            3.5.1 VasaRNA探针的合成第65-66页
            3.5.2 Pm-VasamRNA在成熟性腺中的定位第66-67页
    4 小结第67-69页
第四章 结论与展望第69-71页
    1 研究结论第69页
    2 进一步需开展的工作第69-71页
参考文献第71-82页
致谢第82-83页
作者简历第83页

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