| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 植物中褪黑素的发现及其生理功能 | 第12-16页 |
| 1.1.1 植物中褪黑素的发现 | 第12-13页 |
| 1.1.2 植物中褪黑素的生理功能 | 第13-16页 |
| 1.2 植物中褪黑素的合成 | 第16-18页 |
| 1.2.1 褪黑素在植物中的合成路径 | 第16-17页 |
| 1.2.2 植物中褪黑素的合成场所 | 第17页 |
| 1.2.3 植物中褪黑素的合成具有昼夜节律 | 第17-18页 |
| 1.3 植物中褪黑素合成调控的分子机制 | 第18-23页 |
| 1.3.1 植物中褪黑素合成调控研究的空白 | 第18-19页 |
| 1.3.2 植物中褪黑素合成的“转录调控”和“翻译后调控”重要机制 | 第19-23页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 黑暗下KJ对褪黑素合成酶基因的转录调控 | 第24-55页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 试验材料 | 第24-30页 |
| 2.2.1 材料培养与处理 | 第24-25页 |
| 2.2.2 菌株、载体和试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.3 缓冲液及母液的配置 | 第26-28页 |
| 2.2.4 常用培养基配制 | 第28-29页 |
| 2.2.5 引物 | 第29-30页 |
| 2.3 试验方法 | 第30-39页 |
| 2.3.1 基因克隆与载体构建 | 第30-32页 |
| 2.3.2 进化树分析 | 第32页 |
| 2.3.3 蛋白的原核表达及纯化 | 第32-33页 |
| 2.3.4 MzASMT3、AtSNAT6与AtASMT8蛋白的体外酶活试验 | 第33-34页 |
| 2.3.5 转基因拟南芥植株的获得 | 第34页 |
| 2.3.6 转基因苹果愈伤的获得 | 第34-35页 |
| 2.3.7 褪黑素含量的测定 | 第35页 |
| 2.3.8 凝胶阻滞试验(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA) | 第35-37页 |
| 2.3.9 染色质免疫共沉淀试验(Chromatin Immunoprecipitation Assay,ChIP) | 第37-39页 |
| 2.3.10 褪黑素影响子叶开张的表型观察 | 第39页 |
| 2.4 结果与分析 | 第39-50页 |
| 2.4.1 褪黑素关键合成酶基因的克隆与生物信息学分析 | 第39-42页 |
| 2.4.2 MzASMT3、AtSNAT6与AtASMT8体外酶活的检测 | 第42-43页 |
| 2.4.3 MzASMT3、AtSNAT6与AtASMT8在植物体内参与褪黑素合成的研究 | 第43页 |
| 2.4.4 光/暗通路中调控褪黑素合成重要转录因子的筛选 | 第43-45页 |
| 2.4.5 KJ转录因子直接调控褪黑和合成酶基因的体内外验证 | 第45-47页 |
| 2.4.6 KJ调控黑暗下褪黑素合成转录机制的研究 | 第47-48页 |
| 2.4.7 KJ调控黑暗下褪黑素合成和参与形态建成的研究 | 第48-50页 |
| 2.5 讨论 | 第50-54页 |
| 2.6 小结 | 第54-55页 |
| 第三章 WL蛋白与褪黑素合成酶互作,减少其泛素化降解 | 第55-72页 |
| 3.1 引言 | 第55页 |
| 3.2 试验材料 | 第55-57页 |
| 3.2.1 材料培养 | 第55页 |
| 3.2.2 菌株、载体和试剂 | 第55-56页 |
| 3.2.3 缓冲液及母液的配置 | 第56页 |
| 3.2.4 常用培养基配制 | 第56页 |
| 3.2.5 引物 | 第56-57页 |
| 3.3 试验方法 | 第57-61页 |
| 3.3.1 基因克隆与载体构建 | 第57页 |
| 3.3.2 进化树分析 | 第57-58页 |
| 3.3.3 蛋白的原核表达及纯化 | 第58页 |
| 3.3.4 MzSNAT5蛋白的体外酶活试验 | 第58页 |
| 3.3.5 转基因拟南芥植株的获得 | 第58页 |
| 3.3.6 褪黑素含量的测定 | 第58页 |
| 3.3.7 瞬时注射苹果叶片试验 | 第58-59页 |
| 3.3.8 双分子荧光互补(BiFC)试验 | 第59页 |
| 3.3.9 苹果愈伤瞬时转化试验 | 第59页 |
| 3.3.10 免疫共沉淀试验(Co-Immunoprecipitation,Co-IP) | 第59-60页 |
| 3.3.11 泛素化检测试验 | 第60-61页 |
| 3.4 结果与分析 | 第61-70页 |
| 3.4.1 MzSNAT5的生物信息学分析 | 第61页 |
| 3.4.2 MzSNAT5体外酶活的检测 | 第61-62页 |
| 3.4.3 MzSNAT5在植物体内参与褪黑素合成的研究 | 第62-63页 |
| 3.4.4 超表达AtWLλ转基因拟南芥中褪黑素含量的测定 | 第63页 |
| 3.4.5 MzWL与MzSNAT5、MzASMT1、MzASMT9在苹果体内互作的验证 | 第63-69页 |
| 3.4.6 MzWL蛋白与MzSNAT5、MzASMT1与MzASMT9互作,对其泛素化降解的影响 | 第69-70页 |
| 3.5 讨论 | 第70-71页 |
| 3.6 小结 | 第71-72页 |
| 第四章 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 个人简历 | 第80页 |
