牛瑟氏泰勒虫18S rRNA基因的克隆及PCR诊断方法的建立
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-18页 |
| 1 牛瑟氏泰勒虫病概况 | 第10-12页 |
| 2 牛瑟氏泰勒虫病诊断技术研究进展 | 第12-16页 |
| 3 18S RRNA基因的研究进展 | 第16-17页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 材料与方法 | 第18-27页 |
| 1 材料 | 第18-21页 |
| ·阳性血液来源 | 第18页 |
| ·菌种 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·特异性试验材料 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·试验用溶液及其配制 | 第18-21页 |
| 2 方法 | 第21-27页 |
| ·血液采集 | 第21页 |
| ·血液涂片检查 | 第21页 |
| ·不同血液抗凝剂抗凝效果的比较 | 第21页 |
| ·牛瑟氏泰勒虫DNA的提取及样品质量的比较 | 第21-22页 |
| ·PCR引物设计与合成 | 第22页 |
| ·PCR扩增 | 第22-23页 |
| ·PCR产物的鉴定 | 第23页 |
| ·PCR产物的纯化与克隆 | 第23-25页 |
| ·核苷酸序列的测定及分析 | 第25-26页 |
| ·PCR诊断方法的建立 | 第26页 |
| ·应用试验 | 第26-27页 |
| 结果 | 第27-35页 |
| 1 不同血液抗凝剂抗凝效果的比较 | 第27页 |
| 2 提取的DNA样品质量的比较结果 | 第27-28页 |
| ·DNA样品的紫外吸收值 | 第27-28页 |
| ·DNA样品琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| 3 PCR扩增结果 | 第28-29页 |
| 4 重组质粒的鉴定结果 | 第29页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第29页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| 5 核苷酸序列的测定及分析 | 第29-31页 |
| ·核苷酸序列测定结果 | 第30页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第30-31页 |
| 6 PCR诊断方法的建立 | 第31-33页 |
| ·目的基因的PCR扩增、测序及序列比较 | 第31页 |
| ·退火温度的筛选 | 第31-32页 |
| ·特异性试验 | 第32页 |
| ·敏感性试验 | 第32-33页 |
| 7 应用试验 | 第33-35页 |
| 讨论 | 第35-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 作者简介 | 第45页 |
