| 内容提要 | 第1-7页 |
| 英文缩写词表 | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-25页 |
| ·导向载体 | 第9-12页 |
| ·抗体载体 | 第9-10页 |
| ·特定受体的配体载体 | 第10-12页 |
| ·弹头 | 第12-17页 |
| ·放射性核素 | 第13页 |
| ·化学药物 | 第13-14页 |
| ·生物毒素 | 第14-17页 |
| ·载体与弹头的连接 | 第17-23页 |
| ·化学交联剂和柔链接头 | 第17-18页 |
| ·可裂解接头 | 第18-23页 |
| ·展望 | 第23-24页 |
| ·本实验的意义 | 第24-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-43页 |
| ·材料 | 第25-31页 |
| ·菌株、载体及细胞株 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·生物信息学网络资源 | 第27页 |
| ·溶液的配制 | 第27-31页 |
| ·重组靶向毒素“去整合素 ADAM1-接头-蜂毒肽”基因的合成与克隆 | 第31-35页 |
| ·重组靶向毒素“去整合素ADAM15-接头-蜂毒肽”基因的设计与合成 | 第31-32页 |
| ·构建基因DAM 表达蛋白性质的生物信息学预测 | 第32页 |
| ·DAM 基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·碱裂解法提取pUC57-DAM 质粒 | 第33-34页 |
| ·pUC57-DAM 的酶切 | 第34页 |
| ·冻融法回收DAM 基因片段 | 第34-35页 |
| ·重组靶向毒素“去整合素ADAM15-接头-蜂毒肽”的表达与纯化 | 第35-43页 |
| ·PGEX-DAM 重组表达载体的构建 | 第35页 |
| ·DH5α感受态细胞制备 | 第35-36页 |
| ·pGEX-DAM 重组表达载体的转化 | 第36页 |
| ·pGEX-DAM 重组表达载体的筛选 | 第36页 |
| ·碱裂解法提取质粒(小提) | 第36-37页 |
| ·pGEX-DAM 重组表达载体的鉴定 | 第37页 |
| ·pGEX-DAM 重组表达载体的扩增 | 第37-38页 |
| ·GST-DAM 融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第38页 |
| ·GST-DAM 融合蛋白表达条件的优化 | 第38-39页 |
| ·GST-DAM 融合蛋白的纯化 | 第39-41页 |
| ·GST-DAM 融合蛋白的酶切 | 第41页 |
| ·DAM 肿瘤细胞杀伤活性的初步测定 | 第41-43页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第43-61页 |
| ·结果 | 第43-55页 |
| ·DAM 表达蛋白的生物信息学分析 | 第43-46页 |
| ·pUC57-DAM 克隆质粒的酶切 | 第46页 |
| ·PGEX-DAM 重组表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·pGEX-DAM 重组表达质粒的酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第48-49页 |
| ·pGEX-DAM 表达条件的优化 | 第49-51页 |
| ·包涵体的处理 | 第51页 |
| ·GST-DAM 融合蛋白的纯化及酶切 | 第51-52页 |
| ·GST-DAM 酶切后DAM 的回收 | 第52-53页 |
| ·DAM 蛋白含量测定 | 第53页 |
| ·DAM 引起体外培养肿瘤细胞A549 形态改变观察结果 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-61页 |
| ·DAM 基因序列的设计 | 第55-57页 |
| ·DAM 表达宿主菌选择的依据 | 第57页 |
| ·DAM 表达载体与表达方式的选择 | 第57-58页 |
| ·GST-DAM 表达条件的优化 | 第58-59页 |
| ·GST-DAM 蛋白包涵体的溶解 | 第59-61页 |
| 第4章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 摘要 | 第71-74页 |
| ABSTRACT | 第74-76页 |
