| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 脂多糖诱导肝损伤时脂代谢相关基因的表达变化 | 第15-34页 |
| 1.1 LPS 的结构特点 | 第15页 |
| 1.2 LPS 的生物学功能 | 第15-16页 |
| 1.3 LPS 的作用机制 | 第16页 |
| 1.4 肝脏的生物学功能及研究现状 | 第16-17页 |
| 1.5 LPS 诱导肝脏损伤的机理 | 第17-19页 |
| 1.6 TOLL 样受体研究进展 | 第19-27页 |
| 1.6.1 TLR1，TLR2 和 TLR6 | 第20-21页 |
| 1.6.2 TLR3 | 第21页 |
| 1.6.3 TLR4 | 第21-22页 |
| 1.6.4 TLR5 | 第22-23页 |
| 1.6.5 TLR9 和 TLR7 | 第23页 |
| 1.6.6 TLRs 的表达调控及分布 | 第23-24页 |
| 1.6.7 TLR 介导的信号途径 | 第24-25页 |
| 1.6.8 I 型 IFNs 与 TLRs | 第25-26页 |
| 1.6.9 TLRs 对免疫应答的调节 | 第26页 |
| 1.6.10 杀灭微生物中有关的 TLR | 第26-27页 |
| 1.7 脂代谢相关基因的研究 | 第27-32页 |
| 1.7.1 乙酰辅酶 A 羧化酶（Acetyl CoA carboxylase, ACC）的研究进展 | 第27-28页 |
| 1.7.2 脂肪酸合成酶（fatty acid-synthetase, FAS）的研究进展 | 第28页 |
| 1.7.3 硬脂酰辅酶 A 去饱和酶 (stearoyl-coenzyme A desaturase,SCD)的研究进展 | 第28-30页 |
| 1.7.4. 肝脏 X 受体 (liver X receptors，LXRs)的研究进展 | 第30-31页 |
| 1.7.5 CD36 | 第31-32页 |
| 1.8 感染和炎症对脂代谢的影响 | 第32-34页 |
| 第二章 本研究工作的目的和意义 | 第34-36页 |
| 2.1 本研究的目的 | 第34-35页 |
| 2.2 本研究的意义 | 第35-36页 |
| 第三章 牛犊原代肝细胞的培养和鉴定 | 第36-48页 |
| 3.1 试验材料 | 第36-38页 |
| 3.1.1 试验动物 | 第36页 |
| 3.1.2 主要实验试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第36-37页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第37-38页 |
| 3.2 试验方法 | 第38-41页 |
| 3.2.1 肝细胞分离方法 | 第38-39页 |
| 3.2.2 肝细胞活率检测 | 第39页 |
| 3.2.3. 原代肝细胞培养 | 第39页 |
| 3.2.4 原代肝细胞形态学观察 | 第39-40页 |
| 3.2.5 原代肝细胞上清液乳酸脱氢酶（LDH）、尿素（Urea）含量的测定 | 第40页 |
| 3.2.6 原代肝细胞标志性蛋白的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3 数据分析 | 第41-42页 |
| 3.4 实验结果 | 第42-46页 |
| 3.4.1 原代肝细胞数量与活率 | 第42页 |
| 3.4.2 MTT 法测培养原代肝细胞的活力 | 第42页 |
| 3.4.3 原代肝细胞的形态学观察 | 第42-44页 |
| 3.4.4 原代肝细胞肝功能蛋白乳酸脱氢酶（LDH）及尿素（Urea）含量的测定 | 第44-45页 |
| 3.4.5 原代肝细胞标志性功能蛋白的鉴定 | 第45-46页 |
| 3.5 讨论 | 第46-47页 |
| 3.6 小结 | 第47-48页 |
| 第四章 脂多糖诱导牛犊肝细胞相关炎症因子基因表达的影响 | 第48-58页 |
| 4.1 试验材料 | 第48-49页 |
| 4.1.1 试验细胞 | 第48页 |
| 4.1.2 主要实验试剂及配制 | 第48-49页 |
| 4.1.3 主要实验仪器设备 | 第49页 |
| 4.2 试验方法 | 第49-51页 |
| 4.2.1 LPS 诱导肝细胞的剂量和时间效应试验 | 第49页 |
| 4.2.2 细胞总 RNA 提取 | 第49-50页 |
| 4.2.3 荧光定量 PCR 法对肝细胞相关炎性基因的检测 | 第50-51页 |
| 4.3 数据分析 | 第51页 |
| 4.4 实验结果 | 第51-55页 |
| 4.4.1 肝细胞中总 RNA 的检测结果 | 第51-52页 |
| 4.4.2 LPS 诱导肝细胞的时间和剂量效应试验 | 第52-55页 |
| 4.5 讨论 | 第55-57页 |
| 4.5.1 LPS 对肝细胞损伤的形态学影响 | 第55-56页 |
| 4.5.2 LPS 诱导肝细胞损伤机理 | 第56-57页 |
| 4.6 小结 | 第57-58页 |
| 第五章 脂多糖对牛犊原代肝细胞脂代谢相关基因表达的影响 | 第58-63页 |
| 5.1 试验材料 | 第58页 |
| 5.1.1 试验细胞 | 第58页 |
| 5.1.2 主要实验试剂及配制 | 第58页 |
| 5.1.3 主要实验仪器设备 | 第58页 |
| 5.2 试验方法 | 第58-59页 |
| 5.2.1 LPS 诱导牛犊原代肝细胞的剂量和时间效应试验 | 第58页 |
| 5.2.2 细胞总 RNA 提取 | 第58页 |
| 5.2.3 荧光定量 PCR 法检测肝细胞脂代谢相关基因表达 | 第58-59页 |
| 5.3 数据分析 | 第59-60页 |
| 5.4 实验结果 | 第60-61页 |
| 5.4.1 肝细胞中总 RNA 的检测结果 | 第60页 |
| 5.4.2 LPS 诱导牛犊原代肝细胞对相关脂代谢基因表达的影响 | 第60-61页 |
| 5.5 讨论 | 第61-62页 |
| 5.6 小结 | 第62-63页 |
| 第六章 脂多糖诱导泌乳期萨能奶山羊肝损伤时相关炎症因子基因表达谱的研究 | 第63-77页 |
| 6.1 试验材料 | 第63页 |
| 6.1.1 试验动物 | 第63页 |
| 6.2 主要实验试剂及配制 | 第63页 |
| 6.3 主要实验仪器设备 | 第63-64页 |
| 6.4 试验方法 | 第64-67页 |
| 6.4.1 LPS 诱导肝损伤的时间和浓度效应试验 | 第64页 |
| 6.4.2 样品采集 | 第64页 |
| 6.4.3 肝脏组织匀浆液的制备 | 第64页 |
| 6.4.4 血浆和肝脏中 GOT 和 GPT 的测定 | 第64页 |
| 6.4.5 石蜡切片制作 | 第64-65页 |
| 6.4.6 肝脏组织的病理观察 | 第65页 |
| 6.4.7 肝组织总 RNA 的提取 | 第65页 |
| 6.4.8 RNA 质量检测 | 第65页 |
| 6.4.9 荧光定量 PCR 法进行相关炎性基因的检测 | 第65-66页 |
| 6.4.10 通过半定量进行相关基因的检测 | 第66-67页 |
| 6.4.11 数据分析 | 第67页 |
| 6.5 结果 | 第67-74页 |
| 6.5.1 LPS 诱导肝损伤的时间和剂量效应 | 第67-69页 |
| 6.5.2 血液和肝脏中 GOT 和 GPT 含量的变化 | 第69-71页 |
| 6.5.3 提取总 RNA 的检测结果 | 第71-72页 |
| 6.5.4 TLR4/NF-κB 实现信号通路的分子表达 | 第72-73页 |
| 6.5.5 TLR4/NF-κB 实现信号传导的下游目标分子 TNFα和 IL-10 的表达 | 第73-74页 |
| 6.6 讨论 | 第74-76页 |
| 6.6.1 LPS 对肝损伤的形态学观察 | 第74-75页 |
| 6.6.2 LPS 诱导肝损伤机理 | 第75-76页 |
| 6.7 小结 | 第76-77页 |
| 第七章 脂多糖诱导泌乳期奶山羊肝损伤时脂代谢相关基因表达的影响 | 第77-82页 |
| 7.1 试验材料 | 第77页 |
| 7.1.1 试验动物 | 第77页 |
| 7.1.2 主要实验试剂及配制 | 第77页 |
| 7.1.3 主要实验仪器设备 | 第77页 |
| 7.2 试验方法 | 第77-79页 |
| 7.2.1 LPS 诱导肝脏的时间和剂量效应试验 | 第77-79页 |
| 7.3 数据分析 | 第79页 |
| 7.4 结果 | 第79-80页 |
| 7.4.1 样品中总 RNA 的检测结果 | 第79页 |
| 7.4.2 LPS 作用于肝脏对脂代谢相关基因表达的影响 | 第79-80页 |
| 7.5 讨论 | 第80-81页 |
| 7.6 小结 | 第81-82页 |
| 全文总结 | 第82-84页 |
| 论文创新点和进一步研究课题 | 第84-85页 |
| 创新点 | 第84页 |
| 下一步研究方向 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简介 | 第103页 |
