| 致谢 | 第5-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-35页 |
| 1 鞘脂质 | 第16-17页 |
| 2 鞘脂质生物合成途径 | 第17-27页 |
| 3 神经酰胺的研究进展 | 第27页 |
| 4 甘露糖-肌醇磷脂酰-神经酰胺的研究进展 | 第27-28页 |
| 5 葡糖基神经酰胺的研究进展 | 第28-30页 |
| 5.1 葡糖基神经酰胺对真菌生长和致病性的影响 | 第28-29页 |
| 5.2 葡糖基神经酰胺调控真菌生长和致病性的机理 | 第29-30页 |
| 6 鞘脂质合成途径相关酶作为新型杀菌剂的潜在靶标 | 第30-31页 |
| 7 鞘脂质检测方法的研究进展 | 第31-33页 |
| 8 本研究的目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 柑橘绿霉病菌鞘脂质合成途径的预测 | 第35-46页 |
| 1 引言 | 第35-36页 |
| 2 材料和方法 | 第36页 |
| 2.1 序列比对及分析 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-44页 |
| 3.1 参与柑橘绿霉病菌鞘脂质合成途径基因的生物信息学分析 | 第36-39页 |
| 3.2 柑橘绿霉病菌鞘脂质合成途径的推测 | 第39-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 鞘脂质合成途径抑制剂对柑橘绿霉病菌生长的影响 | 第46-53页 |
| 1 引言 | 第46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-48页 |
| 2.1 供试菌株 | 第46-47页 |
| 2.2 试剂 | 第47页 |
| 2.3 方法 | 第47-48页 |
| 3 结果和分析 | 第48-51页 |
| 3.1 鞘脂质合成途径抑制剂对柑橘绿霉病菌生长的影响 | 第48-49页 |
| 3.2 鞘脂质合成途径抑制剂对柑橘绿霉病菌菌丝生长的影响 | 第49-50页 |
| 3.3 抑制剂对柑橘绿霉病菌鞘脂质合成基因表达的影响 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 柑橘绿霉病菌鞘氨醇、植物鞘氨醇和葡糖基神经酰胺的测定 | 第53-61页 |
| 1 引言 | 第53-54页 |
| 2 材料与方法 | 第54-55页 |
| 2.1 试剂及溶液配制 | 第54页 |
| 2.2 HPLC-MS/MS测定鞘脂质 | 第54-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-60页 |
| 3.1 柑橘绿霉病菌鞘氨醇LC-MS分析 | 第55-56页 |
| 3.2 柑橘绿霉病菌植物鞘氨醇LC-MS分析 | 第56-57页 |
| 3.3 柑橘绿霉病菌葡糖基神经酰胺LC-MS分析 | 第57-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 第五章 柑橘绿霉病菌PDMIT1基因功能研究 | 第61-87页 |
| 1 引言 | 第61-62页 |
| 2 材料与方法 | 第62-69页 |
| 2.1 实验材料 | 第62-64页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第62页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第62-63页 |
| 2.1.3 供试柑橘 | 第63页 |
| 2.1.4 试剂 | 第63页 |
| 2.1.5 缓冲液 | 第63页 |
| 2.1.6 培养基 | 第63-64页 |
| 2.2 试验方法 | 第64-69页 |
| 2.2.1 序列比对及分析 | 第64页 |
| 2.2.2 质粒的构建 | 第64页 |
| 2.2.3 农杆菌介导的柑橘绿霉病菌转化 | 第64-65页 |
| 2.2.4 基因组Southern杂交分析 | 第65-66页 |
| 2.2.5 柑橘绿霉病菌生长、产孢和孢子萌发的测定 | 第66-67页 |
| 2.2.6 药剂、离子敏感性实验 | 第67页 |
| 2.2.7 简单快速的酵母转化方法 | 第67页 |
| 2.2.8 液泡中性红染色实验 | 第67-68页 |
| 2.2.9 基因表达分析 | 第68页 |
| 2.2.10 麦角甾醇的提取 | 第68-69页 |
| 2.2.11 柑橘绿霉病菌致病性试验 | 第69页 |
| 3 结果与分析 | 第69-84页 |
| 3.1 PdMit1基因克隆和序列分析 | 第69-71页 |
| 3.2 PdMit1基因缺失载体和回补载体的构建 | 第71-72页 |
| 3.3 PdMit1基因缺失及回补突变体的获得和分子鉴定 | 第72-74页 |
| 3.4 PdMit1参与柑橘绿霉病菌菌丝生长、产孢和孢子萌发 | 第74-77页 |
| 3.5 △PdMit1突变体对Ca~(2+)、Mg~(2+)离子的敏感性增强 | 第77-78页 |
| 3.6 PdMit1基因对酿酒酵母△Csg2突变体功能互补 | 第78-80页 |
| 3.7 PdMit1参与了柑橘绿霉病菌液泡响应钙离子胁迫的反应 | 第80-81页 |
| 3.8 △PdMit1突变体中Ca~(2+)-ATPase基因的表达分析 | 第81-82页 |
| 3.9 △PdMit1突变体对两性霉素敏感性增强 | 第82-83页 |
| 3.10 PdMit1基因与柑橘绿霉病菌致病性无关 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-87页 |
| 第六章 柑橘绿霉病菌葡糖基神经酰胺合成酶基因功能研究 | 第87-103页 |
| 1 引言 | 第87-88页 |
| 2 材料与方法 | 第88页 |
| 3 结果与分析 | 第88-100页 |
| 3.1 PdGcs1基因克隆和分析 | 第88-91页 |
| 3.2 PdGcs1基因缺失和回补载体的构建 | 第91-92页 |
| 3.3 PdGcs1基因缺失及回补突变体的获得和鉴定 | 第92-95页 |
| 3.4 △PdGcs1突变体葡糖基神经酰胺的检测 | 第95-96页 |
| 3.5 PdGcs1功能缺失抑制柑橘绿霉病菌的菌落生长、孢子生成和孢子萌发 | 第96-98页 |
| 3.6 PdGcs1参与柑橘绿霉病菌致病过程 | 第98-100页 |
| 4 讨论 | 第100-103页 |
| 全文总结与后续研究展望 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-116页 |
| 附录 | 第116-120页 |
| 个人简介 | 第120页 |
