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基于微流控芯片技术COPD向肺鳞癌恶性转化的机制研究

中文摘要第12-16页
英文摘要第16-21页
前言第22-28页
    参考文献第25-28页
第一部分 基于微流控芯片技术可疑致癌炎症因子的高通量筛选第28-42页
    (三) 引言第28页
    (四) 材料方法第28-34页
        1.材料第28-32页
            1.1 仪器第28-29页
            1.2 组织及细胞第29页
            1.3 试剂第29-31页
            1.4 试剂配制第31-32页
        2.方法第32-34页
            2.1 微流控芯片制作第32页
            2.2 肺癌细胞和癌旁支气管上皮细胞原代培养第32-33页
            2.3 微流控芯片上肺癌细胞和支气管上皮细胞培养第33页
            2.4 免疫荧光细胞化学第33页
            2.5 Real-time PCR第33-34页
            2.6 Western blot第34页
            2.7 免疫组化第34页
            2.8 统计学分析第34页
    (五) 结果第34-40页
        1.高通量筛选功能的微流控芯片构建第34-35页
        2.肺癌细胞和癌旁支气管上皮细胞原代培养第35-37页
            2.1 肺癌组织和癌旁组织病理确认结果第35-36页
            2.2 肺癌细胞和癌旁支气管上皮细胞原代培养第36-37页
        3.基于微流控芯片技术可疑炎症因子的高通量筛选第37-38页
            3.1 微流控芯片平台肺癌细胞和癌旁支气管上皮细胞培养第37页
            3.2 微流控芯片平台肺癌细胞和癌旁支气管上皮细胞可疑炎症因子表达第37-38页
        4.传统分子生物学技术可疑炎症因子的高通量筛选第38-40页
            4.1 免疫组化检测第38-39页
            4.2 Western blot 检测第39-40页
            4.3 Real-time PCR 检测第40页
    (六) 讨论第40-42页
    (七) 小结第42页
第二部分 基于微流控芯片技术 COPD 香烟再暴露致恶性转化的研究第42-59页
    (三) 引言第43-44页
    (四) 材料方法第44-49页
        1.材料第44-47页
            1.1 仪器第44页
            1.2 组织及细胞第44页
            1.3 试剂第44-46页
            1.4 试剂配制第46-47页
        2.方法第47-49页
            2.1 微流控芯片制作第47页
            2.2 香烟烟雾提取物 CSE 制备第47页
            2.3 微流控芯片支气管上皮细胞 CSE 再暴露第47-48页
            2.4 细胞增殖和凋亡检测第48页
            2.5 ROS 检测第48页
            2.6 免疫荧光细胞化学第48页
            2.7 Western blot第48页
            2.8 软琼脂克隆形成实验第48-49页
            2.9 染色体制备第49页
            2.10 统计学分析第49页
    (五) 结果第49-57页
        1.香烟再暴露微流控芯片研究平台的构建第49-50页
        2.CSE对人支气管上皮细胞凋亡和增殖的影响第50-51页
        3.CSE可以激活人支气管上皮细胞ROS和相关炎症分子通路第51-53页
        4.CSE可以促进支气管上皮细胞发生上皮-间质转化(EMT)42第53-54页
        5.CSE可以促进支气管上皮细胞发生瘤样变第54-57页
    (六) 讨论第57-59页
    (七) 小结第59页
第三部分 基于仿生肺芯片 NF-κB、COX2、STAT3、GRP78 在支气管上皮细胞恶性转化的作用研究第59-79页
    (三) 前言第60页
    (四) 材料方法第60-68页
        1.材料第60-64页
            1.1 仪器第60-61页
            1.2 细胞和动物第61页
            1.3 试剂、药品及耗材第61-63页
            1.4 试剂配制第63-64页
        2.方法第64-68页
            2.1 微流控芯片制作第64页
            2.2 细胞复苏、传代及冻存第64页
            2.3 CCK8 细胞毒性检测第64页
            2.4 ELISA 检测第64-65页
            2.5 仿生肺芯片的构建第65页
            2.6 仿生肺芯片支气管上皮细胞染毒第65-66页
            2.7 免疫荧光细胞化学第66页
            2.8 流式细胞周期检测第66-67页
            2.9 Western blot第67页
            2.10 软琼脂实验及克隆扩增实验第67页
            2.11 裸鼠成瘤实验第67页
            2.12 统计学分析第67-68页
    (五) 结果第68-77页
        1.仿生肺芯片的构建第68-69页
            1.1 仿生肺芯片的设计第68页
            1.2 仿生肺芯片细胞培养第68-69页
        2.仿生肺芯片支气管上皮细胞恶性转化模型构建第69-77页
            2.1 细胞形态学检测第69页
            2.2 接触抑制消失第69-70页
            2.3 细胞因子检测第70-71页
            2.4 细胞周期检测第71-73页
            2.5 软琼脂克隆形成第73-74页
            2.6 裸鼠成瘤实验第74-75页
            2.7 支气管上皮细胞恶性转化过程中的分子变化第75-77页
    (六) 讨论第77-79页
    (七) 小结第79页
第四部分 基于动物肺癌模型 NF-κB、COX2、STAT3、GRP78在支气管上皮恶性转化的作用研究第79-94页
    (三) 前言第80页
    (四) 材料方法第80-84页
        1.材料第80-82页
            1.1 仪器第80-81页
            1.2 动物第81页
            1.3 试剂、药品第81-82页
            1.4 试剂配制第82页
        2.方法第82-84页
            2.1 动物 COPD 模型制备第82-83页
            2.2 动物 COPD 模型标本采集和检测第83页
            2.3 动物肺癌模型的制备第83页
            2.4 动物体内 RNA 干扰第83页
            2.5 动物肺癌模型标本采集和检测第83-84页
            2.6 组织包埋及病理检测第84页
            2.7 统计学分析第84页
    (五) 结果第84-91页
        1.大鼠 COPD 模型建立及验证第84-85页
            1.1 大鼠一般情况观察第84页
            1.2 血常规及 BALF 检测第84-85页
            1.3 肺组织病理学检查第85页
        2.大鼠肺癌模型建立及验证第85-91页
            2.1 大鼠肺癌 X 线筛查第85页
            2.2 大鼠体内 RNA 干扰第85-88页
            2.3 大鼠肺癌模型建立及验证第88-90页
            2.4 大鼠肺癌发生率统计第90-91页
    (六) 讨论第91-93页
    (七) 小结第93-94页
参考文献第94-99页
综述第99-111页
    参考文献第105-111页
攻读学位期间发表文章情况第111-112页
致谢第112-113页

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