符号说明 | 第5-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
1 前言 | 第15-42页 |
1.1 盐害 | 第15-25页 |
1.1.1 盐胁迫对植物的影响 | 第15-18页 |
1.1.2 植物的抗盐机制 | 第18-25页 |
1.1.2.1 植物渗透胁迫耐受机制 | 第18-19页 |
1.1.2.2 植物维持离子平衡的机制 | 第19-25页 |
1.2 质体信号向核的反向调控 | 第25-36页 |
1.2.1 叶绿素生物合成的前体在retrograde信号通路中的作用 | 第27页 |
1.2.2 在绿藻中叶绿素合成的前体调控核基因的表达 | 第27-28页 |
1.2.3 拟南芥的gun突变体 | 第28-30页 |
1.2.4 依赖质体基因表达的信号通路 | 第30-31页 |
1.2.5 响应retrograde信号的顺式作用元件 | 第31-32页 |
1.2.6 依赖于镁卟啉环和质体基因表达的质体信号模式总结 | 第32-34页 |
1.2.7 参与质体信号的其他因子 | 第34-36页 |
1.3 非生物胁迫对叶绿体发育的影响 | 第36-41页 |
1.3.1 非生物胁迫增强光抑制 | 第36-37页 |
1.3.2 光系统Ⅱ的破坏与修复比率 | 第37-38页 |
1.3.3 固定CO2反应参与调控光系统修复过程 | 第38-40页 |
1.3.4 非生物胁迫加剧光抑制的机理 | 第40-41页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第41-42页 |
2 材料与方法 | 第42-63页 |
2.1 实验材料 | 第42-44页 |
2.1.1 植物材料 | 第42页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第42页 |
2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第42页 |
2.1.4 引物 | 第42-44页 |
2.2 实验方法 | 第44-62页 |
2.2.1 利用CTAB法植物基因组的提取 | 第45页 |
2.2.2 RNA的提取 | 第45-47页 |
2.2.2.1 利用TRIzol法提取RNA | 第45页 |
2.2.2.2 利用植物总RNA提取试剂盒(离心柱型)提取RNA | 第45-46页 |
2.2.2.3 RNA中基因组DNA的去除 | 第46页 |
2.2.2.4 RNA反转录 | 第46-47页 |
2.2.3 载体构建 | 第47-49页 |
2.2.3.1 目的DNA片段的获得 | 第47页 |
2.2.3.2 DNA片段的回收(试剂盒法) | 第47-48页 |
2.2.3.3 平末端片段加尾 | 第48页 |
2.2.3.4 目的DNA片段与克隆载体的连接反应 | 第48页 |
2.2.3.5 重组质粒的酶切反应 | 第48-49页 |
2.2.3.6 酶切片段与表达载体的连接反应 | 第49页 |
2.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第49-50页 |
2.2.4.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第49页 |
2.2.4.2 大肠杆菌细胞的转化 | 第49-50页 |
2.2.4.3 菌液PCR方法筛选重组质粒 | 第50页 |
2.2.5 质粒DNA的提取 | 第50-52页 |
2.2.5.1 小量碱法质粒DNA的提取 | 第50-51页 |
2.2.5.2 大量法质粒DNA的提取 | 第51-52页 |
2.2.6 植物表达载体的农杆菌转化 | 第52页 |
2.2.6.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第52页 |
2.2.6.2 冻融法转化农杆菌 | 第52页 |
2.2.7 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第52页 |
2.2.8 免疫印迹 | 第52-57页 |
2.2.8.1 植物蛋白的提取 | 第53页 |
2.2.8.2 蛋白质浓度检测 | 第53-54页 |
2.2.8.3 试剂配制 | 第54-55页 |
2.2.8.4 蛋白质凝胶电泳 | 第55页 |
2.2.8.5 半干法蛋白转移 | 第55-56页 |
2.2.8.6 免疫化学发光法检测蛋白含量 | 第56-57页 |
2.2.9 GUS分析 | 第57-58页 |
2.2.9.1 转基因植物的GUS组织化学染色分析 | 第57页 |
2.2.9.2 GUS活性的测定 | 第57-58页 |
2.2.10 原生质体的制备 | 第58-59页 |
2.2.11 Confocal 510Meta观察原生质体中GFP定位 | 第59-60页 |
2.2.12 拟南芥叶绿体的提取 | 第60-61页 |
2.2.12.1 制备Percoll浓度梯度 | 第60页 |
2.2.12.2 叶绿体的提取 | 第60-61页 |
2.2.13 类囊体膜的提取 | 第61-62页 |
2.2.14 植物体内离子含量的测定 | 第62页 |
2.3 网络资源 | 第62-63页 |
3 结果与分析 | 第63-93页 |
3.1 盐胁迫引发植物质体向核的反向调控信号 | 第63-65页 |
3.2 利用图位克隆技术分离yl1目的基因 | 第65-68页 |
3.3 YL1基因表达模式分析 | 第68-71页 |
3.4 YL1蛋白亚细胞定位分析 | 第71-73页 |
3.5 YL1在盐胁迫引发的植物质体向核的反向调控信号中起重要作用 | 第73-75页 |
3.6 YL1突变体对盐胁迫信号表现为超敏感表型 | 第75-79页 |
3.7 盐胁迫处理条件下YL1功能缺失会引起叶片钠离子积累 | 第79-81页 |
3.8 yl1-1突变体叶片的Na~+积累与ABI4和HKT1的表达水平密切相关 | 第81-83页 |
3.9 ABI4和GUN1参与YL1功能缺失引起的retrograde信号通路 | 第83-86页 |
3.10 质体基因表达缺陷信号通过调控HKT1的表达来参与植物对盐胁迫的响应 | 第86-90页 |
3.11 质体PEP活性不参与盐胁迫引发的质体基因表达缺陷信号 | 第90-93页 |
4 讨论 | 第93-98页 |
5 结论 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第117页 |