摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
英文缩略词表 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-22页 |
1. 研究背景 | 第15页 |
2. 研究现状 | 第15-22页 |
2.1 创伤性神经瘤的形成机制 | 第15-16页 |
2.2 创伤性神经瘤的分类 | 第16页 |
2.2.1 神经不完全损伤性神经瘤 | 第16页 |
2.2.2 神经完全离断性神经瘤 | 第16页 |
2.3 创伤性神经瘤的临床表现 | 第16页 |
2.4 创伤性神经瘤产生疼痛的可能机理 | 第16-18页 |
2.4.1 部位因素 | 第16-17页 |
2.4.2 纤维分离学说 | 第17页 |
2.4.3 NGF 与神经瘤性疼痛 | 第17页 |
2.4.4 α-平滑肌肌动蛋白与神经瘤性疼痛 | 第17-18页 |
2.5 创伤性神经瘤的防治 | 第18-20页 |
2.5.1 预防 | 第18页 |
2.5.2 非手术治疗 | 第18-19页 |
2.5.3 手术治疗 | 第19-20页 |
2.5.3.1 神经残端骨内植入术 | 第19页 |
2.5.3.2 残端神经肌内植入术 | 第19页 |
2.5.3.3 神经残端端-端直接吻合术或自体神经移植端端吻合术 | 第19页 |
2.5.3.4 神经套管法(Nerve capping technique) | 第19-20页 |
2.6 取向纳米纤维神经导管在预防创伤性神经瘤方面的潜在价值 | 第20-21页 |
2.7 总结 | 第21-22页 |
第二章 含丝素蛋白的取向与无规纳米纤维支架的制备与生物学检测 | 第22-42页 |
1 引言 | 第22-23页 |
2 实验材料 | 第23-26页 |
2.1 主要试剂 | 第23-24页 |
2.2 主要仪器 | 第24-25页 |
2.3 所用溶液及缓冲液配置 | 第25-26页 |
3 实验方法 | 第26-34页 |
3.1 静电纺纳米纤维支架的制备 | 第26-27页 |
3.1.1 再生丝素的提取 | 第26页 |
3.1.2 纺丝液的配制 | 第26页 |
3.1.3 静电纺纳米纤维的制备 | 第26-27页 |
3.2 材料处理 | 第27页 |
3.3 细胞培养 | 第27-28页 |
3.3.1 复苏细胞 | 第27-28页 |
3.3.2 消化细胞 | 第28页 |
3.3.3 细胞种植 | 第28页 |
3.4 细胞微观形态观察 | 第28页 |
3.5 细胞成熟度检测 | 第28-31页 |
3.6 细胞因子(NGF, TGF-β1 及 BDNF)表达水平的检测 | 第31-34页 |
3.7 统计分析 | 第34页 |
4 实验结果 | 第34-38页 |
4.1 细胞微观形态观察结果 | 第34-35页 |
4.2 髓鞘相关基因的表达结果 | 第35-36页 |
4.3 细胞因子表达水平的检测结果 | 第36-38页 |
5. 讨论 | 第38-41页 |
5.1 纳米纤维形貌特征对细胞生理学行为的影响 | 第38-39页 |
5.2 SF/ P(LLA-CL)纳米纤维的材料特性 | 第39-40页 |
5.3 NGF, BDNF 及 TGF-β1 的生理学作用 | 第40-41页 |
6. 本章小结 | 第41-42页 |
第三章 不同纳米纤维神经导管预防创伤性神经瘤形成的对比实验研究 | 第42-73页 |
1. 引言 | 第42-43页 |
2. 实验材料 | 第43-45页 |
2.1 实验动物 | 第43页 |
2.2 实验试剂及材料 | 第43-44页 |
2.3 实验仪器 | 第44-45页 |
3. 实验方法 | 第45-54页 |
3.1 取向及非取向纳米纤维神经导管的制备 | 第45-46页 |
3.2 实验动物及分组 | 第46页 |
3.3 手术方法 | 第46-47页 |
3.4 动物处死时间点及标本处理 | 第47-48页 |
3.5 大鼠的自嗜评分分析 | 第48页 |
3.6 术后大体形态学观察 | 第48页 |
3.7 神经瘤增长情况的定量分析 | 第48-49页 |
3.8 组织学观察 | 第49-51页 |
3.9 Western Blot 蛋白含量测定 | 第51-53页 |
3.10 透射电镜观察 | 第53页 |
3.11 统计学分析 | 第53-54页 |
4. 结果 | 第54-70页 |
4.1 自嗜评分 | 第54-55页 |
4.2 神经瘤大体观察 | 第55-56页 |
4.3 神经瘤的增长情况 | 第56-57页 |
4.4 组织学观察结果 | 第57-65页 |
4.5 相关蛋白的 Western blot 测定结果 | 第65-67页 |
4.6 电镜观察结果 | 第67-70页 |
5. 讨论 | 第70-72页 |
6. 本章小结 | 第72-73页 |
第四章 取向纳米纤维神经导管预防创伤性神经瘤的形成及其疼痛产生的机制研究 | 第73-99页 |
1. 引言 | 第73-74页 |
2. 实验材料 | 第74-76页 |
2.1 实验动物 | 第74页 |
2.2 实验试剂及材料 | 第74-75页 |
2.3 实验仪器 | 第75-76页 |
3. 实验方法 | 第76-80页 |
3.1 取向及非取向纳米纤维神经导管的制备 | 第76页 |
3.2 实验动物及分组 | 第76-77页 |
3.3 手术方法 | 第77页 |
3.4 动物处死时间点及标本处理 | 第77页 |
3.5 大鼠的自嗜评分分析 | 第77页 |
3.6 神经瘤增长情况的定量分析 | 第77-78页 |
3.7 组织学观察 | 第78页 |
3.8 髓鞘相关基因表达水平的 qRT-PCR 测定 | 第78-79页 |
3.9 胶原 Ⅰ、Ⅲ 、α-SMA、NGF、TGF-β1、Substance P 及 c-fos 等蛋白表达水平的 Western blot 检测 | 第79页 |
3.10 透射电镜观察 | 第79-80页 |
3.11 统计学分析 | 第80页 |
4. 结果 | 第80-94页 |
4.1 自嗜评分 | 第80-81页 |
4.2 神经瘤的增长情况 | 第81-82页 |
4.3 神经瘤的大体观察及组织学研究 | 第82-85页 |
4.4 qRT-PCR 测定结果 | 第85-87页 |
4.5 Western blot 检测结果 | 第87-91页 |
4.5.1 神经瘤中 NGF 的蛋白表达水平测定结果 | 第87-88页 |
4.5.2 神经瘤中 TGF-β1 的蛋白表达水平测定结果 | 第88-89页 |
4.5.3 神经瘤中胶原蛋白 Ⅰ, Ⅲ 的表达水平测定结果 | 第89-90页 |
4.5.4 疼痛相关蛋白 c-fos 及 Substance P 的测定结果 | 第90-91页 |
4.6 电镜观察结果 | 第91-94页 |
5. 讨论 | 第94-98页 |
5.1 取向纳米纤维神经导管预防创伤性神经瘤形成的可能机制 | 第94-96页 |
5.2 取向纳米纤维神经导管预防创伤性神经瘤疼痛发生的可能机制 | 第96-98页 |
6. 本章小结 | 第98-99页 |
第五章 全文总结和展望 | 第99-102页 |
1.全文总结 | 第99-100页 |
2.本课题的创新点 | 第100-101页 |
3. 今后工作展望 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-115页 |
致谢 | 第115-117页 |
攻读博士学位期间发表的论文和其他相关成果 | 第117-120页 |