| 英汉缩略词对照表 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 1、肿瘤干细胞与肿瘤异质性 | 第11页 |
| 1.1 肿瘤干细胞的概念 | 第11页 |
| 1.2 肿瘤干细胞与肿瘤异质性的关系 | 第11页 |
| 2、肿瘤干性因子SALL4的发现及其生物学功能 | 第11-12页 |
| 2.1 SALL4的发现 | 第11-12页 |
| 2.2 SALL4表达对肝癌预后的影响 | 第12页 |
| 3、SALL4与Ku80相互结合的新生物学功能 | 第12-13页 |
| 3.1 SALL4与Ku80相互作用的发现 | 第12-13页 |
| 3.2 SALL4与Ku80结合的潜在生物学功能 | 第13页 |
| 4、本文研究的目的和科学意义 | 第13-14页 |
| 材料与方法 | 第14-36页 |
| 1、材料 | 第14-19页 |
| 1.1 细胞株 | 第14页 |
| 1.2 主要试剂和耗材 | 第14-16页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第16-17页 |
| 1.4 主要溶液及配置 | 第17-19页 |
| 2、方法 | 第19-36页 |
| 2.1 感受态细胞的制备 | 第19页 |
| 2.2 质粒构建 | 第19-25页 |
| 2.3 细胞培养 | 第25-26页 |
| 2.4 质粒转染 | 第26-27页 |
| 2.5 细胞总蛋白提取 | 第27页 |
| 2.6 BCA法测定蛋白浓度 | 第27页 |
| 2.7 免疫共沉淀(Co-IP) | 第27-28页 |
| 2.8 Western blot | 第28-30页 |
| 2.9 免疫荧光染色和观察 | 第30-31页 |
| 2.10 成球实验 | 第31页 |
| 2.11 Transwell实验 | 第31-32页 |
| 2.12 划痕实验 | 第32页 |
| 2.13 总RNA提取 | 第32-33页 |
| 2.14 RT-PCR | 第33-34页 |
| 2.15 Real-Time PCR | 第34-36页 |
| 结果 | 第36-49页 |
| 1、SALL4与Ku80相互结合验证 | 第36-37页 |
| 1.1 SALL4与Ku80蛋白结合验证 | 第36-37页 |
| 1.2 SALL4与Ku80蛋白的共定位 | 第37页 |
| 2、SALL4与Ku80结合区域分析 | 第37-42页 |
| 2.1 缺失片段扩增及双酶切 | 第38页 |
| 2.2 重组质粒双酶切鉴定 | 第38-39页 |
| 2.3 SALL4-Ku80缺失突变体结合验证 | 第39-41页 |
| 2.4 Ku80-SALL4缺失突变体结合验证 | 第41-42页 |
| 3、Ku80调控肝癌细胞干性的行为学研究 | 第42-45页 |
| 3.1 Ku80抑制肝癌细胞干性 | 第42-43页 |
| 3.2 Ku80对干性基因表达影响 | 第43-44页 |
| 3.3 Ku80抑制肝癌细胞的迁移和侵袭 | 第44-45页 |
| 4、Ku80调控肝癌细胞干性的分子机制 | 第45-49页 |
| 4.1 Ku80下调OCT4蛋白水平 | 第45-46页 |
| 4.2 OCT4降解途径 | 第46页 |
| 4.3 Ku80竞争抑制SALL4与OCT4结合 | 第46-47页 |
| 4.4 Ku80下调OCT4依赖于其与SALL4的结合 | 第47-48页 |
| 4.5 Ku80诱导OCT4出核降解 | 第48-49页 |
| 讨论 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |