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高表达Sirt2人脐带间充质干细胞移植对APP~+鼠的抗衰老作用及机制研究

摘要第4-7页
Abstract第7-9页
英文缩略表第13-14页
引言第14-17页
第一部分:高表达 Sirt2 基因重组腺病毒的构建第17-38页
    前言第17-18页
    1 材料与方法第18-31页
        1.1 细胞与引物第18页
        1.2 质粒与菌株第18页
        1.3 主要试剂第18-19页
        1.4 主要试剂的配制第19-20页
        1.5 hUC-MSCs 的复苏与培养第20-21页
        1.6 实时荧光定量 PCR 检测 P2、P15 代细胞 Sirt2 基因表达差异第21-23页
        1.7 RT-PCR 扩增人 Sirt2 基因全序列第23-24页
        1.8 重组腺病毒穿梭载体 pAdTrack-CMV-Sirt2 的构建第24-26页
        1.9 重组腺病毒 pAd-Sirt2 的构建、包装与扩增第26-31页
    2 结果第31-36页
        2.1 实时荧光定量 PCR 检测 P2 和 P15 代细胞 Sirt2 基因表达差异第31页
        2.2 RT-PCR 扩增人 Sirt2 基因全序列第31-32页
        2.3 重组腺病毒穿梭载体 pAdTrack-CMV-Sirt2 的构建第32-33页
        2.4 重组腺病毒 pAd-Sirt2 的构建、包装与扩增第33-36页
    3 讨论第36-37页
    4 小结第37-38页
第二部分 高表达 Sirt2 对间充质干细胞增殖和衰老的影响第38-47页
    前言第38页
    1 材料与方法第38-43页
        1.1 细胞与病毒第38页
        1.2 主要试剂第38-39页
        1.3 主要试剂的配制第39-40页
        1.4 pAd-Sirt2 重组腺病毒感染 hUC-MSCs第40-41页
        1.5 CCK-8 法检测 pAd-Sirt2 对 hUC-MSCs 细胞增殖的影响第41页
        1.6 流式细胞术检测 hUC-MSCs 感染 pAd-Sirt2 后细胞周期变化第41页
        1.7 Western Blot 检测 hUC-MSCs 感染 pAd-Sirt2 后相关基因表达第41-43页
    2 结果第43-45页
        2.1 重组腺病毒 pAd-Sirt2 感染 hUC-MSCs第43页
        2.2 hUC-MSCs 感染 pAd-Sirt2 后细胞生长曲线测定第43-44页
        2.3 流式细胞术检测 hUC-MSCs 感染 pAd-Sirt2 后细胞周期变化第44-45页
        2.4 Western Blot 检测 hUC-MSCs 感染 pAd-Sirt2 后衰老相关基因表达第45页
    3 讨论第45-46页
    小结第46-47页
第三部分 高表达 Sirt2 hUC-MSCs 静脉移植 APP~+转基因鼠的抗衰老 作用及机制研究第47-59页
    前言第47-48页
    1 材料与方法第48-53页
        1.1 细胞与动物来源第48页
        1.2 主要试剂第48-49页
        1.3 主要试剂及其配制第49-50页
        1.4 APP 转基因鼠的鉴定、分组及细胞移植第50页
        1.5 Morris 水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力第50-51页
        1.6 检测各组小鼠血清中 SOD 活性与 MDA 含量第51页
        1.7 Real-Time PCR 检测各组小鼠组织中衰老相关基因 mRNA 的表达变化第51-52页
        1.8 Western Blot 检测各组小鼠组织中衰老相关 Marker 蛋白的表达变化第52页
        1.9 统计处理第52-53页
    2 结果第53-56页
        2.1 APP~+转基因小鼠的鉴定第53页
        2.2 APP~+转基因小鼠学习记忆能力检测第53-54页
        2.3 检测各组小鼠血清中 SOD 活性与 MDA 含量第54页
        2.4 Real-Time PCR 检测两组小鼠各组织中衰老相关基因 mRNA 表达变化第54-55页
        2.5 Western Blot 检测两组小鼠各组织中衰老相关 Marker 蛋白表达变化第55-56页
    3 讨论第56-58页
    小结第58-59页
结论第59-60页
参考文献第60-63页
综述 SIRT 基因与细胞衰老第63-73页
    参考文献第71-73页
个人简历第73页
硕士期间发表论文及获奖情况第73-74页
附录第74-76页
致谢第76页

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