摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
引言 | 第14-17页 |
第一部分:高表达 Sirt2 基因重组腺病毒的构建 | 第17-38页 |
前言 | 第17-18页 |
1 材料与方法 | 第18-31页 |
1.1 细胞与引物 | 第18页 |
1.2 质粒与菌株 | 第18页 |
1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第19-20页 |
1.5 hUC-MSCs 的复苏与培养 | 第20-21页 |
1.6 实时荧光定量 PCR 检测 P2、P15 代细胞 Sirt2 基因表达差异 | 第21-23页 |
1.7 RT-PCR 扩增人 Sirt2 基因全序列 | 第23-24页 |
1.8 重组腺病毒穿梭载体 pAdTrack-CMV-Sirt2 的构建 | 第24-26页 |
1.9 重组腺病毒 pAd-Sirt2 的构建、包装与扩增 | 第26-31页 |
2 结果 | 第31-36页 |
2.1 实时荧光定量 PCR 检测 P2 和 P15 代细胞 Sirt2 基因表达差异 | 第31页 |
2.2 RT-PCR 扩增人 Sirt2 基因全序列 | 第31-32页 |
2.3 重组腺病毒穿梭载体 pAdTrack-CMV-Sirt2 的构建 | 第32-33页 |
2.4 重组腺病毒 pAd-Sirt2 的构建、包装与扩增 | 第33-36页 |
3 讨论 | 第36-37页 |
4 小结 | 第37-38页 |
第二部分 高表达 Sirt2 对间充质干细胞增殖和衰老的影响 | 第38-47页 |
前言 | 第38页 |
1 材料与方法 | 第38-43页 |
1.1 细胞与病毒 | 第38页 |
1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第39-40页 |
1.4 pAd-Sirt2 重组腺病毒感染 hUC-MSCs | 第40-41页 |
1.5 CCK-8 法检测 pAd-Sirt2 对 hUC-MSCs 细胞增殖的影响 | 第41页 |
1.6 流式细胞术检测 hUC-MSCs 感染 pAd-Sirt2 后细胞周期变化 | 第41页 |
1.7 Western Blot 检测 hUC-MSCs 感染 pAd-Sirt2 后相关基因表达 | 第41-43页 |
2 结果 | 第43-45页 |
2.1 重组腺病毒 pAd-Sirt2 感染 hUC-MSCs | 第43页 |
2.2 hUC-MSCs 感染 pAd-Sirt2 后细胞生长曲线测定 | 第43-44页 |
2.3 流式细胞术检测 hUC-MSCs 感染 pAd-Sirt2 后细胞周期变化 | 第44-45页 |
2.4 Western Blot 检测 hUC-MSCs 感染 pAd-Sirt2 后衰老相关基因表达 | 第45页 |
3 讨论 | 第45-46页 |
小结 | 第46-47页 |
第三部分 高表达 Sirt2 hUC-MSCs 静脉移植 APP~+转基因鼠的抗衰老 作用及机制研究 | 第47-59页 |
前言 | 第47-48页 |
1 材料与方法 | 第48-53页 |
1.1 细胞与动物来源 | 第48页 |
1.2 主要试剂 | 第48-49页 |
1.3 主要试剂及其配制 | 第49-50页 |
1.4 APP 转基因鼠的鉴定、分组及细胞移植 | 第50页 |
1.5 Morris 水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力 | 第50-51页 |
1.6 检测各组小鼠血清中 SOD 活性与 MDA 含量 | 第51页 |
1.7 Real-Time PCR 检测各组小鼠组织中衰老相关基因 mRNA 的表达变化 | 第51-52页 |
1.8 Western Blot 检测各组小鼠组织中衰老相关 Marker 蛋白的表达变化 | 第52页 |
1.9 统计处理 | 第52-53页 |
2 结果 | 第53-56页 |
2.1 APP~+转基因小鼠的鉴定 | 第53页 |
2.2 APP~+转基因小鼠学习记忆能力检测 | 第53-54页 |
2.3 检测各组小鼠血清中 SOD 活性与 MDA 含量 | 第54页 |
2.4 Real-Time PCR 检测两组小鼠各组织中衰老相关基因 mRNA 表达变化 | 第54-55页 |
2.5 Western Blot 检测两组小鼠各组织中衰老相关 Marker 蛋白表达变化 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
小结 | 第58-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-63页 |
综述 SIRT 基因与细胞衰老 | 第63-73页 |
参考文献 | 第71-73页 |
个人简历 | 第73页 |
硕士期间发表论文及获奖情况 | 第73-74页 |
附录 | 第74-76页 |
致谢 | 第76页 |