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硫醚单加氧酶产生菌的筛选及其应用方法研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 文献综述第14-33页
   ·手性化合物简介第14-15页
   ·手性亚砜类化合物第15-17页
     ·手性亚砜化合物简介第15-16页
     ·手性亚砜的用途第16-17页
   ·化学法催化手性亚砜的合成第17-18页
   ·生物法催化手性亚砜的合成第18-31页
     ·硫醚氧化酶及其来源第18-21页
     ·酶催化硫醚的不对称氧第21-26页
     ·整细胞催化硫醚的不对称氧第26-29页
     ·生物催化的亚砜拆分第29-30页
     ·生物法催化硫醚氧化的应用第30-31页
   ·本课题的主要研究目的及意义第31页
   ·本论文的研究思路及内容提要第31-33页
第二章 硫醚单加氧酶产生菌的筛选第33-46页
   ·前言第33页
   ·筛选模型第33-34页
   ·材料和方法第34-38页
     ·主要实验试剂第34-35页
     ·主要仪器和设备第35页
     ·材料第35-36页
     ·培养条件第36页
     ·筛选方法第36-37页
     ·分析方法第37页
     ·菌株形态特征的观察第37页
     ·16S rDNA测序鉴定第37-38页
     ·序列比对与分析第38页
   ·结果与讨论第38-44页
     ·筛选方法的比较第38-39页
     ·初筛结果第39页
     ·复筛结果第39-40页
     ·菌株ECU0066催化苯甲硫醚的氧化机制第40-41页
     ·菌株ECU0066的菌落特征第41-42页
     ·菌株ECU0066的16S rDNA鉴定结果第42-44页
   ·本章小结第44-46页
第三章 红球菌ECU0066催化前手性硫醚不对称氧化的过程分析第46-64页
   ·前言第46-47页
   ·材料和方法第47-50页
     ·试剂和仪器第47页
     ·菌液浊度(OD_(600))-菌体干重(DCW)曲线的测定第47-48页
     ·红球菌ECU0066发酵产酶进程曲线的测定第48页
     ·酶的诱导和菌体ECU0066静息细胞的制备第48页
     ·酶活的测定第48页
     ·红球菌ECU0066中硫醚单加氧酶位置和辅酶依赖型第48页
     ·温度对反应的影响第48-49页
     ·pH对反应的影响第49页
     ·红球菌ECU0066静息细胞催化底物硫醚氧化制备手性亚砜第49页
     ·奥美拉唑前体的化学合成第49页
     ·奥美拉唑前体化合物的生物转化第49-50页
   ·结果和讨论第50-61页
     ·苯甲亚砜的标准曲线第50页
     ·OD_(600)-DCW曲线第50-51页
     ·红球菌ECU0066的发酵产酶进程第51页
     ·酶的诱导第51-52页
     ·红球菌ECU0066细胞中硫醚单加氧酶位置及其辅酶依赖型的测定第52-54页
     ·温度和pH对红球菌ECU0066催化硫醚不对称氧化反应的影响第54-55页
     ·红球菌ECU0066底物耐受性第55-57页
     ·辅底物的添加对红球菌ECU0066催化硫醚氧化反应的影响第57-59页
     ·红球菌ECU0066催化不同硫醚的不对称氧化第59-61页
     ·奥美拉唑的化学-酶法合成第61页
   ·生物合成的手性亚砜化合物的波谱分析第61-63页
   ·本章小结第63-64页
第四章 红球菌催化硫醚氧化过程中底物毒性的缓解方法第64-87页
   ·前言第64-65页
   ·材料和方法第65-68页
     ·试剂和仪器第65页
     ·菌株及培养第65页
     ·海藻酸钙固定化细胞的制备第65-66页
     ·固定化细胞催化苯甲硫醚的不对称氧化第66-67页
     ·水-有机溶剂两相体系中红球菌催化苯甲硫醚的不对称氧化第67-68页
     ·利用生长细胞在水-异辛烷体系中催化苯甲硫醚氧化反应的放大第68页
   ·结果和讨论第68-86页
     ·海藻酸钙包埋红球菌细胞的反应第68-73页
     ·两相体系的反应第73-74页
     ·有机溶剂的选择第74-76页
     ·水-异辛烷两相体系反应条件的优化第76-83页
     ·通气和不通气的条件下红球菌整细胞催化苯甲硫醚的不对称氧化第83-84页
     ·生长细胞催化苯甲硫醚不对称氧化反应的放大第84-86页
   ·本章小结第86-87页
第五章 红球菌ECU0066催化外消旋亚砜动力学拆分过程的研究第87-104页
   ·前言第87-88页
   ·材料与方法第88-90页
     ·试剂第88页
     ·菌株及培养第88页
     ·细胞中(R)-苯甲亚砜氧化活力的测定第88页
     ·温度和pH对反应的影响第88页
     ·不同浓度苯甲硫醚或苯甲亚砜对红球菌细胞毒性的测定第88页
     ·红球菌细胞催化反应的表观动力学参数的测定第88页
     ·红球菌细胞催化拆分苯甲亚砜第88-89页
     ·红球菌细胞催化拆分亚砜的底物谱第89页
     ·利用生长的细胞制备光学纯手性亚砜第89页
     ·生长细胞催化苯甲亚砜拆分反应的放大第89页
     ·分析方法第89-90页
   ·结果和讨论第90-102页
     ·不同浓度苯甲硫醚或苯甲亚砜对细胞的毒性第90-92页
     ·红球菌细胞催化苯甲硫醚氧化和苯甲亚砜拆分反应的动力学参数比较第92-95页
     ·温度和pH对苯甲亚砜拆分反应的影响第95-97页
     ·红球菌细胞催化拆分苯甲亚砜及分批补料反应第97-98页
     ·红球菌细胞催化拆分亚砜的底物谱第98-99页
     ·红球菌生长细胞催化拆分亚砜制备手性亚砜和砜第99-101页
     ·红球菌生长细胞催化苯甲亚砜拆分反应的放大第101-102页
   ·本章小结第102-104页
结论和展望第104-107页
参考文献第107-122页
附录第122-130页
攻读博士期间撰写的论文和专利第130-131页
致谢第131-132页
卷内备考表第132页

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