中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
目录 | 第7-10页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-26页 |
1 幼畜体外胚胎生产和移植技术 | 第11-15页 |
1.1 幼畜超数排卵 | 第11页 |
1.2 卵母细胞体外成熟 | 第11-12页 |
1.3 体外受精 | 第12-15页 |
1.3.1 精子体外获能(In Vitro Capacitation)及机制 | 第12-14页 |
1.3.2 受精 | 第14-15页 |
1.4 体外胚胎培养 | 第15页 |
2 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG) | 第15-16页 |
2.1 EGCG概述 | 第15页 |
2.2 EGCG抗氧化作用 | 第15-16页 |
2.3 EGCG在胚胎体外生产中的应用 | 第16页 |
3 OCT-4、GDF-9、Bcl-2基因相关研究 | 第16-19页 |
3.1 OCT-4基因 | 第17页 |
3.2 GDF9基因 | 第17-18页 |
3.3 Bcl2基因 | 第18-19页 |
4 本次研究的目的与意义 | 第19-20页 |
参考文献 | 第20-26页 |
第二章 EGCG对新西兰兔卵母细胞体外受精的影响 | 第26-39页 |
1 试验材料 | 第26-28页 |
1.1 试验动物 | 第26页 |
1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
1.3 主要仪器 | 第27页 |
1.4 器材的准备 | 第27页 |
1.4.1 玻璃器皿的准备 | 第27页 |
1.4.2 手术器械的准备 | 第27页 |
1.4.3 橡胶塞的处理 | 第27页 |
1.5 主要溶液配置 | 第27-28页 |
2 试验方法 | 第28-31页 |
2.1 试验安排 | 第28-29页 |
2.2 试验内容 | 第29-30页 |
2.2.1 超数排卵处理方法 | 第29页 |
2.2.2 卵母细胞获取 | 第29页 |
2.2.3 卵母细胞体外成熟 | 第29页 |
2.2.4 卵母细胞体外受精 | 第29-30页 |
2.2.5 精子获能评价 | 第30页 |
2.3 数据分析 | 第30-31页 |
3 试验结果 | 第31-34页 |
3.1 添加不同浓度EGCG对精子获能后顶体反应的影响 | 第31-32页 |
3.2 不同浓度EGCG对幼龄兔卵母细胞体外受精的影响 | 第32-33页 |
3.3 不同浓度EGCG对成兔卵母细胞体外受精的影响 | 第33页 |
3.4 幼龄兔与成年兔卵母细胞体外受精效果比较 | 第33-34页 |
4 分析与讨论 | 第34-37页 |
4.1 EGCG对精子获能的影响 | 第34页 |
4.2 EGCG在体外受精中的作用 | 第34-35页 |
4.3 幼龄兔与成年兔卵母细胞体外受精效果比较 | 第35-37页 |
参考文献 | 第37-39页 |
第三章 OCT-4、GDF-9、Bcl-2基因在新西兰成年和幼龄兔胚胎中的差异表达研究 | 第39-51页 |
1 试验材料与方法 | 第39-40页 |
1.1 试验材料 | 第39页 |
1.2 试验试剂 | 第39页 |
1.3 试验仪器 | 第39页 |
1.4 溶液配制 | 第39-40页 |
2 试验方法 | 第40-43页 |
2.1 胚胎选择 | 第40页 |
2.2 总RNA提取 | 第40页 |
2.3 反转录 | 第40-41页 |
2.4 OCT-4、GDF-9、Bcl-2基因PCR扩增 | 第41-42页 |
2.5 实时荧光定量PCR | 第42-43页 |
2.6 统计分析 | 第43页 |
3 结果与分析 | 第43-46页 |
3.1 总RNA的检测 | 第43页 |
3.2 目的基因的扩增 | 第43-44页 |
3.3 实时荧光定量PCR产物的特异性检测 | 第44-45页 |
3.4 基因扩增效率一致性的判定 | 第45-46页 |
3.5 OCT-4、GDF-9、Bcl-2基因在幼龄和成年兔胚胎中相对表达变化 | 第46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
4.1 OCT-4基因表达分析 | 第46-47页 |
4.2 GDF-9基因表达分析 | 第47-48页 |
4.3 Bcl-2基因表达分析 | 第48页 |
4.4 幼龄兔与成年兔基因表达量差异分析 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
攻读硕士期间发表论文及获得专利情况 | 第53-54页 |