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蒙古沙冬青AmDREB2C和AmAtpD基因的克隆与功能分析

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
縮略语表第11-12页
1 引言第12-19页
    1.1 植物响应逆境胁迫的一般分子机制第12-15页
        1.1.1 植物对低温胁迫的响应第12-13页
        1.1.2 植物对高温胁迫的响应第13页
        1.1.3 植物对干旱胁迫的响应第13-14页
        1.1.4 植物对高盐胁迫的响应第14-15页
    1.2 DREB转录因子与植物抗逆性第15-16页
        1.2.1 DREB转录因子及其分类第15页
        1.2.2 DREB基因的克隆及抗逆相关研究第15-16页
        1.2.3 DREB参与的信号转导途径第16页
    1.3 ATP合酶及其研究进展第16-18页
        1.3.1 ATP合酶的组成第16-17页
        1.3.2 ATP合酶δ亚基相关研究第17-18页
        1.3.3 ATP合酶与抗逆性第18页
    1.4 沙冬青抗逆性研究进展第18-19页
    1.5 本研究的目的及意义第19页
2 材料与方法第19-28页
    2.1 实验材料第19-20页
        2.1.1 实验材料第19页
        2.1.2 菌株和载体第19页
        2.1.3 试剂及酶第19页
        2.1.4 缓冲液及主要试剂配制第19-20页
        2.1.5 本实验相关引物第20页
    2.2 实验方法第20-28页
        2.2.1 蒙古沙冬青幼苗胁迫处理第20-21页
        2.2.2 Trizol法提取总RNA第21页
        2.2.3 纯化总RNA第21-22页
        2.2.4 转录组测序及表达谱获取第22页
        2.2.5 cDNA的合成第22-23页
        2.2.6 基因组DNA的提取(SDS法)第23页
        2.2.7 基因克隆与测序第23-24页
        2.2.8 序列分析第24-25页
        2.2.9 半定量RT-PCR分析第25页
        2.2.10 植物表达载体构建第25-26页
        2.2.11 转化野生型拟南芥第26-27页
        2.2.12 转基因植株的筛选、繁殖与检测第27-28页
        2.2.13 转基因拟南芥的抗性鉴定第28页
3 结果与分析第28-46页
    3.1 总RNA的提取及电泳检测第28页
    3.2 AmDREB2C基因的克隆与序列分析第28-33页
        3.2.1 AmDREB2C基因序列的获取第28-29页
        3.2.2 AmDREB2C基因的克隆与内含子分析第29-31页
        3.2.3 AmDREB2C在不同胁迫处理下的表达变化第31页
        3.2.4 AmDREB2C蛋白序列分析第31-33页
    3.3 AmDREB2C植物表达载体构建及其转化拟南芥第33-36页
        3.3.1 AmDREB2C植物表达载体构建第33-34页
        3.3.2 AmDREB2C植物表达载体转化农杆菌第34页
        3.3.3 AAmDREB2C转基因拟南芥的筛选与鉴定第34-36页
    3.4 AmDREB2C转基因株系抗逆性鉴定第36-41页
        3.4.1 转基因株系生长发育观察第36页
        3.4.2 转基因株系在低温胁迫下的表型鉴定第36-37页
        3.4.3 转基因株系在高温胁迫下的表型鉴定第37-38页
        3.4.4 转基因株系在干旱胁迫下的表型鉴定第38-39页
        3.4.5 转基因株系在盐胁迫下的表型鉴定第39-40页
        3.4.6 转基因株系对外源ABA的敏感性第40-41页
    3.5 AmAtpD基因克隆与序列分析第41-46页
        3.5.1 AmAtpD基因序列获取第41页
        3.5.2 AmAtpD基因克隆与内含子分析第41-43页
        3.5.3 AmAtpD在不同胁迫处理下的表达变化第43页
        3.5.4 AmAtpD蛋白序列分析及亚细胞定位第43-45页
        3.5.5 AmAtpD植物表达载体构建及转化拟南芥第45-46页
4 讨论第46-48页
    4.1 AmDREB2C具有多种抗逆功能第46-47页
    4.2 AmDREB2C基因没有生长延滞作用第47页
    4.3 AmAtpD参与蒙古沙冬青对低温和干旱胁迫的应答反应第47-48页
5 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-63页
作者简介第63页

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