摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
縮略语表 | 第11-12页 |
1 引言 | 第12-19页 |
1.1 植物响应逆境胁迫的一般分子机制 | 第12-15页 |
1.1.1 植物对低温胁迫的响应 | 第12-13页 |
1.1.2 植物对高温胁迫的响应 | 第13页 |
1.1.3 植物对干旱胁迫的响应 | 第13-14页 |
1.1.4 植物对高盐胁迫的响应 | 第14-15页 |
1.2 DREB转录因子与植物抗逆性 | 第15-16页 |
1.2.1 DREB转录因子及其分类 | 第15页 |
1.2.2 DREB基因的克隆及抗逆相关研究 | 第15-16页 |
1.2.3 DREB参与的信号转导途径 | 第16页 |
1.3 ATP合酶及其研究进展 | 第16-18页 |
1.3.1 ATP合酶的组成 | 第16-17页 |
1.3.2 ATP合酶δ亚基相关研究 | 第17-18页 |
1.3.3 ATP合酶与抗逆性 | 第18页 |
1.4 沙冬青抗逆性研究进展 | 第18-19页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第19页 |
2 材料与方法 | 第19-28页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第19页 |
2.1.3 试剂及酶 | 第19页 |
2.1.4 缓冲液及主要试剂配制 | 第19-20页 |
2.1.5 本实验相关引物 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-28页 |
2.2.1 蒙古沙冬青幼苗胁迫处理 | 第20-21页 |
2.2.2 Trizol法提取总RNA | 第21页 |
2.2.3 纯化总RNA | 第21-22页 |
2.2.4 转录组测序及表达谱获取 | 第22页 |
2.2.5 cDNA的合成 | 第22-23页 |
2.2.6 基因组DNA的提取(SDS法) | 第23页 |
2.2.7 基因克隆与测序 | 第23-24页 |
2.2.8 序列分析 | 第24-25页 |
2.2.9 半定量RT-PCR分析 | 第25页 |
2.2.10 植物表达载体构建 | 第25-26页 |
2.2.11 转化野生型拟南芥 | 第26-27页 |
2.2.12 转基因植株的筛选、繁殖与检测 | 第27-28页 |
2.2.13 转基因拟南芥的抗性鉴定 | 第28页 |
3 结果与分析 | 第28-46页 |
3.1 总RNA的提取及电泳检测 | 第28页 |
3.2 AmDREB2C基因的克隆与序列分析 | 第28-33页 |
3.2.1 AmDREB2C基因序列的获取 | 第28-29页 |
3.2.2 AmDREB2C基因的克隆与内含子分析 | 第29-31页 |
3.2.3 AmDREB2C在不同胁迫处理下的表达变化 | 第31页 |
3.2.4 AmDREB2C蛋白序列分析 | 第31-33页 |
3.3 AmDREB2C植物表达载体构建及其转化拟南芥 | 第33-36页 |
3.3.1 AmDREB2C植物表达载体构建 | 第33-34页 |
3.3.2 AmDREB2C植物表达载体转化农杆菌 | 第34页 |
3.3.3 AAmDREB2C转基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第34-36页 |
3.4 AmDREB2C转基因株系抗逆性鉴定 | 第36-41页 |
3.4.1 转基因株系生长发育观察 | 第36页 |
3.4.2 转基因株系在低温胁迫下的表型鉴定 | 第36-37页 |
3.4.3 转基因株系在高温胁迫下的表型鉴定 | 第37-38页 |
3.4.4 转基因株系在干旱胁迫下的表型鉴定 | 第38-39页 |
3.4.5 转基因株系在盐胁迫下的表型鉴定 | 第39-40页 |
3.4.6 转基因株系对外源ABA的敏感性 | 第40-41页 |
3.5 AmAtpD基因克隆与序列分析 | 第41-46页 |
3.5.1 AmAtpD基因序列获取 | 第41页 |
3.5.2 AmAtpD基因克隆与内含子分析 | 第41-43页 |
3.5.3 AmAtpD在不同胁迫处理下的表达变化 | 第43页 |
3.5.4 AmAtpD蛋白序列分析及亚细胞定位 | 第43-45页 |
3.5.5 AmAtpD植物表达载体构建及转化拟南芥 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
4.1 AmDREB2C具有多种抗逆功能 | 第46-47页 |
4.2 AmDREB2C基因没有生长延滞作用 | 第47页 |
4.3 AmAtpD参与蒙古沙冬青对低温和干旱胁迫的应答反应 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-63页 |
作者简介 | 第63页 |