摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
文献综述 | 第12-21页 |
第一章 贝氏隐孢子虫的生物学特性及隐孢子虫的免疫学研究进展 | 第12-21页 |
1.1 贝氏隐孢子虫概述 | 第12-15页 |
1.1.1 生物学特征 | 第12-14页 |
1.1.1.1 宿主特异性 | 第12-13页 |
1.1.1.2 形态大小 | 第13页 |
1.1.1.3 寄生部位 | 第13-14页 |
1.1.2 流行病学 | 第14-15页 |
1.2 隐孢子虫免疫学研究 | 第15-20页 |
1.2.1 天然免疫 | 第15-17页 |
1.2.1.1 肠上皮细胞(IECs) | 第15-16页 |
1.2.1.2 自然杀伤(NK)细胞和干扰素-γ(IFN-γ) | 第16页 |
1.2.1.3 吞噬细胞和一氧化氮(NO) | 第16-17页 |
1.2.1.4 树突状细胞(DCs) | 第17页 |
1.2.2 获得性免疫 | 第17-20页 |
1.2.2.1 Th1 细胞 | 第18-19页 |
1.2.2.2 Th2 细胞 | 第19-20页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
试验研究 | 第21-45页 |
第二章 贝氏隐孢子虫卵囊的分离 | 第21-25页 |
2.1 材料与方法 | 第21-23页 |
2.1.1 感染用卵囊 | 第21-22页 |
2.1.2 主要仪器设备与试剂 | 第22页 |
2.1.3 试剂溶液配制 | 第22页 |
2.1.4 试验动物及分组 | 第22页 |
2.1.5 感染方法 | 第22页 |
2.1.6 显微镜检查卵囊方法 | 第22页 |
2.1.7 贝氏隐孢子虫卵囊的分离 | 第22-23页 |
2.1.7.1 粪便卵囊检查 | 第22页 |
2.1.7.2 纯卵囊分离 | 第22-23页 |
2.2 结果与分析 | 第23页 |
2.2.1 临床症状 | 第23页 |
2.2.2 粪便中卵囊情况 | 第23页 |
2.2.3 纯卵囊分离 | 第23页 |
2.3 讨论 | 第23-24页 |
2.4 小结 | 第24-25页 |
第三章 贝氏隐孢子虫卵囊的鉴定 | 第25-31页 |
3.1 材料与方法 | 第25-28页 |
3.1.1 样品 | 第25-26页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第26页 |
3.1.3 隐孢子虫形态显微观察 | 第26页 |
3.1.4 隐孢子虫基因组 DNA 提取 | 第26-27页 |
3.1.4.1 隐孢子虫样品处理 | 第26页 |
3.1.4.2 隐孢子虫试剂盒 | 第26页 |
3.1.4.3 隐孢子虫 DNA 提取步骤 | 第26-27页 |
3.1.5 隐孢子虫鉴定 | 第27-28页 |
3.1.5.1 隐孢子虫 SSU rRNA 基因巢式 PCR 扩增 | 第27-28页 |
3.1.5.2 隐孢子虫 SSU rRNA 扩增产物检测 | 第28页 |
3.1.5.3 SSU rRNA 扩增产物测序及种系发育分析 | 第28页 |
3.2 结果与分析 | 第28-29页 |
3.2.1 显微镜观察 | 第28-29页 |
3.2.2 SSU rRNA 基因套式 PCR 扩增结果 | 第29页 |
3.2.3 测序结果及种系发育分析 | 第29页 |
3.3 讨论 | 第29-30页 |
3.4 小结 | 第30-31页 |
第四章 贝氏隐孢子虫感染雏鸡模型的建立 | 第31-37页 |
4.1 材料与方法 | 第32-33页 |
4.1.1 感染用卵囊 | 第32页 |
4.1.2 主要仪器设备与试剂 | 第32页 |
4.1.3 试剂溶液配制 | 第32页 |
4.1.4 纯卵囊扩增 | 第32页 |
4.1.5 贝氏隐孢子虫感染雏鸡模型的建立 | 第32-33页 |
4.1.5.1 试验动物及分组 | 第32-33页 |
4.1.5.2 试验用隐孢子虫卵囊 | 第33页 |
4.1.5.3 感染方法与剂量 | 第33页 |
4.1.5.4 临床症状观察 | 第33页 |
4.1.5.5 排卵囊情况 | 第33页 |
4.2 结果与分析 | 第33-35页 |
4.2.1 卵囊扩增结果 | 第33页 |
4.2.2 临床症状 | 第33-34页 |
4.2.3 排卵囊规律 | 第34-35页 |
4.3 讨论 | 第35-36页 |
4.4 小结 | 第36-37页 |
第五章 鸡 IL-17 及其相关细胞因子在感染贝氏隐孢子虫中的动态变化 | 第37-45页 |
5.1 材料与方法 | 第38-40页 |
5.1.1 感染用卵囊 | 第38页 |
5.1.2 主要仪器设备与试剂 | 第38页 |
5.1.3 试验动物及分组 | 第38页 |
5.1.4 感染方法 | 第38页 |
5.1.5 排卵囊情况 | 第38页 |
5.1.6 组织样品的分离 | 第38页 |
5.1.7 荧光定量 PCR 引物设计与合成 | 第38-39页 |
5.1.8 组织 RNA 提取与 cDNA 合成 | 第39-40页 |
5.1.9 实时荧光定量 PCR | 第40页 |
5.1.10 数据分析 | 第40页 |
5.2 结果与分析 | 第40-43页 |
5.2.1 感染和排卵囊情况 | 第40-41页 |
5.2.2 IL-17 及其相关细胞因在感染鸡只气管组织的变化情况 | 第41-42页 |
5.2.3 IL-17 及其相关细胞因在感染鸡只脾脏组织的变化情况 | 第42-43页 |
5.3 讨论 | 第43-44页 |
5.4 小结 | 第44-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53-54页 |