摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
英文缩写词一览表 | 第11-15页 |
第1章 引言 | 第15-35页 |
1.1 膜连蛋白A2(AXNA2)与肿瘤研究进展 | 第15-33页 |
1.1.1 膜联蛋白家族简介 | 第15-16页 |
1.1.2 ANXA2的生物学特性 | 第16-18页 |
1.1.3 ANXA2与肿瘤 | 第18-27页 |
1.1.4 ANXA2与运动相关蛋白 | 第27-33页 |
1.2 RNAi技术 | 第33-35页 |
1.2.1 RNAi技术简介 | 第33-34页 |
1.2.2 RNAi应用于胃癌基因治疗 | 第34-35页 |
第2章 本课题的研究内容与意义、技术路线及创新之处 | 第35-37页 |
第3章 靶向AXNA2的siRNA质粒的构建以及SGC-7901细胞转染 | 第37-47页 |
3.1 实验材料、主要试剂及仪器设备 | 第37-39页 |
3.1.1 实验材料 | 第37页 |
3.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第37-38页 |
3.1.3 主要试剂配制方法 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-43页 |
3.2.1 靶向ANXA2基因siRNA的设计与合成 | 第39-40页 |
3.2.2 重组质粒的构建与保存 | 第40页 |
3.2.3 质粒小量制备 | 第40-41页 |
3.2.4 质粒质量的鉴定 | 第41-42页 |
3.2.5 细胞培养 | 第42-43页 |
3.2.6 胃癌SGC-7901细胞转染 | 第43页 |
3.2.7 统计学分析 | 第43页 |
3.3 实验结果 | 第43-45页 |
3.3.1 质粒纯度、浓度的检测 | 第43-44页 |
3.3.2 胃癌SGC-7901细胞转染效率的评估 | 第44-45页 |
3.4 讨论 | 第45-47页 |
第4章 ANXA2基因表达下调对SGC-7901细胞增殖、迁移能力的初步研究 | 第47-59页 |
4.1 实验材料、主要试剂及仪器设备 | 第47-48页 |
4.1.1 实验材料 | 第47页 |
4.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第47-48页 |
4.1.3 主要试剂配制方法 | 第48页 |
4.2 实验方法 | 第48-51页 |
4.2.1 细胞凋亡的形态学检测 | 第48-49页 |
4.2.2 细胞周期检测 | 第49页 |
4.2.3 细胞运动能力检测 | 第49-50页 |
4.2.4 FAK与ANXA2基因共定位表达检测 | 第50-51页 |
4.2.5 统计学分析 | 第51页 |
4.3 实验结果 | 第51-56页 |
4.3.1 ANXA2表达下调后对胃癌SGC-7901细胞凋亡的形态学分析 | 第51-52页 |
4.3.2 ANXA2表达下调后对胃癌SGC-7901细胞周期检测 | 第52-54页 |
4.3.3 ANXA2表达下调后对胃癌SGC-7901细胞运动能力检测 | 第54-55页 |
4.3.4 FAK与ANXA2基因表达共定位实验 | 第55-56页 |
4.4 讨论 | 第56-59页 |
第5章 ANXA2基因表达下调后对部分ANXA2相关基因表达的调节研究 | 第59-77页 |
5.1 实验材料、主要试剂及仪器设备 | 第59-62页 |
5.1.1 实验材料 | 第59页 |
5.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第59-60页 |
5.1.3 主要试剂配制方法 | 第60-62页 |
5.2 实验方法 | 第62-68页 |
5.2.1 RT-PCR实验方法 | 第62-65页 |
5.2.2 Western blot实验方法 | 第65-68页 |
5.3 实验结果 | 第68-74页 |
5.3.1 SGC-7901细胞总RNA检测 | 第68-69页 |
5.3.2 S100A10、tPA、β-actin各基因最适退火温度、循环参数的确定 | 第69-71页 |
5.3.3 SGC-7901细胞总蛋白定量 | 第71-72页 |
5.3.4 ANXA2对其运动相关基因(S100A10、tPA、β-actin)mRNA和蛋白表达水平的影响 | 第72-74页 |
5.4 讨论 | 第74-77页 |
结论 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-91页 |
致谢 | 第91-93页 |
攻读硕士学位期间的科研成果 | 第93页 |