摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
前言 | 第11-14页 |
第一部分 具核梭杆菌上调结直肠癌细胞中LncRNA EVADR的水平并促进EMT发生 | 第14-35页 |
1 引言 | 第14页 |
2 实验材料 | 第14-19页 |
2.1 主要仪器 | 第14-15页 |
2.2 主要试剂 | 第15-17页 |
2.3 组织标本 | 第17页 |
2.4 主要溶液及试剂配制 | 第17-19页 |
3 实验方法 | 第19-27页 |
3.1 临床标本采集 | 第19页 |
3.2 临床标本信息 | 第19-20页 |
3.3 检测结直肠组织具核梭杆菌的检测 | 第20-21页 |
3.4 HTA与LncRNA芯片 | 第21-22页 |
3.5 结直肠癌细胞株培养 | 第22-23页 |
3.6 梭杆菌培养 | 第23页 |
3.7 具核梭杆菌感染模型建立 | 第23-24页 |
3.8 PCR定量检测实验 | 第24-26页 |
3.9 细胞蛋白提取 | 第26页 |
3.10 细胞蛋白浓度测定与变性 | 第26页 |
3.11 Westernblot | 第26-27页 |
4 结果 | 第27-32页 |
4.1 具核梭杆菌在结直肠癌组织中富集 | 第27-28页 |
4.2 LncRNA EVADR在结直肠癌中明显高表达 | 第28-29页 |
4.3 LncRNA EVADR序列信息及二级结构 | 第29-31页 |
4.4 具核梭杆菌感染结直肠癌细胞促进LncRNA EVADR的升高 | 第31-32页 |
4.5 具核梭杆菌感染结直肠癌细胞后EMT标志物E-cadherin表达水平 | 第32页 |
5 讨论 | 第32-35页 |
第二部分 LncRNA EVADR对结直肠癌细胞体内外生物学特性的影响 | 第35-56页 |
1 引言 | 第35页 |
2 实验材料 | 第35-38页 |
2.1 主要仪器 | 第35-37页 |
2.2 主要试剂 | 第37-38页 |
3 实验方法 | 第38-46页 |
3.1 结直肠癌细胞株培养 | 第38-39页 |
3.2 实验动物 | 第39页 |
3.3 慢病毒感染结直肠癌细胞 | 第39-40页 |
3.4 PCR定量检测实验 | 第40-41页 |
3.5 细胞蛋白提取 | 第41-42页 |
3.6 细胞蛋白浓度测定与变性 | 第42页 |
3.7 Westernblot | 第42-43页 |
3.8 细胞增殖实验 | 第43页 |
3.9 细胞迁移实验 | 第43-44页 |
3.10 细胞侵袭实验 | 第44页 |
3.11 结直肠癌细胞裸鼠皮下成瘤实验 | 第44-45页 |
3.12 裸鼠尾静脉注射结直肠癌动物模型 | 第45-46页 |
4 结果 | 第46-53页 |
4.1 LncRNA EVADR对结直肠癌细胞体外生物学特性的影响 | 第46-51页 |
4.2 LncRNA EVADR对结直肠癌细胞体内生物学特性的影响 | 第51-53页 |
5 讨论 | 第53-55页 |
6 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
文献综述 具核梭杆菌促进结直肠癌相关性及LncRNA的调控机制 | 第61-73页 |
参考文献 | 第69-73页 |
攻读学位期间的科研成果 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |