缩略语 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 血浆中胃癌RNA标志物筛选鉴定 | 第13-31页 |
1.前言 | 第13-14页 |
2.材料与方法 | 第14-24页 |
2.1 实验材料 | 第14-22页 |
2.1.1 主要试剂 | 第14-15页 |
2.1.2 自配溶液 | 第15-16页 |
2.1.3 临床样本 | 第16-22页 |
2.1.4 临床样本收集分类标准 | 第22页 |
2.1.5 主要仪器 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-24页 |
2.2.1 血浆RNA的提取 | 第22-23页 |
2.2.2 血浆RNA的反转录 | 第23页 |
2.2.3 血浆中相关基因的检测 | 第23-24页 |
2.2.4 结果分析 | 第24页 |
3.实验结果 | 第24-29页 |
3.1 胃癌血浆中差异表达的RNA分析 | 第24-25页 |
3.2 训练组RNA实时定量PCR检测分析 | 第25-26页 |
3.3 训练组RNA表达水平ROC曲线分析 | 第26-27页 |
3.4 验证组RNA实时定量PCR检测分析 | 第27页 |
3.5 验证组RNA表达水平做ROC曲线分析 | 第27-28页 |
3.6 RGS18和PPBP与临床数据相关性分析 | 第28-29页 |
4.讨论 | 第29-30页 |
5.小结 | 第30-31页 |
第二章 m6A修饰RNA结合蛋白YTHDF2克隆表达及其活性分析 | 第31-51页 |
1.前言 | 第31-32页 |
2.材料与方法 | 第32-43页 |
2.1 实验材料 | 第32-34页 |
2.1.1 细胞系 | 第32页 |
2.1.2 主要试剂与材料 | 第32-33页 |
2.1.3 主要仪器 | 第33页 |
2.1.4 主要溶液的配制 | 第33-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-43页 |
2.2.1 细胞培养 | 第34页 |
2.2.2 总RNA的提取 | 第34-35页 |
2.2.3 RNA反转录 | 第35-36页 |
2.2.4 PCR扩增 | 第36页 |
2.2.5 PCR扩增产物与质粒的双酶切 | 第36-37页 |
2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第37页 |
2.2.7 琼脂糖凝胶DNA回收 | 第37-38页 |
2.2.8 PCR扩增产物与质粒的连接 | 第38-39页 |
2.2.9 转化 | 第39页 |
2.2.10 菌落PCR鉴定 | 第39-40页 |
2.2.11 重组质粒的提取 | 第40页 |
2.2.12 测序并序列比对分析 | 第40-41页 |
2.2.13 重组YTHDF2融合蛋白诱导表达分析 | 第41页 |
2.2.14 SDS-PAGE分析 | 第41-42页 |
2.2.16 重组YTHDF2蛋白活性分析 | 第42-43页 |
3.实验结果 | 第43-49页 |
3.1 YTHDF2基因扩增及重组质粒的构建 | 第43页 |
3.2 菌落PCR鉴定 | 第43-44页 |
3.3 测序及结果比对分析 | 第44-47页 |
3.4 重组YTHDF2融合蛋白诱导表达分析 | 第47-48页 |
3.5 重组YTHDF2融合蛋白纯化 | 第48-49页 |
3.6 重组YTHDF2融合蛋白活性分析 | 第49页 |
4.讨论 | 第49-50页 |
5.小结 | 第50-51页 |
总结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录 | 第60-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
综述 | 第65-71页 |
参考文献 | 第70-71页 |