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血浆中胃癌RNA标志物筛选验证与m~6A修饰RNA结合蛋白YTHDF2克隆表达研究

缩略语第7-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
第一章 血浆中胃癌RNA标志物筛选鉴定第13-31页
    1.前言第13-14页
    2.材料与方法第14-24页
        2.1 实验材料第14-22页
            2.1.1 主要试剂第14-15页
            2.1.2 自配溶液第15-16页
            2.1.3 临床样本第16-22页
            2.1.4 临床样本收集分类标准第22页
            2.1.5 主要仪器第22页
        2.2 实验方法第22-24页
            2.2.1 血浆RNA的提取第22-23页
            2.2.2 血浆RNA的反转录第23页
            2.2.3 血浆中相关基因的检测第23-24页
            2.2.4 结果分析第24页
    3.实验结果第24-29页
        3.1 胃癌血浆中差异表达的RNA分析第24-25页
        3.2 训练组RNA实时定量PCR检测分析第25-26页
        3.3 训练组RNA表达水平ROC曲线分析第26-27页
        3.4 验证组RNA实时定量PCR检测分析第27页
        3.5 验证组RNA表达水平做ROC曲线分析第27-28页
        3.6 RGS18和PPBP与临床数据相关性分析第28-29页
    4.讨论第29-30页
    5.小结第30-31页
第二章 m6A修饰RNA结合蛋白YTHDF2克隆表达及其活性分析第31-51页
    1.前言第31-32页
    2.材料与方法第32-43页
        2.1 实验材料第32-34页
            2.1.1 细胞系第32页
            2.1.2 主要试剂与材料第32-33页
            2.1.3 主要仪器第33页
            2.1.4 主要溶液的配制第33-34页
        2.2 实验方法第34-43页
            2.2.1 细胞培养第34页
            2.2.2 总RNA的提取第34-35页
            2.2.3 RNA反转录第35-36页
            2.2.4 PCR扩增第36页
            2.2.5 PCR扩增产物与质粒的双酶切第36-37页
            2.2.6 琼脂糖凝胶电泳第37页
            2.2.7 琼脂糖凝胶DNA回收第37-38页
            2.2.8 PCR扩增产物与质粒的连接第38-39页
            2.2.9 转化第39页
            2.2.10 菌落PCR鉴定第39-40页
            2.2.11 重组质粒的提取第40页
            2.2.12 测序并序列比对分析第40-41页
            2.2.13 重组YTHDF2融合蛋白诱导表达分析第41页
            2.2.14 SDS-PAGE分析第41-42页
            2.2.16 重组YTHDF2蛋白活性分析第42-43页
    3.实验结果第43-49页
        3.1 YTHDF2基因扩增及重组质粒的构建第43页
        3.2 菌落PCR鉴定第43-44页
        3.3 测序及结果比对分析第44-47页
        3.4 重组YTHDF2融合蛋白诱导表达分析第47-48页
        3.5 重组YTHDF2融合蛋白纯化第48-49页
        3.6 重组YTHDF2融合蛋白活性分析第49页
    4.讨论第49-50页
    5.小结第50-51页
总结第51-52页
参考文献第52-60页
附录第60-63页
致谢第63-65页
综述第65-71页
    参考文献第70-71页

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