| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 1 前言 | 第12-28页 |
| 1.1 病原学 | 第13-14页 |
| 1.2 分子生物学特征 | 第14-16页 |
| 1.3 蛋白组学特征 | 第16-19页 |
| 1.3.1 PRRSV 的非结构蛋白 | 第16页 |
| 1.3.2 PRRSV 的结构蛋白 | 第16-19页 |
| 1.3.2.1 次要结构蛋白 | 第16-17页 |
| 1.3.2.2 GP5 蛋白 | 第17-18页 |
| 1.3.2.3 M 蛋白 | 第18页 |
| 1.3.2.4 N 蛋白 | 第18-19页 |
| 1.4 流行病学 | 第19页 |
| 1.5 致病力 | 第19-21页 |
| 1.6 PRRSV 的致病机制 | 第21-22页 |
| 1.7 组织病理学变化 | 第22页 |
| 1.8 PRRSV 遗传变异 | 第22-24页 |
| 1.9 诊断 | 第24-26页 |
| 1.9.1 血清学检测 | 第24-25页 |
| 1.9.1.1 酶联免疫吸附试验（ELISA) | 第24页 |
| 1.9.1.2 血清中和试验(SNT) | 第24-25页 |
| 1.9.1.3 间接荧光抗体试验(IFA) | 第25页 |
| 1.9.1.4 免疫过氧化物酶单层试验(IPMA) | 第25页 |
| 1.9.2 分子生物学检测 | 第25-26页 |
| 1.10 PRRSV 的防治 | 第26-28页 |
| 1.10.1 建立防控部门，做好保障工作 | 第26页 |
| 1.10.2 做好宣传工作，普及科学防治知识 | 第26页 |
| 1.10.3 密切监测疫情，及时准确掌握疫情动态 | 第26页 |
| 1.10.4 结合实际，采取预防措施 | 第26-28页 |
| 1.10.4.1 提高饲养管理水平，改善猪舍环境 | 第26-27页 |
| 1.10.4.2 重视引种，净化猪群 | 第27页 |
| 1.10.4.3 科学制定消毒程序，防止病原菌扩散 | 第27页 |
| 1.10.4.4 严抓疫苗免疫，提高猪只抵抗力 | 第27-28页 |
| 1.11 本研究的目的和意义 | 第28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-43页 |
| 2.1 试验材料和仪器 | 第28-30页 |
| 2.1.1 样品 | 第28页 |
| 2.1.2 载体、菌株与细胞 | 第28-29页 |
| 2.1.3 试剂 | 第29-30页 |
| 2.1.4 主要设备及仪器 | 第30页 |
| 2.2 PRRSV 不同变异株鉴别诊断方法的建立 | 第30-39页 |
| 2.2.1 病毒增殖 | 第30-31页 |
| 2.2.1.1 细胞系 Marc-145 的培养及传代 | 第30-31页 |
| 2.2.1.2 病毒接种 | 第31页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第31页 |
| 2.2.3 病料及血清样品 RNA 提取 | 第31-32页 |
| 2.2.4 RT-PCR 反应 | 第32-33页 |
| 2.2.5 套式 PCR 反应 | 第33-34页 |
| 2.2.6 套式 PCR 产物的克隆及序列分析鉴定 | 第34-39页 |
| 2.2.6.1 PCR 产物纯化回收 | 第34-35页 |
| 2.2.6.2 PCR 产物与克隆载体 pJET1.2 连接反应 | 第35-36页 |
| 2.2.6.3 用氯化钙制备感受态细胞 TOP10 | 第36页 |
| 2.2.6.4 转化反应 | 第36页 |
| 2.2.6.5 重组质粒 DNA 的提取 | 第36-37页 |
| 2.2.6.6 重组质粒 DNA 的 PCR 鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.6.7 重组质粒 DNA 酶切鉴定 | 第38页 |
| 2.2.6.8 重组质粒的测序验证 | 第38-39页 |
| 2.2.7 方法检验 | 第39页 |
| 2.2.7.1 特异性试验 | 第39页 |
| 2.2.7.2 重复性试验 | 第39页 |
| 2.2.7.3 敏感性试验 | 第39页 |
| 2.2.7.4 方法应用检验 | 第39页 |
| 2.3 流行性病学调查 | 第39-43页 |
| 2.3.1 材料方法 | 第39-40页 |
| 2.3.2 技术路线 | 第40页 |
| 2.3.3 RNA 浓度测定 | 第40页 |
| 2.3.4 RT-PCR 反应 | 第40-41页 |
| 2.2.5 套式 PCR 反应 | 第41-43页 |
| 3 结果 | 第43-58页 |
| 3.1 标准毒 RNA 浓度测定表 | 第43页 |
| 3.2 PRRSV 经典株与高致病毒株单独感染与混合感染检测图 | 第43-44页 |
| 3.3 标准毒株重组质粒 PCR 及酶切鉴定 | 第44-45页 |
| 3.4 重组质粒的测序验证 | 第45-46页 |
| 3.5 方法检验 | 第46-48页 |
| 3.5.1 特异性试验 | 第46页 |
| 3.5.2 重复性试验 | 第46-47页 |
| 3.5.3 敏感性试验 | 第47-48页 |
| 3.6 方法应用 | 第48-53页 |
| 3.6.1 样品检测 | 第48页 |
| 3.6.2 PCR 产物重组质粒鉴定 | 第48-49页 |
| 3.6.3 测序验证 | 第49-53页 |
| 3.7 流行性病学调查 | 第53-58页 |
| 3.7.1 样品 RNA 浓度测定表 | 第53-54页 |
| 3.7.2 流行性病学调查 | 第54-57页 |
| 3.7.3 流行性病学调查结果统计 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
