中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩略词 | 第11-12页 |
第1章 引言 | 第12-15页 |
1.1 研究背景与立题依据 | 第12-14页 |
1.2 本文的研究内容与意义 | 第14-15页 |
第2章 文献综述 | 第15-19页 |
2.1 ADSCs 的成软骨诱导分化手段 | 第15-17页 |
2.1.1 利用外源性生长因子进行成软骨诱导 | 第15-16页 |
2.1.2 ADSCs 基因工程成软骨 | 第16-17页 |
2.1.3 ADSCs 与软骨细胞共培养 | 第17页 |
2.2 化学物质的作用 | 第17-18页 |
2.3 其他因素对 ADSCs 成软骨能力的影响 | 第18页 |
2.4 面临问题 | 第18-19页 |
第3章 实验材料和方法 | 第19-31页 |
3.1 研究对象 | 第19页 |
3.2 实验主要设备和仪器 | 第19-20页 |
3.3 实验路线 | 第20-21页 |
3.4 实验方法 | 第21-31页 |
3.4.1 脂肪干细胞和软骨细胞的的分离和培养 | 第21-23页 |
3.4.2 脂肪干细胞和软骨细胞的鉴定 | 第23-24页 |
3.4.3 脂肪干细胞和软骨细胞微球的制作 | 第24页 |
3.4.4 实验模型的建立及分组 | 第24-26页 |
3.4.5 制作石蜡切片 | 第26页 |
3.4.6 HE 染观察微球形态 | 第26页 |
3.4.7 阿利新蓝-核固红双染法鉴定诱导后 GAG 的表达 | 第26-27页 |
3.4.8 免疫组化染色法鉴定诱导后Ⅱ型胶原、X型胶原表达 | 第27-28页 |
3.4.9 DMB 染色法定量检测 GAG | 第28-29页 |
3.4.10 OHP 法定量检测总胶原 | 第29-30页 |
3.4.11 统计学分析 | 第30-31页 |
第4章 实验结果与分析 | 第31-39页 |
4.1 细胞培养结果 | 第31-32页 |
4.1.1 倒置显微镜观测 ADSCs 形态 | 第31页 |
4.1.2 倒置显微镜观测软骨细胞形态 | 第31-32页 |
4.2 细胞鉴定结果 | 第32-33页 |
4.2.1 ADSCs 的多向分化潜能鉴定 | 第32-33页 |
4.2.2 关节软骨细胞鉴定 | 第33页 |
4.3 各组微球细胞大体观察 | 第33-34页 |
4.4 组织学检查 | 第34-37页 |
4.4.1 HE 染色色 | 第34-35页 |
4.4.2 阿利新蓝-核固红染色 | 第35-36页 |
4.4.3 Ⅱ型胶原免疫组化染色 | 第36页 |
4.4.4 Ⅹ型胶原免疫组化染色 | 第36-37页 |
4.5 GAG 定量 | 第37-38页 |
4.6 总胶原定量 | 第38-39页 |
第5章 讨论 | 第39-46页 |
5.1 rADSCs 的选取 | 第39-40页 |
5.2 3D 微球及共培养环境的讨论 | 第40-41页 |
5.3 关于实验设计的讨论 | 第41-42页 |
5.4 ADSCs 与 ACs 最适诱导比例的探讨 | 第42-43页 |
5.5 共培养诱导与生长因子诱导的比较 | 第43-44页 |
5.6 Transwell 间接共培养机制探讨 | 第44-45页 |
5.7 实验设计的有限性讨论 | 第45-46页 |
第6章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |